過敏性鼻炎患兒淋巴細胞亞群、血清IgE水平的變化及其相關性

徐文中 劉春艷

(寧波市眼科醫院檢驗科，寧波315040)

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過敏性鼻炎患兒淋巴細胞亞群、血清IgE水平的變化及其相關性

徐文中 劉春艷①

(寧波市眼科醫院檢驗科，寧波315040)

目的：探討過敏性鼻炎患兒外周血淋巴細胞亞群水平、血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5濃度水平及血清中IgE水平的變化，并分析其相關性。方法：選取過敏性鼻炎的患兒86例，同期體檢的健康兒童76 例作為對照組，采用流式細胞技術檢測其CD3+、CD4+、CD8+CD19+、CD4+CD25+、 CD16+56+淋巴細胞亞群的表達情況，采用雙抗體夾心(ELISA )法檢測者血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5濃度水平，采用免疫比濁法檢測血清中IgE水平。結果：過敏性鼻炎患兒CD19+、CD4+/CD8+、 血清IL-4 、IL-5和IgE水平較正常對照組增高,差異有統計學意義(P<0.05)，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+、CD16+56+、IFN-γ較正常對照組降低(P<0.05)，過敏性鼻炎患兒CD19+B淋巴細胞和血清IgE 水平之間具有相關性。 結論：淋巴細胞的功能異常、Th1/Th2 比例失衡可能與過敏性鼻炎發病機制有關，血清IgE 、IFN-γ、IL-4 和IL-5在過敏性鼻炎患兒中起著重要作用。

淋巴細胞亞群；IL-4；IL-5；干擾素-γ；IgE；過敏性鼻炎；流式細胞技術

過敏性鼻炎是一種常見的變態反應性疾病，主要臨床表現為反復發作性噴嚏、水樣鼻涕和鼻塞等，近年來在兒童發病率呈上升趨勢[1]，其病因比較復雜，T 、B 淋巴細胞功能紊亂，尤其以Th2占優勢的免疫應答在該病的發生、發展過程中具有重要作用。本研究通過檢測過敏性鼻炎患兒與健康兒童外周血中淋巴細胞亞群水平及血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5，IgE水平的變化，探討其在過敏性鼻炎發病中的作用。

1 資料與方法

1.1 材料

1.1.1 一般資料 選取2012年12月～2015年7月住院及門診過敏鼻炎性發作患兒86例和健康體檢的兒童76例，年齡在1～12歲，平均在6歲，同時進行淋巴細胞亞群、IFN-γ、IL-4 、IL-5和血清IgE水平檢測。

1.1.2 主要試劑和設備 血清過敏原特異性IgE測定試劑和儀器分別采用BECKMAN COOLTER 的總免疫球蛋白試劑盒和IMMAGE800特定蛋白儀；淋巴細胞亞群水平測定的試劑盒為BD MultiTEST IMK kit，IFN-γ、IL-4 、IL-5測定的試劑盒和流式細胞儀(FACScalibur)均來自美國BD公司。

1.2 方法

1.2.1 T淋巴細胞亞群的檢測 所有檢測者均用EDTA-K2抗凝管空腹靜脈抽血1.8 ml，經相應的熒光標記單克隆抗體染色，避光室溫孵育20 min，用FACSLysing solution溶血處理，流式細胞儀測定CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD4+CD25+、CD16+56+淋巴細胞亞群水平。

1.2.2 血清IFN-γ、IL-4 、IL-5及IgE水平檢測 所有檢測者于清晨用分離膠管采集2 ml靜脈血，分離血清后，常規分離血清,置-80℃冰箱待測。

2 結果

2.1T淋巴細胞亞群和IgE水平測定結果 :過敏性鼻炎患兒CD19+、CD4+/CD8+和血清IgE水平較正常對照組增高,差異有統計學意義(P<0.05)，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+、CD16+56+較正常對照組降低(P<0.05)見表1。

2.2 血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5和IgE水平 過敏性鼻炎患兒血清IL-4 、IL-5和血清IgE水平較正常對照組增高,差異有統計學意義(P<0.05)，IFN-γ較正常對照組降低(P<0.05)，見表2。

