易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設備清潔驗證中的應用

饒小平，劉建清，周承芳，柯志鴻，陳錦珊（解放軍第175醫院/廈門大學附屬東南醫院制劑科，福建漳州363000）

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易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設備清潔驗證中的應用

饒小平＊，劉建清，周承芳，柯志鴻，陳錦珊#（解放軍第175醫院/廈門大學附屬東南醫院制劑科，福建漳州363000）

目的：探討易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設備清潔驗證中應用的可行性。方法：建立淋洗水法清潔葡萄糖注射液生產設備的清潔規程，采用0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液檢測清潔驗證樣品中的易氧化物，并與總有機碳測定結果進行比對。結果：葡萄糖殘留最低限度標準為10 mg/L；易氧化物檢測法檢測限為3 mg/L，在質量濃度5～30 mg/L范圍內線性關系良好（r＝0.999 5）；0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液消耗量不得大于0.35 ml，總有機碳最低限度標準為4 mg/L。批量生產后4次驗證結果表明，各取樣點最終淋洗水高錳酸鉀滴定液消耗量均符合規定，總有機碳測定結果亦符合要求。結論：易氧化物檢測法操作簡便、成本低，可用于葡萄糖注射液設備的清潔驗證，也可為其他含碳有機化合物生產設備的清潔驗證提供參考。

易氧化物；清潔驗證；葡萄糖注射液；淋洗水法

葡萄糖注射液是一種常用的靜脈注射液，在對其進行生產時，需要優化生產工藝流程。為防止殘留物對下一批產品產生交叉污染，必須建立穩定有效的設備清潔方法，并對方法進行驗證。文獻[1-6]多以總有機碳（TOC）作為清洗殘留物指標，但測定時采用的TOC分析儀設備昂貴、測定范圍窄，不具有廣泛適用性。本試驗依據2015年版《中國藥典》（二部）[7]純化水易氧化物定性測定方法與2010年版《藥品生產質量管理規范》殘留物濃度限度規定[8]，采用定性方法檢測葡萄糖注射液生產設備的殘留物限度是否符合要求，并進行清潔驗證，以探討易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設備清潔驗證中應用的可行性。

1 材料

1.1 儀器

DK-98-Ⅱ電子調溫萬用電爐（天津市泰斯特儀器有限公司）；HTY-DI1000型TOC分析儀（杭州泰林生物技術設備有限公司）。

1.2 藥品與試劑

5%葡萄糖注射液（批號：20150727、20150728、20150821）、10%葡萄糖注射液（批號：201507163）、葡萄糖均為河北圣雪大成制藥有限責任公司產品；0.02 mol/L高錳酸鉀溶液（分析純）、注射用水（解放軍第175醫院/廈門大學附屬東南醫院制劑科自制）；0.1 mol/L稀硫酸（解放軍第175醫院/廈門大學附屬東南醫院制劑科自制，分析純）。

2 方法與結果

2.1 殘留物限度的確定

發達國家與國內的藥品生產企業一般將殘留物濃度限度定為10 mg/L[8-10]，即上一批產品殘留在設備中的物質全部溶解到下一批產品中的濃度不得高于10 mg/L。葡萄糖注射液不屬于高活性、高敏感性藥品，該限度是足夠安全的。因此，本試驗建立檢測標準：最終淋洗水樣品中殘留物的濃度L葡萄糖≤10 mg/L。最終淋洗水中TOC殘留限度LTOC≤L葡萄糖×ηC（ηC為殘留物成分中TOC百分比）[11]，即LTOC≤4 mg/L。

2.2 線性關系

參考2015年版《中國藥典》（二部）[7]，純化水易氧化物定性測定方法為：取100 ml樣品溶液，加0.1 mol/L稀硫酸10 ml，煮沸后，加0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液適量，再煮沸10 min，粉紅色不得完全消失。

取注射用水空白液，按上述方法平行測定3次，0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液用量平均值為0.03 ml。精密稱取葡萄糖50 mg，置于1 000 ml量瓶中，加入經冷卻至室溫的注射用水溶解并定容至刻度，作為貯備液。量取上述貯備液60、40、20、16、10 ml分別置于100 ml量瓶中，加入經冷卻至室溫的注射用水定容至刻度。緩慢滴加0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液至粉紅色不褪色，并記錄其用量。以葡萄糖溶液質量濃度（x，mg/L）為橫坐標、樣品溶液與水空白液消耗高錳酸鉀滴定液體積之差（y，ml）為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程為y＝0.054 4x－0.214 2（r＝0.999 5），表明葡萄糖溶液質量濃度在5～30 mg/L范圍內與高錳酸鉀滴定液用量呈良好的線性關系。

2.3 重復性試驗

取限度濃度（10 mg/L）樣品溶液各6份，照上述法測定。結果高錳酸鉀滴定液用量平均值為0.35 ml，RSD為1.02%（n＝6），表明此法重復性良好。

2.4 檢測標準制訂

由“2.3”項下探討不同濃度葡萄糖溶液與高錳酸鉀滴定液用量的相關性可制訂標準，與含量為10 mg/L葡萄糖溶液相比，配制系統及輸液灌裝管道最終淋洗水殘留物（以易氧化物計算）：粉紅色未完全消失時，0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液消耗量小于0.35 ml。

