病態造血細胞分析在MDS臨床診斷中的應用研究

周以華

(江蘇省鹽城市大豐人民醫院檢驗科 224100)

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·臨床研究·

病態造血細胞分析在MDS臨床診斷中的應用研究

周以華

(江蘇省鹽城市大豐人民醫院檢驗科 224100)

目的 探討病態造血細胞應用于骨髓增生異常綜合征(MDS)診斷的臨床價值。方法 選取2011年1月至2015年5月該院收治的MDS患者72例作為觀察組。另選取巨幼細胞性貧血(MA)60例、特發性血小板減少性紫癜(ITP)56例、慢性再生障礙性貧血(CAA)52例、陣發性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)16例作為對照組。收集所有患者的臨床資料，對患者外周血指標及骨髓細胞形態變化情況進行研究分析。結果 72例MDS患者外周血和骨髓病態造血細胞比較,紅系病態造血方面差異無統計學意義(P>0.05)。粒系病態造血、巨核系病態造血、原幼細胞方面差異有統計學意義(P<0.05)。通過與對照組比較發現，與MDS密切相關的病態造血細胞形態包括多核紅細胞、環形鐵粒幼細胞、環形核粒細胞、Pleger-Huet樣畸形、小巨核細胞。結論MDS患者一般會發生外周血及骨髓細胞形態學病態造血，但兩者的變化關系較為復雜，難以依靠單種指標變化情況對患者進行確診。通過外周血指標聯合骨髓細胞形態學分析可發現特殊的病態造血現象，有助于提高MDS的診斷，減少誤診、漏診的可能。

外周血指標； 骨髓形態學； 骨髓增生活躍； 骨髓增生異常綜合征

骨髓增生異常綜合征(MDS)是一組異質性克隆性造血干細胞疾病，其生物學特征是髓系細胞(粒系、紅系、巨核系)一系或多系發育異常(或稱病態造血)和無效造血，可以伴有原始細胞增多[1]。該病主要發病于老年人群中，其他年齡階段發生率較低。該病發生后如不能得到及時有效的治療，極有可能引發白血病，從而帶來更大影響[2]。為提高對MDS的臨床診斷效果，研究選取本院近年收治的MDS患者72例作為研究對象，其具體分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月至2015年5月本院收治的原發性MDS患者72例，其中男性患者44例，女性患者28例；所選患者中年齡最大為79歲，最小為46歲，中位年齡62.5歲；MDS分型診斷根據為2008年世界衛生組織的分型標準。觀察組包括難治性貧血(RA)28例、環形鐵粒幼細胞難治性貧血(RARS)2例、伴多系發育異常難治性貧血(RCMD) 18例、難治性貧血伴原始細胞增多-Ⅰ(RAEB-Ⅰ) 12例、難治性貧血伴原始細胞增多-Ⅱ(RAEB-Ⅱ)8例、MDS未分類(MDS-U) 2例、MDS伴單純5q—2例。另選取巨幼細胞性貧血(MA)60例，特發性血小板減少性紫癜(ITP)56例，慢性再生障礙性貧血(CAA)52例，陣發性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)16例作為對照組。MA患者的中位年齡為41.0(12～70)歲，ITP患者的中位年齡為46.0(11～80)歲，CAA患者的中位年齡為40.0(15～64)歲，PNH患者的中位年齡為43.0(14～72)歲。

1.2 方法

1.2.1 外周血檢查方法 采集患者靜脈血2 mL，進行抗凝處理后，應用貝克曼-庫爾特全自動五分類血細胞分析儀對患者血液中白細胞計數(WBC)、血小板計數(PLT)、血紅蛋白(Hb)、紅細胞平均體積(MCV)、網織紅細胞(Ret)進行測定，所有指標每日進行室內質量控制。WBC和PLT同時進行手工計數。外周血涂片為新鮮采得，抗凝血液不超過2 h，應用瑞氏-姬姆薩染液進行染色，觀察200個細胞形態變化情況。所有患者涂片由2名檢驗師獨立評估。