2.3 過敏性鼻炎患兒外周血中CD19+淋巴細胞和血清IgE水平的相關性 我們對86例過敏性鼻炎患兒外周血中CD19+淋巴細胞及 血清IgE水平之間的相關性進行了相關性分析，結果兩者存在著顯著的相關性(r=0.746,P<0.05)。

3 討論

過敏性鼻炎是機體接觸變應原后主要由IgE介導的鼻黏膜非感染性炎性疾病[2]，屬于速發型(Ⅰ型)變態反應，其病理可能是機體受到變應原刺激后多種免疫活性細胞參與的疾病過程。淋巴細胞是其中重要的一種細胞，有研究表明T淋巴細胞不僅參與細胞免疫，而且也作為調節細胞參與調節多種免疫反應[3]。研究中 ，過敏性鼻炎患兒CD3+、CD4+、CD8+水平較正常對照組明顯降低(P<0.05)，CD3+代表T淋巴細胞水平，我們推測其降低表明過敏性鼻炎患兒T細胞免疫功能降低；CD4+是具有輔助性T細胞亞群，它可以刺激B細胞產生抗體，可以分為Th1和Th2 兩種類型,它們通過所分泌的細胞因子相互調節,正常情況下,二者處于相對平衡狀態以維持機體免疫功能的平衡，當機體受到異常抗原刺激時,上述平衡被打破,可引起異常的免疫應答。Th1主要參與細胞免疫,是遲發型(Ⅵ)型變態反應中的重要效應細胞，其分泌的IFN-γ是其特征因子。Th2 細胞主要刺激B細胞產生抗體,參與體液免疫,引起速發型(Ⅰ型)變態反應,維持著機體細胞免疫和體液免疫正常的功能，其主要分泌IL-4 、IL-5等細胞因子。本研究結果顯示,過敏性鼻炎患兒CD4+T細胞降低，其中Th1 類細胞因子也IFN-γ降低,而Th2 類細胞因子IL-4、IL-5升高,我們分析過敏性鼻炎患兒盡管Th細胞減少，但免疫狀態異常，Th2 類細胞優勢表達，Th1/Th2 比例失衡在其炎性反應中起著重要作用，與Baars報道一致[4]。CD8+代表細胞毒性T細胞和抑制性T細胞，可以抑制T淋巴細胞活性和抑制B淋巴細胞產生抗體[5]，在過敏性鼻炎患兒中降低，說明其對B細胞抑制作用減弱，使B細胞產生IgE抗體增高，成為過敏性鼻炎發病的重要環節；但過敏性鼻炎患兒CD4+/CD8+比值較正常對照組升高，我們推測二者的免疫平衡功能紊亂在該疾病中過程起重要作用。CD4+CD25+調節性T細胞在機體的免疫調節中發揮作用，可通過調節Th1/Th2 平衡，抑制Th2 細胞的分化而強化Th1 細胞的活性，從而抑制變應性疾病的發生[6]。

表1 T淋巴細胞亞群和IgE水平測定結果

Tab.1 Results of T lymphocyte subsets

GroupsCasesCD3+CD4+CD8+CD19+CD16+56+CD4+/CD8+CD4+CD25+Allergicrhinitisgroup8665.07±2.9236.29±3.1223.78±2.5515.20±1.719.29±0.921.55±0.234.54±0.82Controlgroup7668.60±7.7040.37±5.1228.94±2.0810.41±1.0711.71±1.191.42±0.258.10±1.10t-3.94-6.21-14.1821.74-14.363.0723.14P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

表2 血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5水平測定結果

Tab.2 Results of IFN-γ，IL-4 ，IL-5 and IgE levels

GroupsCasesIFN-γIL-4IL-5IgEAllergicrhinitisgroup8632.38±4.3670.14±4.3857.93±4.76362.47±153.97Controlgroup7644.84±3.4152.64±4.7538.90±4.0235.84±15.33t-20.3720.3927.3119.45P<0.05<0.05<0.05<0.05

