NT-ProBNP與脂蛋白a測定在2型糖尿病腎損傷中的應用研究

袁玉玶，王 麗，魏學文，余漢忠，權翠俠

(徐州醫科大學附屬市立醫院檢驗科，江蘇徐州 221002)

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·論 著·

NT-ProBNP與脂蛋白a測定在2型糖尿病腎損傷中的應用研究

袁玉玶，王 麗，魏學文，余漢忠，權翠俠

(徐州醫科大學附屬市立醫院檢驗科，江蘇徐州 221002)

目的 探討氨基末端B型利鈉肽前體(NT-ProBNP)與脂蛋白a在2型糖尿病患者中的變化。方法 健康對照組62例，2型糖尿病患者129例，其中不伴糖尿病腎病64例(DM組)、伴糖尿病腎病65 例(DN組)。干式免疫熒光定量法測定NT-ProBNP，免疫比濁法測定血清脂蛋白a與胱抑素C(Cys-C)。結果 健康對照組血清NT-ProBNP與脂蛋白a水平為(58.62±24.31)pg/mL、(102.35±43.50)mg/L；DM組為(368.70±356.50)pg/mL、(192.19±184.40)mg/L；DN組為(820.66±730.85)pg/mL、(328.17±285.71)mg/L。健康對照組血清Cys-C水平為(0.52±24.31)mg/L；DM組為(0.84±0.12)mg/L；DN組為(1.97±1.15)mg/L。結論 NT-ProBNP、脂蛋白a和糖尿病及其微血管病變密切相關，可作為診斷糖尿病腎病和評估腎臟損傷程度的指標。

糖尿病； 腎臟損傷； 氨基末端B型利鈉肽前體； 脂蛋白a

糖尿病是由多種病因引起的內分泌代謝性疾病，最常見慢性并發癥為糖尿病慢性腎臟疾病，此為終末性腎衰的主要原因，早期積極干預是改變患者預后的關鍵[1]。研究表明，氨基末端B型利鈉肽前體(NT-ProBNP)可能是預測慢性腎臟疾病的新標志物[2]。糖尿病引起動脈粥樣硬化可導致微血管病變，糖尿病腎病為糖尿病微血管病變的并發癥。脂蛋白a水平升高與冠狀動脈粥樣樣硬化的發生密切相關，是當前心腦血管疾病極有價值的危險性預測指標。研究表明，脂蛋白a與糖尿病微血管病變密切相關，是2型糖尿病腎病患者腎損傷進展的獨立危險因素[3]；胱抑素C(Cys-C)反映廣泛內皮功能紊亂和血管損傷，是與腎小球濾過率相關的重要指標，也是評價糖尿病腎損傷可靠、敏感的內源性指標[4]。筆者通過檢測血清NT-ProBNP與脂蛋白a水平在2型糖尿病患者中的變化，將其與Cys-C進行相關性分析，探討血清NT-ProBNP與脂蛋白a聯合檢測對2型糖尿病患者腎損傷的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 根據2010年中國糖尿病學會研究制訂的中國人2型糖尿病的診斷治療標準[5]，選擇2011～2015年在本院確診的2型糖尿病患者129例[其中不伴糖尿病腎病64 例(DM組)、伴糖尿病腎病65 例(DN組)]，年齡25～82歲。所有入選患者均排除急慢性心力衰竭、急性腦血管意外、冠心病等。健康體檢者62例(健康對照組)，年齡20～66歲，排除肝臟、腎臟、內分泌和心腦血管疾病。

1.2 方法

1.2.1 樣品收集 禁食12 h，早上空腹抽血5 mL，其中2 mL血用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝混勻；3 mL血待血清析出，3 000 r/min離心10 min，分離血漿和血清。

1.2.2 測量儀器 NT-ProBNP測定采用干式免疫熒光定量法，試劑和標準品由基蛋生物科技公司提供；儀器為基蛋生物科公司Getein110型分析儀。脂蛋白a與Cys-C測定采用膠乳增強免疫比濁法和免疫比濁法，試劑和標準品由萬泰德瑞診斷技術有限公司提供；儀器為貝克曼公司AU5800型生化分析儀。