1.2.2 骨髓細胞學檢查方法 所有患者在進行藥物治療前均進行骨髓常規穿刺，應用瑞氏-姬姆薩染色液進行骨髓涂片染色，然后應用低倍鏡觀察骨髓細胞增生情況。應用光學顯微鏡計數200個細胞，觀察骨髓細胞的形態學改變情況。將全部骨髓片進行鐵染色，計數環形鐵粒幼細胞，細胞計數不小于6顆或不小于二分之一周的幼紅細胞作為環形鐵粒幼紅細胞診斷標準。留取骨髓樣本送蘇州大學附屬第一人民醫院進行骨髓活檢、染色體、流式細胞學及融合基因檢測。

1.3 統計學處理 將數據納入SPSS19.0統計軟件中進行分析，計數資料以率表示，采用χ2比較。以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 外周血指標變化情況 28例患者中性粒細胞(ANC)<1.8×109/L，占總數的38.89%；36例患者PLT<100×109/L，占總數的50.00%；72例患者Hb<100 g/L，占總數的100.00%；70例患者MCV>110 fL，占總數的97.22%；18例患者Ret<0.5%，占總數的25.00%。外周血指標同時3項減少的患者有40例(占55.56%)；外周血指標同時2項減少的患者有22例(占30.56%)；另有10例外周血指標只減少1項(占13.89%)。

2.2 骨髓象變化情況 本研究所選取的72例MDS患者中，骨髓增生極度活躍4例(占5.56%)；骨髓增生顯著活躍42例(占58.33%)；骨髓增生活躍24例(占33.33%)；骨髓增生減低2例(占2.78%)。

2.3 外周血和骨髓病態造血細胞比較 紅系病態造血包括巨大紅細胞(后簡稱巨大紅)、異形紅細胞、多核紅細胞(后簡稱多核紅)、核分葉異常、環形鐵粒幼紅細胞。粒系病態造血包括雙核粒細胞、環形核粒細胞(后簡稱環形核)、缺顆粒型粒細胞、Pleger-Huet樣畸形(后簡稱Pelger)、粒細胞細胞質空泡形成。巨核系病態造血包括巨大血小板、畸形血小板、多圓核巨核細胞(后簡稱多核巨核)、單圓核巨核細胞及淋巴樣小巨核細胞(后簡稱小巨核)。72例MDS患者外周血和骨髓病態造血細胞比較，紅系病態造血方面差異無統計學意義(P>0.05)。粒系病態造血、巨核系病態造血、原幼細胞方面差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.4 觀察組與對照組骨髓病態造血細胞變化比較 MDS與MA比較，紅系病態造血巨大紅、粒系環形核、巨核系多核巨核無顯著變化，但紅系多核紅、粒系Pelger、巨核系小巨核MDS變化比例增高。MDS與PNH比較，紅系病態造血巨大紅、巨核系多核巨核無顯著變化，但是紅系多核紅、粒系環形核和Pelger、巨核系小巨核MDS變化比例增高。MDS與ITP比較，巨核系多核巨核無顯著變化，其他有顯著變化。MDS與CAA比較，病態造血在紅系、粒系、巨核系變化差異顯著。見表2。

表1 MDS患者外周血和骨髓病態造血細胞比較[n=72，n(%)]

表2 觀察組與對照組骨髓細胞病態造血指標比較[n(%)]

3 討 論

MDS是一種臨床常見髓系疾病，該病以骨髓衰竭、髓細胞分化增多以及成熟異常為主要特征。MDS的發病原因可為原發性，也可能受到長期化療、放療等因素影響而發病。該病主要發生于老年人群，而在其他年齡階段發病率相對較低[3]。本研究所選取的72例MDS患者中，骨髓增生極度活躍4例(占5.56%)；骨髓增生顯著活躍42例(占58.33%)；骨髓增生活躍24例(占33.33%)；骨髓增生減低2例(占2.78%)。28例患者ANC<1.8×109/L，占總數的38.89%；36例患者PLT<100×109/L，占總數的50.00%；72例患者Hb<100 g/L，占總數的100.00%?？梢娀颊吖撬柙錾傮w較為活躍，在臨床上主要表現為白細胞減少、貧血、血小板減少或全血細胞減少。本研究MCV>110 fL有35例(占97.22%)，外周血及骨髓出現巨大紅。如果患者長期保持血常規檢查，其MCV有助于MDS診斷，且伴隨著Hb的逐漸下降,MDS患者MCV有1個不斷增加的變化過程[4]。72例MDS患者外周血和骨髓病態造血細胞比較，紅系病態造血方面差異無統計學意義(P>0.05)。粒系病態造血、巨核系病態造血、原幼細胞方面差異有統計學意義(P<0.05)。因此，在外周血指標檢查中，一旦發現異形紅細胞、巨大紅、缺顆粒型粒細胞，Pleger，巨大、畸形血小板、原幼細胞，須進行更加細致的形態學觀察，進一步為骨髓細胞形態診斷MDS提供依據。

