遼寧地區(qū)新生仔豬豬瘟隱性感染情況的血清學(xué)調(diào)查

張建勛，劉耀川，宋淑英，董素鳳，張 輝

（遼寧省重大動(dòng)物疫病應(yīng)急中心，遼寧 沈陽 110161）

遼寧地區(qū)新生仔豬豬瘟隱性感染情況的血清學(xué)調(diào)查

張建勛，劉耀川，宋淑英，董素鳳，張 輝

（遼寧省重大動(dòng)物疫病應(yīng)急中心，遼寧 沈陽 110161）

豬瘟能夠造成生豬養(yǎng)殖業(yè)巨大經(jīng)濟(jì)損失，隱性感染病豬成為豬群的潛在風(fēng)險(xiǎn)因素。本試驗(yàn)對(duì)遼寧地區(qū)15家規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)的150頭1月齡未免疫仔豬進(jìn)行豬瘟隱性感染情況血清學(xué)調(diào)查，為我省豬瘟防控、凈化提供幫助。結(jié)果顯示，我省豬瘟隱性感染率為36%，屬中等偏高水平，建議調(diào)查養(yǎng)殖場(chǎng)及時(shí)對(duì)豬群進(jìn)行凈化處理。

豬瘟；隱性感染；感染率；凈化

豬瘟為一種急性、烈性傳染病，能給生豬養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。自對(duì)豬瘟實(shí)行強(qiáng)制免疫以來，該病已得到有效控制。但在高密度的疫苗免疫壓力下[1]，豬瘟病毒出現(xiàn)了許多適應(yīng)性的變異，低致病力、低致死性的毒株不斷出現(xiàn)，導(dǎo)致遲發(fā)性、慢性、亞急性豬瘟病例不斷增多[2-4]。隱性感染，持續(xù)帶毒、散毒的病豬是豬群的潛在風(fēng)險(xiǎn)因素[5]。因此，對(duì)豬群中豬瘟的隱性感染情況進(jìn)行調(diào)查、及時(shí)清除隱性感染病豬、凈化豬群，對(duì)集約化養(yǎng)殖場(chǎng)防控豬瘟具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究在遼寧地區(qū)11個(gè)市、縣選取15家規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場(chǎng)，對(duì)150頭1月齡仔豬的豬瘟隱性感染情況進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查，為全省防控、凈化豬瘟提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 采樣養(yǎng)殖場(chǎng) 在遼寧鞍山、本溪、錦州、盤錦、阜新、營口、鐵嶺、遼陽、綏中、葫蘆島及昌圖地區(qū)，選取具有代表性的規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行采樣。地區(qū)選場(chǎng)情況見表1。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 每場(chǎng)選取不同群、1月齡、未免疫的仔豬各10頭。仔豬親代健康，無異常現(xiàn)象。選取的仔豬體重、體長(zhǎng)適中，出生后表現(xiàn)正常。

1.3 試劑與儀器 豬瘟抗原檢測(cè)ELISA試劑盒購于上海牧仁生物科技有限公司，W D-2102A全自動(dòng)酶標(biāo)儀。

表1 樣品采集地區(qū)分布情況Table1 The hog breeding farm

1.4 血液采集 使用滅菌注射器，于仔豬前腔靜脈采血10 mL，靜置，待其析出血清后，將血清分裝于滅菌離心管中，-20℃保存待用。

1.5 豬瘟抗原EELLIISSAA檢測(cè) 豬瘟抗原檢測(cè)按照試劑盒說明書進(jìn)行。試驗(yàn)步驟為：①取50 μL樣品稀釋液加入酶標(biāo)板各孔中；②取50 μL參照血清稀釋液1加入第1孔（A1）和第2孔（B1）中；③取50 μL參照血清稀釋液2加入C1和D1孔中；④取50 μL參照血清稀釋液3加入E1和F1孔中；⑤取50 μL待檢血清加入其它孔中，蓋好酶標(biāo)板，輕輕振蕩混勻，室溫（20～25℃）孵育180±5 min；⑥棄去孔內(nèi)液體，甩干，用300 μL洗液洗滌6次。最后1次洗滌后盡量將酶標(biāo)板拍干；⑦每孔加入100 μL酶標(biāo)結(jié)合物工作液，蓋好后室溫（20～25℃）靜置孵育60±5 min；⑧重復(fù)步驟⑥每孔加入100 μL底物液，室溫（20～25℃）孵育15 min；⑨每孔加入100 μL終止液；⑩混勻后測(cè)定O D450值。

1.6 結(jié)果讀取及有效性判定 在終止液反應(yīng)15 min內(nèi)測(cè)定O D450，取C1和D1孔的O D450平均值為空白值，取A1和B1孔的O D450平均值為參照血清稀釋液1的O D450，取其他樣品孔O D450與O D450空白值的差值為樣品校正值，并根據(jù)下列公式計(jì)算參照血清稀釋液3（E1和F1孔的平均值）和檢測(cè)樣品的陽性率（PP）。