2 結 果

血清NT-ProBNP、脂蛋白a與Cys-C檢測結果 2型糖尿病患者NT-ProBNP水平顯著高于健康對照組(P<0.05),脂蛋白a水平顯著高于健康對照組(P<0.05)。DN組NT-ProBNP與脂蛋白a水平顯著高于DM組(P<0.05)和健康對照組(P<0.05)。見表1。

表1 血清NT-ProBNP、脂蛋白a與Cys-C檢測結果比較

3 討 論

B型利鈉肽(BNP)由心肌細胞受刺激后產生，初始產物為前BNP前體(Pro-ProBNP)，該肽的1個26氨基信號肽被立即去除，形成含108個氨基酸的BNP前體(ProBNP)，后者在內切酶的作用下裂解為含76個氨基酸、無生物活性的NT-ProBNP和含32個氨基酸、有活性的BNP。因為NT-ProBNP半衰期長，穩定性好，故臨床通過檢測血漿NT-ProBNP來了解BNP水平。BNP通過受體介導與利鈉肽受體C(NPR-C)結合被清除，也可通過血流的中性肽鏈內切酶而降解。BNP主要通過與利鈉肽受體A(NPR-A)作用，發揮生物學效應，在調節血壓、血容量、水鹽平衡等方面發揮著重要作用。

2型糖尿病引起慢性組織器官損傷是1個漫長過程，在慢性組織器官損傷過程中會產生多種不良化學物質，導致血管緊張度與水鹽平衡紊亂，發生細胞過度肥大、纖維化等病理改變，而腎臟發生上述變化時不僅激活BAAS系統使致密斑球旁細胞產生腎索，同時也激活心臟利鈉肽系統，可致BNP分泌增加。NPR-A、NPR-C主要存在于腎臟及血管，腎損傷引起腎臟NPR-A、NPR-C受損。NPR-A減少將引起BNP反應性增加[6]。BNP的清除主要由NPR-C介導，通過細胞內吞作用，最終由細胞內的溶酶體降解，而NPR-C減少可引起BNP升高。此外，BNP可通過非特異中性肽鏈內切酶打開利鈉肽環狀結構而降解，此酶在肺臟及腎臟中水平較高。腎臟中BNP具有擴張腎小球入球動脈、收縮出球動脈等功能，有助于提高腎小球濾過率。腎損傷患者腎小球濾過率下降可能導致BNP升高，促使腎小球濾過率增加；2型糖尿病腎損傷患者常伴有鈉、水潴留，可致心臟負荷加重，使BNP分泌增加。糖尿病腎損傷是2型糖尿病的1種慢性并發癥，BNP可直接作用于出球小動脈，加重腎小球高濾過、高灌注狀態，引起腎臟損傷。本研究結果顯示，DN組患者NT-ProBNP水平高于DM組患者(P<0.05)，因此2型糖尿病患者除考慮常見急慢性心力衰竭、冠心病等因素引起的NT-ProBNP水平升高，還應考慮糖尿病腎臟損傷引起的NT-ProBNP水平升高。

脂蛋白a是1種由肝臟合成的特異脂蛋白，和低密度脂蛋白(LDL)結構相似，除含有載脂蛋白B(ApoB)外，還含有與纖維蛋白溶酶原(PLG)結構相似的載脂蛋白A(ApoA)，其主要生理功能尚未完全闡明，猜測其可能參與血清脂質到組織細胞的轉運。由于ApoA與PLG在結構上有同源性，ApoA可能與PLG競爭細胞表面的PMC受體或者直接阻礙PLG的激活，從而抑制纖維蛋白的溶解，促進動脈粥樣硬化的形成。血清脂蛋白a水平升高反映了廣泛內皮功能紊亂和血管損傷，是與動脈硬化病變進展過程中疾病演進的相關標志。由各種原因導致水平增高的脂蛋白a也可直接促進粥樣血栓的形成。2型糖尿病引起的血管并發癥，以大血管病變引起的冠心病和微血管病變引起的糖尿病腎病最為常見[7-9]。在腎臟中，血清脂蛋白a可滲透到達內膜下與血管壁膠原蛋白、糖蛋白形成動脈粥樣斑塊，破壞內膜的完整性，還可和血管內膜基質成分(葡聚糖胺、蛋白聚糖和6-硫酸軟骨素)結合，引起腎小球基底膜增厚及毛細血管阻塞，進一步導致腎臟微血管內皮損傷和功能減退。2型糖尿病患者脂蛋白a水平升高，會造成腎小球毛細血管阻塞及微循環障礙，并通過某些生長因子的生成，促進腎動脈血管的硬化，導致腎病綜合征形成。提示脂蛋白a水平與腎病綜合征的發展過程緊密相關，其水平高低一定程度上反映糖尿病腎損傷的嚴重程度。