MDS紅系、粒系、巨核系中可見顯著病態造血，但臨床意義不同。2008年，世界衛生組織根據外周血指標和骨髓象特點把MDS分為RCUD(RA、RN、RT)、RARS、RCMD、RAEB-1、RAEB-2、MDS-U、MDS伴單純5q—共7大亞型[5]。骨髓涂片中判斷各系發育異常的定量標準為一系病態細胞需占該系血細胞10%以上，此為MDS的確定診斷標準之一[6]。有證據表明，MDS中的異常細胞源自惡性克隆，較少由正常細胞轉化而來[7]。惡性克隆與正?？寺”容^更容易發生異常改變，但某些患者中病態造血并非來自惡性克隆。因此，病態造血反映MDS的本質，但不是MDS的特異表現。病態造血是1個復雜機制，可能受多種因素影響。多種疾病均出現病態造血，如MA、ITP、PNH、CAA及其他溶血性疾病，藥物中毒，酗酒，某些傳染疾病(如肺結核、人免疫缺陷病毒、真菌)，肝臟疾病，系統性紅斑狼瘡，重金屬中毒[8]。因此，診斷MDS時需排除上述情況。為研究各種病態造血在MDS中的診斷價值，本研究比較了MDS中病態造血的細胞與MA、PNH、ITP、CAA中的異常細胞，這些患者也存在造血細胞減少及病態造血。巨幼細胞性貧血臨床表現有全血細胞減少和骨髓涂片顯著的病態造血，可能誤診為MDS，尤其是RCMD亞型[9]。本研究顯示，MDS與MA比較，紅系病態造血巨大紅、粒系環形核、巨核系多核巨核無顯著變化，但紅系多核紅、粒系Pelger、巨核系小巨核變化較大，有輔助診斷價值。PNH是1種獲得性造血干細胞病，臨床表現以慢性持續性血管內溶血，并常伴有全血細胞減少為特征。MDS同屬于造血干細胞克隆性疾病，在某些情況下，兩者難于區分。本研究顯示，MDS與PNH比較，紅系病態造血巨大紅、巨核系多核巨核無顯著變化，但是紅系多核紅、粒系環形核和Pleger、巨核系小巨核MDS變化比例增高。ITP是較常見的出血性疾病，由血小板免疫性破壞過多所引起。伴有巨核細胞增生異常的MDS易誤診為ITP，但ITP在紅系和粒系中少見病態造血和小巨核，因此容易區分。CAA骨髓中巨核細胞數量減少，罕見巨核細胞形態異常。研究中有2例MDS骨髓增生減低，骨髓涂片中可見發育異常的粒、紅、巨核系細胞，可見原始細胞，特別是小巨核，在其外周血片中可見發育異常的中性粒細胞，以上發現有助于“MDS合并骨髓增生低下”的診斷。近年來，隨著細胞遺傳學、流式細胞術、骨髓單個核細胞免疫表型分析和第2代測序技術等新診斷技術在臨床的推廣應用，MDS診斷已進入新時代。但由于缺乏特定的生物學和遺傳學標志物，MDS診斷仍依賴于外周血及骨髓細胞形態學檢查。在臨床工作中，應避免將非克隆性疾病引起的病態造血誤診為MDS。本研究顯示，與MDS密切相關的異常形態包括多核紅、環形鐵粒幼紅細胞、環形核、Pleger、小巨核。若發現上述病態造血細胞，需引起足夠重視，進一步結合骨髓活檢、染色體、流式細胞學及融合基因檢測作出準確的診斷。

綜上所述，MDS患者常發生外周血及骨髓形態學病態造血，但兩者的變化關系較為復雜，難以依靠單種指標變化情況對患者進行確診，而通過外周血指標聯合骨髓形態學分析可發現特殊的病態造血現象，有助于提高MDS的診斷，減少誤診、漏診的可能。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.042

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1673-4130(2016)21-3055-03

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