類風濕關節炎患者血清CCN1水平變化及意義

徐京京，趙琳，張曉莉，王曉非

（中國醫科大學附屬盛京醫院，沈陽110004）

類風濕關節炎患者血清CCN1水平變化及意義

徐京京，趙琳，張曉莉，王曉非

（中國醫科大學附屬盛京醫院，沈陽110004）

目的 觀察類風濕關節炎（RA）患者血清富含半胱氨酸蛋白61（CCN1）水平變化，并探討其臨床意義。方法 選擇RA患者30例作為觀察組（RA活動期20例、穩定期10例）、健康體檢者20例作為對照組。采用酶聯免疫吸附法檢測兩組血清CCN1水平，收集實驗室指標，計算28個關節疾病活動度評分（DAS28）、簡化疾病活動性指數（SDAI）評分，用直線相關分析CCN1與相關指標的關系。結果 與對照組比較，觀察組血清CCN1水平升高，且RA活動期患者高于RA穩定期患者（P均＜0.05）。RA患者血清CCN1水平與類風濕因子、C反應蛋白、血沉、抗CCP抗體、DAS28評分、SDAI評分呈正相關（r分別為0.423、0.443、0.375、0.364、0.772、0.681，P均＜0.05）。結論 RA患者血清CCN1水平升高，CCN1可能參與了RA的炎癥反應過程。

類風濕關節炎；富含半胱氨酸蛋白61；細胞因子

富含半胱氨酸蛋白61（CCN1）是一種動態表達、富含半胱氨酸的分泌性肝素連接蛋白，是生長因子誘導的即刻早期基因產物，在多種細胞中表達，參與調節胞外基質形成、細胞趨化、黏附、增殖、凋亡等［1］。CCN1與結締組織增生、血管內皮修復、血管新生、腫瘤細胞凋亡密切相關［2］。研究顯示，CCN家族部分成員與類風濕關節炎（RA）等結締組織病發病可能有關［3］。本研究檢測RA患者血清CCN1水平，探討其臨床意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料 選取2015年1～6月本院收治的RA患者30例（觀察組），均符合2009年美國風濕病協會／歐洲抗風濕病聯盟提出的RA分類標準。其中男3例、女27例，年齡24～53（40±15）歲，RA活動期即28個關節疾病活動度評分（DAS28）＞3.2分20例、RA穩定期即DAS28≤3.2分10例。均排除腫瘤、感染、妊娠及其他自身免疫性疾病，且無嚴重基礎疾病（如肝病、腎功能異常、心功能不全等）。同期選擇體檢健康者20例作為對照組，男2例、女18例，年齡20～58（41±15）歲。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義。

1.2血清CCN1及相關指標檢測 采集各組入院次日清晨空腹靜脈血3 mL，離心后取上清，置PC管中-20℃保存。采用酶聯免疫吸附法檢測血清CCN1水平，嚴格按照試劑盒（上海活樂生物技術有限公司）說明書進行操作；用速率散射比濁法檢測C反應蛋白（CRP）；魏氏法檢測血沉（ESR）；散射免疫比濁法檢測類風濕因子（RF）、免疫球蛋白；酶聯免疫吸附法檢測抗環瓜氨酸多肽抗體（抗CCP抗體）。1.3 DAS28、簡化疾病活動性指數（SDAI）計算DAS28＝0.56×28個關節中壓痛關節數+0.28×28個關節中腫脹關節數+0.7×ESR+0.014×總體健康評分或視覺模擬評分；SDAI評分＝28個關節中壓痛關節數+28個關節中腫脹關節數+患者的總體評分+醫生的總體評分+CRP。

1.4統計學方法 采用SPSS18.0統計軟件。計量資料用xˉ±s表示，多組間比較采用方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗；用直線相關分析CCN1水平與相關指標的關系。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1兩組血清CCN1水平及相關實驗室指標比較見表1。

2.2RA患者血清CCN1與其他指標的關系 經直線相關分析，RA患者血清CCN1水平與CRP、ESR、RF、抗CCP抗體水平呈正相關（r分別為0.443、0.375、0.423、0.364，P均＜0.05）；與免疫球蛋白無相關性（r＝0.261，P＞0.05）；與DAS28評分、SDAI評分呈正相關（r分別為0.772、0.681，P均＜0.01）。