Cys-C作為1種小分子蛋白(相對分子質量為13×103)，是胱氨酸蛋白酶的1種抑制劑，機體所有有核細胞均可表達。循環血液中Cys-C能自由透過腎小球，在近曲小管幾乎全部被上皮細胞攝取并分解。Cys-C水平不受飲食、身高、體質量、年齡、惡性腫瘤等影響，是反映腎小球濾過率的1個敏感、特異指標[10]。2型糖尿病患者腎小球通透性改變，包括腎小球濾過膜電荷的丟失及基底膜孔徑的改變，在糖尿病腎病的早期均表現為Cys-C水平升高。

筆者研究發現2型糖尿病患者NT-ProBNP與脂蛋白a水平顯著高于健康對照組,而DN組患者NT-ProBNP與脂蛋白a水平顯著高于DM組患者。糖尿病患者NT-ProBNP與脂蛋白a檢測結果與Cys-C相關性分析發現其呈正相關，表明NT-ProBNP、脂蛋白a水平與糖尿病腎病的腎臟損傷程度平行。NT-ProBNP、脂蛋白a和Cys-C聯合檢測可作為診斷糖尿病腎病和評估腎臟損傷程度的指標，對研究2型糖尿病患者腎損傷具有重要價值。

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Clinical value of detection of N-terminal pro-brain natriuretic peptide and lipoprotein(a) in patients with type 2 diabetic nephropathy

YUANYuping,WANGLi,WEIXuewen,YUHanzhong,QUANCuixia

(DepartmentofClinicalLaboratory,theMunicipalHospitalAffiliatedofXuzhouMedicalUniversity,Xuzhou,Jiangsu221002,China)

Objective To observe the changes of N-terminal pro-brain natriuretic peptide(NT-ProBNP) and lipoprotein(a)[LP(a)] level in patients with type 2 diabetes and to investigate their clinical significance in patients with diabetic nephropathy.Methods A total of 62 healthy individuals were selected as control group,and 64 patients with type 2 diabetes without diabetic nephropathy were selected as DM group and 65 patients type 2 diabetes combined with diabetic nephropathy were chosen as DN group.The levels of NT-ProBNP and LP(a) was detected by the methods of dry type immune fluorescence quantitative and latex enhanced immune turbidity respectively.Results The level of serum NT-ProBNP in DM group[(368.70±356.50)pg/L] was significantly higher than that in the control group[(58.62±24.31)pg/L],P<0.05.The level of LP(a) in DM group[(192.19±184.40)mg/L] was significantly higher than that in control group[(102.35±43.50)mg/L],P<0.05.And the level of NT-ProBNP[(820.66±730.85)pg/mL] and LP(a)[(328.17±285.71)mg/L] in DN group were significantly higher than that in DM group(P<0.05).Conclusion NT-ProBNP and LP(a) in type 2 diabetic patients may correlate with type 2 diabetes and diabetic microangiopathy,which can be used as the reliable clinical markers for assessing the severity and diagnosis of diabetic nephropathy.

diabetes; diabetic nephropathy; N-terminal pro-brain natriuretic peptide; lipoprotein(a)

袁玉玶，女，副主任技師，主要從事免疫方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.021

A

1673-4130(2016)21-3007-03

2016-03-28

2016-06-18)