紫草素提取工藝優化的研究*

陳夢婷楊 蕓 魏艷麗 覃倩菲 杜 泓 涂豪慧

（嘉興學院醫學院 浙江嘉興 314033）

紫草素提取工藝優化的研究*

陳夢婷*楊 蕓 魏艷麗 覃倩菲 杜 泓 涂豪慧

（嘉興學院醫學院 浙江嘉興 314033）

以紫草素作為研究對象，利用正交試驗法，以紫草的粉碎目數、乙醇用量、提取時間、提取溫度四因素安排實驗，選取超聲提取法的最佳條件。與傳統方法（回流提取，索氏提取，滲漉）提取紫草素進行比較，超聲提取法紫草素的提取率提高了2倍，同時簡化了提取工藝，縮短時間且節省溶劑用量。

提取工藝 紫草素 超聲波提取

紫草作為常用的傳統中藥，是食藥同源性植物，安全性高，國內外對于其有效成分紫草素的研究逐漸深入。傳統的涉及加熱回流的提取方法，在提取過程中勢必會造成一部分紫草素的損失。本文通過正交實驗優化超聲提取法的最佳條件，并與傳統提取方法進行比較。

一、儀器與試藥

Agilent 1200高效液相色譜儀；超聲波清洗器（寧波金達超聲波儀器廠）；MILLI-Q超純水儀（MILLIPORE公司）；新疆紫草購自成都荷花池中藥材專業市場，經鑒定為為紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma（Royle）Johnst.的干燥根；左旋紫草素對照品（中國食品藥品檢定所，批號110769-200405）；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

二、方法與結果

1.回流提取法

稱取10目的紫草粗粉10 g，加入無水乙醇100 mL，回流提取3 h，重復2次，合并提取液，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。乙醇回流提取法的平均提取率為0.545 mg/g，RSD = 2.03%。

2.索氏提取法

稱取10目的紫草粗粉10 g，裝入索氏提取器中，加入100 mL的無水乙醇，虹吸10次后收集提取液，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。乙醇索氏提取法的平均提取率為0.601 mg/g，RSD = 3.22%。

3.滲漉法

稱取10目的紫草粗粉10 g，用100 mL的無水乙醇浸泡過夜，并以1 mL/min的流速進行滲漉。24小時之后收集滲漉液，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。乙醇滲漉法的平均提取率為0.210 mg/g，RSD = 3.83%。

4.超聲波提取法

運用正交實驗的方法，以紫草的粉碎目數、加乙醇量、超聲提取時間和提取溫度為四因素，三水平L9（34）正交實驗法安排實驗（表1.2），以提取物中主要的有效成分紫草素的含量作為綜合評分指標優選的最佳工藝條件進行試驗。

稱取4 g的紫草粉末，將其置于錐形瓶中，加入無水乙醇后經超聲提取2次。將2次得到的濾液合并，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。

表1 紫草素提取因素水平表L9（34）

表2 正交實驗安排表

表3 正交實驗結果

表4 正交實驗方差表

對表3數據進行直觀分析可知，比較4個因素的極差，說明乙醇的用量對紫草素提取率的影響最大，而提取時間的影響最小。通過方差分析（表4），因素B和因素D的F比值大于1，表明各水平之間有顯著性差異，對紫草素提取率有明顯影響。因此可以確定紫草中紫草素的最佳提取工藝為A2B2C2D2。按此工藝條件進行試驗，平行操作3次，平均提取率為1.01 mg/g，RSD = 1.52%。

二、結語

通過正交試驗確定了超聲波提取法提取工藝的最佳條件：紫草粉碎目數為40目，乙醇量為32 g，提取時間為40 min，提取溫度為50℃。將超聲波提取法與傳統提取工藝相比較，超聲波提取法大幅度簡化紫草中紫草素的提取工藝，時間縮短為傳統提取法耗時的四分之一，且溶劑的消耗量也只需傳統方法的三分之一，大大的提高了提取效率且方法重現性更好。

嘉興學院重點SRT項目基金資助（851715067）

陳夢婷（1996.02-），女，嘉興學院醫學院2013年本科生。