2.5 檢測限的確定

通過不同質量濃度樣品的測定，找出能檢測出的最低質量濃度，即為其檢測限。配制含葡萄糖質量濃度為100 mg/L的標準原液；取原液，分別配制含葡萄糖質量濃度為1、2、3、4 mg/L的供試液，另配制不含葡萄糖的空白溶液。結果，易氧化物檢測法檢測葡萄糖的檢測限為3 mg/L。

2.6 取樣方式及取樣部位的確定

文獻[11]報道輸液產品設備清潔驗證的取樣過程，多以淋洗水法與擦拭法相結合。我院現有輸液生產設備系全密閉系統，日常無法拆卸，只能用沖洗法進行清潔[12]。所以，本實驗以濃配罐與稀配罐取樣口、灌裝口的最終淋洗水為檢測樣品。

2.7 清潔最終淋洗水檢測

生產結束后，按照設備清潔規程清洗3遍，于第2、3遍清洗結束后，取最終淋洗水進行測定。記錄當粉紅色不褪色時高錳酸鉀滴定液的用量，并取第3遍樣品測定TOC值，測定結果見表1（表1中取樣點，1代表濃配罐最終淋洗水；2代表稀配罐最終淋洗水；3代表灌封機注嘴最終淋洗水）。

表1 最終淋洗水的檢測結果Tab 1 The test results of final rinse water

由表1可知，按照設備清潔規程清洗3遍后，0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液的消耗量均遠小于0.35 ml，TOC測定值亦小于4 mg/L，即殘留物含量遠小于規定上限10 mg/L。

3 討論

3.1 關于藥品生產設備清潔驗證

2010年版《藥品生產質量管理規范》規定：“清潔方法應當經過驗證，證實其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗證應當綜合考慮設備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應的取樣回收率、殘留物的性質和限度、殘留物檢驗方法的靈敏度等因素”[8]。藥物生產清潔驗證常用的手段有前瞻性驗證、同步驗證、回顧性驗證和再驗證[13]，本實驗結合工作實際采用同步驗證的方式。

3.2 關于淋洗水法在線清潔規程

筆者建立了淋洗水法在線清潔規程，即采用噴淋球先沖洗罐體，然后預放一定量注射用水沖洗濾器與灌裝前端管道，初洗液直接從灌裝口排放，再進行回流沖洗回流管道。在回流清洗過程中，清洗水主要從灌裝口排放，并重復清洗3次。該方法可確保回流至配制罐中的藥液殘留控制在最小量，與之前用注射用水直接回流循環一定時間再排放的清洗方法（重復操作5次）相比，清洗效果明顯提高，既縮短了清潔時間，提高了工作效率，也節省了用水，使成本降低。需要特別注意的是，首先應將清潔規程納入文件管理體系，使其標準化；其次，應對清潔操作人員進行相關的培訓與考核，防止人為因素導致的差錯[14]；最后，應定期進行再驗證，證明清潔狀態受控。

3.3 關于易氧化物檢測法

通過驗證，易氧化物檢測法，即采用0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液檢測清潔驗證樣品中的易氧化物限度的方法成本低，操作簡便、快速。與TOC測定結果比對，該方法可行，結果穩定可靠，可用于葡萄糖注射液生產設備的清潔驗證。由于該檢測方法是利用高錳酸鉀的強氧化性與樣品中的有機碳發生氧化還原反應，故該方法也可為其他含碳有機化合物生產設備的清潔驗證提供參考。

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（編輯：余慶華）

Application of Easy Oxide Detection Method in Equipment Cleaning Validation for Glucose Injection

RAO Xiaoping，LIU Jianqing，ZHOU Chengfang，KE Zhihong，CHEN Jinshan（Dept.of Preparation，No.175 Hospital of PLA/The Affiliated Southeast Hospital of Xiamen University，Fujian Zhangzhou 363000，China）

OBJECTIVE：To investigate the feasibility of easy oxide detection method in equipment cleaning validation of Glucose injection.METHODS：The cleaning procedure of equipment for Glucose injection by rinse water method was established；potassium permanganate titration solution（0.02 mol/L）was used to detect easy oxide，and the results were compared with those of total organic carbon.RESULTS：The limits of residual glucose were 10 mg/L；the detection limit of easy oxide was 3 mg/L.The linear range were 5-30 mg/L（r＝0.999 5）.The consumption amount of potassium permanganate titration solution（0.02 mol/L）would not be greater than 0.35 ml，and the limits of residual total organic carbon were 4 mg/L.The results of 4 times of validation tests showed that the amount of potassium permanganate in rinse water of sample sites were in line with the requirements，and the determination result of total organic carbon was concordant with the standard.CONCLUSIONS：The method of easy oxides determination is easy in operation，low in cost，and can be used for equipment cleaning validation of Glucose injection and provide reference for equipment cleaning validation of other organic compounds containing carbon.

Easy oxide；Cleaning validation；Glucose injection；Rinse water method

R917

A

1001-0408（2016）31-4463-02

2016-01-29

2016-03-08）

＊藥師。研究方向：醫院制劑。電話：0596-2975797。E-mail：393881436@qq.com

#通信作者：副主任藥師。研究方向：醫院藥學。電話：0596-2975701。E-mail：cjs1223@sohu.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.31.41