葡萄球菌屬中紅霉素誘導克林霉素耐藥分析

王曉妹，賈雪芝，李 巖

(新疆維吾爾自治區克拉瑪依市人民醫院檢驗科 834000)

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·個案與短篇·

葡萄球菌屬中紅霉素誘導克林霉素耐藥分析

王曉妹，賈雪芝，李 巖

(新疆維吾爾自治區克拉瑪依市人民醫院檢驗科 834000)

葡萄球菌； 紅霉素； 克林霉素； D-試驗

在醫院感染中，葡萄球菌是常見病原菌之一[1]。葡萄球菌耐藥日益嚴重，給治療帶來巨大困難，特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)逐漸增多，對β-內酰胺類抗菌藥物表現出多重耐藥[2]。因此，臨床治療中廣泛應用林克酰胺類、大環內酯類、糖肽類抗菌藥物為首選藥物。克林霉素有較強組織滲透性，常用于皮膚軟組織感染治療，也是青霉素和頭孢類過敏者的替代藥品。隨著克林霉素被臨床廣泛應用，耐藥也隨之增加。實驗室未開展D-試驗時，藥敏報出克林霉素敏感，但臨床反饋其治療無效。因此，了解本院2年來紅霉素誘導克林霉素耐藥的發生率，能為臨床指導用藥提供可靠參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014～2015年從本院臨床科室送檢的各種標本中分離出凝固酶陽性葡萄球菌199株，凝固酶陰性葡萄球菌447株。

1.2 鑒定及藥敏試驗 細菌鑒定采用法國生物梅里埃公司VITEK2 Compact全自動分析儀系統進行鑒定，鑒定卡選用GP測定，藥敏卡選用AST-GP67測定，該卡片采用2個孔位檢測紅霉素誘導素克林霉素耐藥，1個孔位為0.5 g/mL克林霉素，另1個孔位為0.25 g/mL克林霉素及0.5 g/mL紅霉素。D-試驗檢測采用美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)2009年版進行操作與判讀結果。

1.3 培養基及藥敏紙片 M-H瓊脂平板、哥倫比亞血瓊脂平板和巧克力血瓊脂平板均購于鄭州安圖生物工程有限公司；藥敏紙片紅霉素(15克/片)和克林霉素(2克/片)購于英國OXOID公司。

1.4 D-試驗檢測 將2 μg/片克林霉素紙片貼于距紅霉素(15 g/片)20 mm處，進行16～18 h的35 ℃孵育。在近紅霉素的克林霉素紙片一側，出現截平現象或抑菌圈縮小，而呈“D”形提示可誘導的克林霉素耐藥存在，D-試驗陽性。

1.5 質控菌株 金黃色葡萄球菌 ATCC25922 購于新疆維吾爾自治區臨床檢驗中心。

2 結 果

2014～2015年葡萄球菌、MRSA、MRSE對紅霉素誘導克林霉素耐藥發生率，見表1。

表1 葡萄球菌對紅霉素誘導克林霉素耐藥發生率

3 討 論

2014～2015年凝固酶陽性葡萄球菌共199株，D-試驗陽性59株，誘導耐藥率29.6%。凝固酶陰性葡萄球菌共477株，D-試驗陽性72株，誘導耐藥率17.7%。MRSA共34株，D-試驗陽性6株，誘導耐藥率17.6%。MRSE共331株，D-試驗陽性82株，誘導耐藥率24.8%。D-試驗結果顯示MRSA和MRSE的誘導克林霉素耐藥發生率差異不大，分別為17.6%和24.8%，與楊燕等[3]的報道相近，但比黎文成等[4]報道的數值低，原因可能與不同地區紅霉素耐藥基因構成差異及大環內酯類藥物使用多少有關。

大環內酯類耐藥機制主要是msrA基因編碼的泵出機制和核糖體靶位的改變，erm基因編碼的23srRNA甲基化導致對大環內酯類、林可霉素和β型鏈陽霉素耐藥(MLS型耐藥)，msrA基因編碼產生1種外排泵，從而對大環內酯類耐藥[5]。MLS型耐藥又分為結構型(CMLS)和誘導型(iMLS)2種[6]。CMLS型耐藥表型為對紅霉素和克林霉素均耐藥，藥敏試驗可測出。iMLS型耐藥表型為對紅霉素耐藥而克林霉素敏感，藥敏試驗不能測出，在未進行誘導試驗的情況下，臨床選用克林霉素治療感染，會導致治療失敗，給患者帶來更大痛苦，延長治療時間。因此，2004年美國CLSI規定，對紅霉素耐藥、克林霉素敏感的葡萄球菌應進行D-試驗以檢測紅霉素誘導克林霉素耐藥。D-試驗陰性，藥敏報告克林霉素敏感；D-試驗陽性，報告克林霉素耐藥，并向臨床提示通過誘導克林霉素耐藥試驗，克林霉素耐藥，但克林霉素對某些患者可能有效[7]。

克林霉素抗菌普廣，抗菌活性強，組織滲透性強且易吸收，血藥水平穩定，對常見鏈球菌、葡萄球菌、厭氧菌、衣原體、支原體等致病微生物都有抗菌活性，并可與阿米卡星、喹諾酮類抗菌藥物聯合應用，不良反應小，廣泛用于臨床。

對紅霉素誘導克林霉素耐藥分析，可準確指導臨床用藥，減少臨床盲目用藥，對控制抗菌藥物耐藥發生具有一定意義。

[1]王愛霞.抗菌藥物臨床合理應用[M].北京:人民衛生出版社,2008:229.

[2]肖永.臨床抗生素學[M].重慶:重慶衛生出版社,2004:60-63.

[3]楊燕,孫長貴,曾賢銘,等.耐紅霉素葡萄球菌對克林霉素誘導型耐藥的檢測[J].國際檢驗醫學雜志,2007,28(3):206-208.

[4]黎文成,李勰璘,付玉梅,等.D-試驗在葡萄球菌對克林霉素誘導型耐藥的檢測[J].廣州醫學院學報,2008,36(1):41-42.

[5]倪語星,尚紅.臨床微生物學檢驗[M].北京:人民衛生出版社,2012:60.

[6]王明貴.細菌對大環內酯類抗生素耐藥機制的研究進展[J].國外醫藥:抗生素分冊,2000,21(1):13-15.

[7]趙江花,楊健英,趙文申,等.259例金黃色葡萄球菌對紅霉素、克林霉素的誘導耐藥性研究[J].中國實用醫藥,2008,3(27):37-38.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.062

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1673-4130(2016)21-3091-02

2016-04-15

2016-06-24)