本試驗中過敏性鼻炎組明顯低于對照組(P<0.05)，我們推測CD4+CD25+減少對Th2抑制作用減弱，導致Th1/Th2 失衡，可能是過敏性鼻炎發生原因之一，有報道過敏性鼻炎中CD4+CD25+調節性T 細胞存在缺陷[7]。

CD19是B淋巴細胞表面標志分子,其在過敏性鼻炎患兒中表達升高，表明B淋巴細胞活化，分化成熟為漿細胞，并分泌IgE抗體是變應性鼻炎發病的重要因素，本研究中變應性鼻炎患兒IgE升高間接表明B 淋巴細胞功能紊亂，同時過敏性鼻炎患兒CD19+和IgE水平具有正相關性。CD16+56+代表的自然殺傷細胞(NK 細胞)是機體的第一道防御屏障，在清除病毒感染中起重要作用，過敏性鼻炎中其降低，表明患兒免疫力低下，變應原刺激后應激能力減弱和其發病有關。

綜上所述，過敏性鼻炎的發病與T、B淋巴細胞和NK細胞功能紊亂、血清IgE、水平相關，其和病情進展相關性有待于擴大樣本進一步研究，治療過程中要注意調節患兒免疫功能。

[1] Zhang L，Han D，Huang D，etal.Prevalence of self-reported allergic rhinitis in eleven major cities in China[J].Int Arch Allergy Immunol，2009，149(1):47-57.

[2] 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志編委會鼻科組，中華醫學會耳鼻咽喉頭頸外科學分會鼻科學組.變應性鼻炎診斷和治療指南[J].中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2009，44(12):977-978.

[3] 宋理君.國外醫學臨床生物化學與檢驗分冊[J].1989,10(4)：1.

[4] Baars EW ,Savelkoul HF.Citrus/Cydonia comp.can restore the immunological balance in seasonal allergic rhinitis related immunological parameters in vitro[J].Mediators Inflamm,2008,20(3):496-497.

[5] Kemeny DM，Vyas B，Vukmanovic-Stejic M，etal.CD8 T Cell subsets and chronic obstructive pulmonary disease[J].Am J Respir Crit Care Med,1999,160(5 Pt 2):33-37.

[6] 李鳴婧，張曉陽.T 淋巴細胞及細胞因子與變應性鼻炎發病機制的關系[J].醫學研究雜志,2012,41(4):175-177.

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[收稿2015-06-11 修回2015-08-20]

(編輯 許四平)

Changes and correlation of lymphocyte subsets and serum levels of IgE in children with allergic rhinitis

XU Wen-Zhong,LIU Chun-Yan.Clinical Laboratory,Ningbo Eye′s Hospital,Ningbo 315040,China

Objective:To investigate the changes of lymphocyte subsets and the serum levels of IgE in the children with allergic rhinitis,and to analyze the relationship between lymphocyte subsets and IgE.Methods: CD3+，CD4+，CD8+CD19+，CD4+CD25+，CD16+56+lymphocyte subsets were measured by flow cytometry ,IFN-γ，IL-4，IL-5 of serum were detected by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)and the serum level of total IgE was detected by immuno turbidimetric assays in 86 cases of children with allergic rhinitis and 76 cases of healthy children.Results: CD19+B lymphocyte subsets，the ratio of CD4+and CD8+，IL-4 ，IL-5 and the serum levels of IgE were increased in the children with allergic rhinitis groups as compared with healthy children ,the difference has statistical significance(P<0.05);CD3+，CD4+，CD8+，CD4+CD25+，CD16+56+lymphocyte subsets and IFN-γ were lower than the control group(P<0.05);there was a correlation between B lymphocyte subsets and IgE in the children with allergic rhinitis.Conclusion: Lymphocyte dysfunction and Th1/Th2 ratio imbalance may be related to the pathogenesis of allergic rhinitis,and IgE，IFN-γ，IL-4 and IL-5 play important roles in children with allergic rhinitis.

Lymphocyte subsets;IL-4;IL-5;Interferon γ;IgE;Allergic rhinitis；Flow cytometry

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.04.022

徐文中(1982年-)，男，主管技師，主要從事臨床檢驗方面工作。

R765.21

A

1000-484X(2016)04-0550-03

①寧波市婦女兒童醫院檢驗科，寧波315012。