透骨消痛膠囊抑制脂多糖誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究

邵翔 陳后煌 陳達(dá) 馬玉環(huán) 鄭文偉 葉蕻芝 李西海

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·實驗研究·

透骨消痛膠囊抑制脂多糖誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究

邵翔 陳后煌 陳達(dá) 馬玉環(huán) 鄭文偉 葉蕻芝 李西海

目的 探討透骨消痛膠囊抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)作用機(jī)制。方法 對4周齡雄性SD大鼠采用機(jī)械-Ⅱ型膠原酶消化法獲取膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng)，將軟骨細(xì)胞分為空白組、模型組以及透骨消痛膠囊組，空白組加入含10%胎牛血清(FBS)的低糖型Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM/LOW)2 mL，模型組加入含10 ng/mL LPS、10%FBS的DMEM/LOW培養(yǎng)基 2 mL，透骨消痛膠囊組加入含10 ng/mL LPS、透骨消痛膠囊(300 μg/mL)、10%FBS的DMEM/LOW培養(yǎng)基 2 mL。干預(yù)8 h后，實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)檢測各組微小RNA(miRNA)-140表達(dá)變化，免疫熒光觀察各組帶有血小板凝血酶敏感蛋白樣模體的解整鏈蛋白金屬蛋白酶(ADAMTS)4、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-3表達(dá)變化，Image J分析各組平均光密度。結(jié)果 與空白組相比，模型組MMP-3表達(dá)升高(P<0.05)、ADAMTS4表達(dá)明顯升高(P<0.01)；與模型組相比，透骨消痛膠囊組MMP-3表達(dá)下降(P<0.05)、ADAMTS4表達(dá)明顯下降(P<0.01)。與空白組相比，模型組軟骨細(xì)胞miRNA-140表達(dá)明顯降低(P<0.05)；與模型組相比，透骨消痛膠囊組軟骨細(xì)胞miRNA表達(dá)明顯升高(P<0.05)。結(jié)論 透骨消痛膠囊能促進(jìn)miRNA-140表達(dá)，降低ADAMTS4、MMP-3分泌，抑制炎癥反應(yīng)介導(dǎo)的軟骨基質(zhì)降解，從而延緩骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變。

軟骨細(xì)胞；微小RNA-140；骨關(guān)節(jié)炎；基質(zhì)金屬蛋白酶-3；炎癥反應(yīng)

Academy of Integrative Medicine, Fujian University of Traditional Chinese Medicine1, Fuzhou 350122, China; College of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine2, Fuzhou 350122, China; Fujian Key Laboratory of Integrative Medicine on Geriatrics, Fujian University of Traditional Chinese Medicine3, Fuzhou 350122, China

骨關(guān)節(jié)炎(OA)是一種以軟骨退變、軟骨下骨重建異常、骨質(zhì)增生為主要特征的慢性進(jìn)行性關(guān)節(jié)疾病[1]，好發(fā)于老年且發(fā)病年齡呈低齡化趨勢[2]，隨著病程的進(jìn)展，患者可出現(xiàn)功能障礙。炎癥反應(yīng)在OA病程進(jìn)展中起著至關(guān)重要的作用，炎性因子高表達(dá)可直接導(dǎo)致軟骨代謝穩(wěn)態(tài)失衡，發(fā)生軟骨基質(zhì)降解、關(guān)節(jié)軟骨退變。微小RNA(miRNA)-140特異性表達(dá)于軟骨組織中，在OA軟骨中表達(dá)明顯降低[3]。OA屬中醫(yī)“痹癥”、“痿證”范疇，其核心病機(jī)為本痿標(biāo)痹，肝腎虧虛、筋骨失養(yǎng)則筋脈拘攣、關(guān)節(jié)不利，治療時應(yīng)以補(bǔ)腎柔肝為主，輔以活血祛風(fēng)。……