不同時間及溫度保存血液對紅細胞功能的影響研究

徐勝春，范恩勇

(江蘇省揚州市中心血站 225007)

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·臨床研究·

不同時間及溫度保存血液對紅細胞功能的影響研究

徐勝春，范恩勇△

(江蘇省揚州市中心血站 225007)

目的 分析不同時間、溫度對保存血液紅細胞攜氧能力的影響。方法 10例當日采集的CPDA-1抗凝新鮮全血，在封閉條件下分離大部分血漿，制備成懸浮紅細胞，分別放入4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃冰箱保存，然后分別在24 h、7 d、14 d、21 d、28 d，分別取樣測定，計算攜氧量、氧親和力值。結果 4 ℃、10 ℃、16 ℃組24 h、7 d、14 d、21 d有效攜氧量組內、組間比較差異有統計學意義(P<0.05)；24 h、7 d的4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃組間有效攜氧量差異有統計學意義(P<0.05)；4 ℃、10 ℃、16 ℃組24 h、7 d、14 d、21 d、28 d氧親和力組內、組間比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論 存放時間、溫度對血液中紅細胞功能影響較顯著，4 ℃后溫度越高、時間越長攜氧能力越差。

紅細胞功能； 保存； 時間； 溫度

輸血是重要的治療手段，紅細胞是輸血治療中的重要組成部分[1-2]。在保存過程中，紅細胞結構性與功能性損傷而引起的輸血相關危害逐漸成為研究熱點[3-4]。紅細胞衰老變化與其貯存環境有關，庫存時間、溫度是影響紅細胞輸注存活率以及有效性的關鍵影響因素。成熟紅細胞主要包括攜氧功能、免疫功能，臨床輸血主要利用其攜氧功能保障其輸注中的正常功能，達到治療目的[5-6]。本次研究嘗試探討不同時間、溫度保存下對紅細胞攜氧能力的影響。現報道如下。

1 資料及方法

1.1 一般資料 采集血液均來自揚州市中心血站街頭采血點，采用血袋為CPDA-1保養液的新鮮全血400 mL，共10例；男、女各5袋；采集血液均符合《全血及成分血質量要求》。

1.2 方法 將全血在封閉條件下分離大部分血漿，制備成懸浮紅細胞，然后將每袋懸浮紅細胞平均分成4等份，共設A、B、C、D組，分別放入4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃冰箱保存。而后分別在24 h、7 d、14 d、21 d、28 d分別取樣測定。儀器主要包括血氧分析儀(測定氧親和力)，計算攜氧量。攜氧量計算采用直觀方法測量：將0.5 mL紅細胞配置成50 mL紅細胞懸液，在標準大氣壓、37 ℃條件下，向懸液中混入空氣，檢測溶液中氧分壓變化，待其穩定在100 mm Hg時，測定溶液中血紅蛋白氧飽和度S1；同理改變氣壓，穩定在400 mm Hg條件下，測定血紅蛋白氧壓飽和度S2；紅細胞有效攜氧量Q=20×(S1-S2)。繪制氧飽和度曲線，記錄氧親和力值。

2 結 果

2.1 時間與溫度對血液中有效攜氧量影響 4 ℃、10 ℃、16 ℃組24 h、7 d、14 d、21 d有效攜氧量組內、組間比較差異有統計學意義(P<0.05)；24 h、7 d的4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃組有效攜氧量組間差異有統計學意義(P<0.05)； 28 d，4 ℃、10 ℃組有效攜氧量組間差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2 氧親和力變化 4℃、10℃、16℃組24 h、7 d、14 d、21 d、28 d氧親和力組內、組間比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表1 有效攜氧量水平對比

表2 氧親和力水平對比±s，mm Hg)

3 討 論

血液在離體后置于不同保存條件下，紅細胞形態、生化狀況、氧化損傷都會發生不同程度改變。紅細胞存在自然衰老過程，在此過程中，細胞膜形態發生不可逆性改變[7-8]。有調查顯示[9-10]，紅細胞懸液存儲14d后開始出現光滑球型紅細胞，存儲3周后80%紅細胞變為棘型。本次研究證實，無論何種溫度條件下，血液中紅細胞攜氧量、氧親和力均低于24h前，反映紅細胞離體后存在自然衰老變化，且這種變化不會因存儲條件逆轉，故血站、醫院進行血液管理時，需加強庫存血周轉，縮短保存時間，制訂嚴格的庫存血出入庫制度。醫院在領用血液時，若病情較危重時，對輸血質量要求較高，也應盡量使用存儲時間1周以上的紅細胞懸液。

4 ℃、10 ℃、16 ℃組24h、7d、14d、21d有效攜氧量組內、組間比較差異有統計學意義(P<0.05)；24h、7d后的4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃組間有效攜氧量差異有統計學意義(P<0.05)。離體紅細胞離體時間越長，隨著自然衰老，其可出現形態、生化狀況改變與氧化損傷。相同時間下，隨時間推移，有效攜氧量、氧親和力均顯著下降。其中，形態變化不可逆，紅細胞硬度增加，變形能力下降，紅細胞囊泡化增加，釋放某些亞微粒，進一步造成形態變化，進而導致攜氧能力下降[11-12]。

4 ℃、10 ℃、16 ℃組24h、7d、14d、21d、28d氧親和力組內、組間比較差異有統計學意義(P<0.05)，說明保存溫度對紅細胞保存影響較顯著。正常溫度下，紅細胞代謝速度加快，影響其攜氧能力。4 ℃條件下，相同時間內攜氧量、氧親和力更高。研究證實，2～6 ℃保存時，紅細胞為維持自身細胞功能，會出現脂蛋白、脂質量喪失，自然衰老加快，而在(4±2)℃低溫中存儲，紅細胞為維持自身代謝需求，大量消耗葡萄糖，導致電解質平衡失調，pH值下降，發生細胞膜氧化損傷，直接影響其功能形態；氧化損傷會釋放危害因子，進一步影響紅細胞功能。而在低溫環境下，紅細胞代謝進一步下降，脂蛋白、脂質量喪失，細胞膜氧化損傷減速，有助于紅細胞功能的維持。

需要注意的是，低溫環境可降低紅細胞代謝速度，但可能加速葡萄糖消耗，ATP生成減少，可能導致電解質失衡，pH值下降，進而影響輸血安全。此外，在保存血液過程中，不可避免會出現紅細胞細胞膜氧化損傷，其隨著時間的延長而加重，也可能影響輸血安全[13-15]。目前，已有大量研究證實，紅細胞存儲損傷與輸血對象病死率、住院時間、并發癥感染率、器官衰竭有關，應合理保存血液，嚴格控制保存問題、保存時間，加強指標檢測，分析保存時間、溫度對各項功能參數指標的影響，建立量化標準，指導保存工作。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.050

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1673-4130(2016)21-3069-03

2016-03-27

2016-06-05)

△通訊作者,E-mail：fanenyong@163.com。