表1　各組檢測指標水平比較（±s）

表1　各組檢測指標水平比較（±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與RA穩定期比較，＃P＜0.05。

組別nCCN1（ng／L）CRP（mg／L）ESR（mm／h）RF（IU／mL）抗CCP抗體（AU／mL）免疫球蛋白（g／L）對照組201 199.87±135.20觀察組302 475.32±1 318.41*38±3635±18338±323501.37±413.7515.47±5.97 RA活動期202 683.86±1 321.36＃52±38＃45±14＃474±363＃703.30±520.24＃17.19±3.73 RA穩定期101 288.67± 557.3310±415±568±3497.50±85.2313.01±8.18

3　討論

CCN1是CCN家族重要成員，其開放閱讀框編碼381個氨基酸，包含四組保守獨立的模塊，四組模塊和其他多種因子相互作用，使其在生物體不同組織、細胞和發育階段中發揮多重生物效應［4］。CCN1廣泛存在于人類多種組織器官，但在正常人中表達相對較低。CCN1主要通過與細胞表面分子結合，作為信號轉導受體來發揮調節細胞的作用［5］。CCN1具有明顯的促有絲分裂活性和趨化性，參與干細胞分化、組織炎癥等過程，調節細胞增生、遷移、凋亡。Komatsu等［3］在研究RA和骨關節炎（OA）時證實，在對照組、OA組、RA組中均未檢測到CCN3、CCN6，但可檢測到CCN1、CCN2、CCN4、CCN5，以CCN1為著，檢測部位以軟骨、關節液為主。

RA在病理組織學上以炎癥細胞滲出、滑膜增殖性改變、血管翳形成為主，與細胞因子介導的免疫炎癥損傷、血管增生、滑膜細胞增殖及凋亡異常密切相關。CCN1能夠增加炎細胞的趨化和黏附，在炎癥因子的刺激下，調節前列腺素、NO、組胺等參與的生物學效應［6，7］。過表達的CCN1會刺激滑膜細胞分泌IL-6、IL-8、IL-17等炎癥因子，參與炎癥微環境的形成。RA患者滑液中的炎癥因子TNF-α、IFN-γ能上調CCN1表達，過表達的CCN1可能通過促進滑膜細胞分裂、抑制滑膜細胞凋亡的作用而促進滑膜細胞增殖，從而參與滑膜細胞的過度增生。另一方面，RA患者成纖維樣滑膜細胞（FLS）中CCN1產生增多，促進了FLS增殖，這與CCN1通過αvβ5／Akt／NF-κB信號通路活化IL-6的作用以及IL-17介導相關發病機制有關［8］。

CCN1蛋白能夠促進間葉細胞積聚、分化，加速成軟骨細胞的標志物即早熟的Ⅱ型膠原表達，使其分化成為軟骨細胞，促進硫酸鹽的沉積。在骨骼發育方面，CCN1的表達是由Wnt／β-catenin信號途徑調節的，雖然詳細機制尚未清楚，但是成骨細胞和內皮細胞間存在CCN1和血管內皮生長因子的相互調節網絡。在體外，CCN1過表達促進軟骨細胞成熟而抑制內源性CCN1功能，導致其成熟障礙［9］。這在RA病變過程中可能發生于血管翳侵蝕軟骨、軟骨細胞增生等過程。提示CCN1軸在軟骨細胞簇形成中起重要作用。

CCN1能夠誘導成纖維細胞衰老。研究指出CCN1結合整合素后能誘導成纖維細胞衰老進程，配合CCN1引發DNA損傷反應、激活p53、活化復合物，激活活性氧依賴的p16（INK4A）／pRb通路，導致成纖維細胞衰老，分泌抗纖維化物質和提高抗纖維化基因表達［10］。這無疑為功能組織被瘢痕、纖維組織取代引起的一類疾病提供了新的研究方向，如RA肺間質改變等。

本研究結果提示，RA患者血清CCN1水平明顯高于正常人，活動期RA患者CCN1水平更高，且其水平與CRP、ESR、DAS28評分、SDAI評分等RA評估指標相關，提示CCN1與RA炎癥反應、活動程度相關，可能在RA炎癥反應過程中發揮作用。

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10.3969／j.issn.1002-266X.2016.21.023

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1002-266X（2016）21-0058-02

遼寧省科學技術計劃項目（2014225017）。

王曉非（E-mail：1361611840＠qq.com）

（2016-01-18）