數(shù)據(jù)有效性判定，必須同時(shí)滿足：①O D450空白值＜0.350；②O D450參照血清稀釋液1≥0.750；③參照血清稀釋液3（E1和F1孔的O D450平均值）的陽性率（PP）＞20%。

圖1 遼寧地區(qū)仔豬豬瘟隱性感染情況分布圖Fig.1 The distribute chart of swine fever inapparent infection on piglet in Liaoning area

2 結(jié)果與分析

此次血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，遼寧地區(qū)豬瘟隱性感染率為36%。其中，鞍山0%、本溪15%、錦州40%、盤錦40%、阜新10%、營口100%、鐵嶺30%、遼陽30%、綏中20%、葫蘆島50%、昌圖80%。具體隱性感染情況見表2。

表2 遼寧地區(qū)仔豬豬瘟隱性感染情況Table2 The inapparent infection situation of swine fever on piglet in Liaoning area

數(shù)據(jù)分析可見，此次調(diào)查遼寧地區(qū)仔豬豬瘟隱性感染率為0～100%之間，主要分布于30%～50%之間，屬于中等偏高水平。同一地區(qū)的不同規(guī)模場(chǎng)中，感染率不盡相同。如本溪2場(chǎng)的感染率分別為0%及30%，差別較大。一些地區(qū)的差別則不明顯，如綏中2場(chǎng)的感染率分別為10%及30%、葫蘆島2場(chǎng)分別為40%和60%。而如錦州地區(qū)2場(chǎng)，隱性感染率則完全相同，均為40%。具體隱性感染率分布情況見圖1。

3 討論

豬瘟是造成養(yǎng)殖業(yè)巨大經(jīng)濟(jì)損失的疾病之一。隱性感染病豬則能長(zhǎng)期帶毒、排毒，是豬瘟病毒潛在的傳染源，對(duì)豬群健康造成威脅[6]。而隱性感染的妊娠母豬則能夠?qū)@種隱性感染、長(zhǎng)期排毒的狀況起到放大的作用[7-9]。因此對(duì)豬瘟隱性感染情況進(jìn)行常規(guī)性調(diào)查，對(duì)豬瘟防控、凈化均有較實(shí)際的意義。

本試驗(yàn)對(duì)遼寧地區(qū)150頭、1月齡未免疫仔豬進(jìn)行豬瘟隱性感染情況調(diào)查，數(shù)據(jù)在反應(yīng)該豬場(chǎng)豬瘟隱性感染情況的同時(shí)，也能在一定程度上反應(yīng)妊娠母豬的隱性感染情況[10]，可作為豬瘟凈化工作的指導(dǎo)依據(jù)。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，遼寧地區(qū)豬瘟隱性感染率為36%。與國內(nèi)其他地區(qū)研究結(jié)果相比，遼寧地區(qū)感染率數(shù)中等偏高水平。如山東地區(qū)調(diào)查結(jié)果，陽性率為16.2%[11]；福建地區(qū)為70.59%[12]、陜西地區(qū)陽性率為3.13%[13]、河南地區(qū)陽性率為36.9%[14]、新疆地區(qū)陽性率為78.5%[15]。而就省內(nèi)調(diào)查結(jié)果而言，并未見明顯的流行趨勢(shì)或感染規(guī)律，各地區(qū)之間、相同地區(qū)的不同規(guī)模場(chǎng)之間，感染情況也較為獨(dú)立。而在鞍山、本溪的飼養(yǎng)場(chǎng)中，有0%隱性感染的情況，與該場(chǎng)的飼養(yǎng)、免疫、繁育等因素有關(guān)，可以進(jìn)行推廣、學(xué)習(xí)。建議參與調(diào)研的飼養(yǎng)場(chǎng)，及時(shí)對(duì)隱性感染的豬進(jìn)行凈化，確保豬群潔凈度，防止豬瘟病毒進(jìn)一步擴(kuò)散。

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Serological investigation on inapparent infection of swine fever on newly born piglet in Liaoning province

Zhang Jianxun,Liu Yaochuan,Song Shuying,Dong Sufeng,Zhang Hui
(Emergency center for significant animal epidemic disease of Liaoning province, Liaoning Shenyang 110161)

Swine fever causes a enormous economic losses in hog breeding industry, and the inapparentinfection pigs are the potential risk factors. In this study, 150 1 month old piglets werechosen to detect the inapparent infection situation in Liaoning area, to provide theory help forswine fever prevention and purification. The results showed that the inapparent infection ratewas 36%, suggesting the breeding farms invested eliminate the pig group as soon as possible.

Swine fever; Inapparent infection; Infection rate; Purification

S858.28

B

1672-9692(2016)03-0035-04

2016-02-02

張建勛（1973-），男，博士，畜牧師，主要從事重大動(dòng)物疫病防控工作。