急、慢性咽炎動物實驗研究概況△

薛淑媛　朱　丹　姚興鳳　賈　琦　王冬睿　李春燕

（內蒙古醫科大學藥學院呼和浩特010110）

急、慢性咽炎動物實驗研究概況△

薛淑媛朱丹姚興鳳賈琦王冬睿李春燕*

（內蒙古醫科大學藥學院呼和浩特010110）

動物模型是藥物療效評價的良好實驗載體，動物實驗研究可為臨床合理治療提供依據，因此，建立一個適宜的實驗性急、慢性咽炎動物模型是十分重要的。本文對近年來實驗性急、慢性咽炎動物模型的研究現狀做一綜述，以期為廣大研究者探索研究藥物作用機制及各種治療方法提供理論指導。

急性咽炎 慢性咽炎 動物實驗研究 動物模型

1　引言

咽炎是一種常見的上呼吸道疾病，按照病程長短和病理改變程度分為急性與慢性咽炎，現代醫學研究表明急性咽炎是由流感病毒、副流感病毒、柯薩奇病毒、腺病毒、鼻病毒、葡萄球菌、甲型鏈球菌、肺炎雙球菌等病毒和細菌感染或高溫、粉塵、煙霧等物理或化學因素刺激而引起的咽部黏膜的急性炎癥[1～3]；慢性咽炎可能因急性咽炎多次復發或上呼吸道慢性炎癥、反流性食管炎、慢性支氣管炎等誘發，也可能由于長期受物理化學因素刺激或職業原因造成用嗓過度而引起[4～5]。急性咽炎常見的臨床表現為咽干、咽癢、咽痛、有灼熱感或異物感等局部癥狀，全身癥狀較輕；慢性咽炎臨床表現為咽部不適、咽癢、有異物感、灼燒感、干燥感、刺激感，有的還有微痛感等局部癥狀，咽部的分泌物不易咳出，全身癥狀不明顯。不論急性咽炎或慢性咽炎都給患者的正常生活帶來極大的困擾，因此，對于治療急、慢性咽炎的藥物研究十分必要。

研究藥物對急、慢性咽炎是否有效，動物實驗研究非常關鍵。復制或建立成功的急、慢性咽炎動物模型，將對研究治療咽炎及上呼吸道炎癥的藥物的療效及其作用機制，提供科學依據和有價值的參考。本文將急、慢性咽炎動物模型的建立方法綜述如下，以期為研究、復制或建立急、慢性咽炎動物模型提供參考。

2　急性咽炎動物模型研究概況

2.1氨水直接噴霧法：采用氨水直接噴霧于大鼠咽部的方法復制急性咽炎的動物模型，主要是利用化學物質刺激咽部黏膜，形成炎癥。具體方法有劉雪艷等[6]采用15％的氨水溶液，給大鼠咽部進行噴霧，3撳/次，連噴3d，以制備大鼠急性咽炎模型；劉巖等[7]采用15％的氨水溶液，給大鼠咽部進行噴霧，2撳/次，相當于6μL氨水溶液，連噴3d，以制備大鼠急性咽炎模型；章晨峰等[8]采用25％的氨水溶液，2次/d在大鼠咽部噴霧，散布面積為150mm2，連噴3d，制備大鼠急性咽炎模型。

采用氨水直接噴霧的方法造模開始后，大鼠出現黏液分泌逐漸增多、咽部黏膜充血、腫脹呈鮮紅色等現象；咽部組織炎性變化明顯，黏膜下彌漫性炎癥細胞浸潤、局部潰瘍、鱗狀上皮明顯增生；使用酶聯免疫法測定模型組大鼠血清中相關細胞因子的水平，結果均明顯高于正常大鼠[6～8]。由此可見，采用氨水直接噴霧的方法復制急性咽炎模型，模型局部與臨床急性咽炎有一定的相似性，但該法對動物傷害比較大，容易出現口腔黏膜灼傷或肺部損傷等現象。

2.2氨水定點定量涂抹法：氨水定點定量涂抹的方法也是利用化學物質刺激咽部黏膜，以形成炎癥。田華潔等[9]采用戊巴比妥鈉將家兔麻醉，用擴鼻器將家兔口腔擴開，用微量進樣器對兔咽后壁上方約1cm處，滴入6％的氨水溶液50μL，1次/d，連滴2d，制備家兔急性咽炎模型。造模后，家兔出現黏液性分泌物增多，咽部組織呈暗紅色，無光澤，呈現急性充血腫脹狀態，血常規檢查顯示中性粒細胞和嗜酸性粒細胞水平明顯升高，以上改變提示造模成功。該方法建立的家兔急性咽炎模型與臨床急性咽炎相似，與氨水直接噴霧法相比，對動物的損傷較小。

2.3細菌注射感染法：細菌注射感染的方法是利用病毒或細菌感染咽部黏膜組織，形成炎癥。具體操作有賈恩禮等[10]用戊巴比妥鈉將家兔麻醉，然后用鑷子翻開上頜口頰，用帶金黃色葡萄球菌的注射針頭以接近水平方向點刺黏膜，使出血點感染細菌，24h后即可見受感染黏膜呈現明顯的紅腫或有點狀的膿性分泌物，若一次不成功可進行二次感染，以此方法制備家兔急性咽炎模型。梁璐等[11]用帶乙型溶血性鏈球菌的注射針頭，給大鼠上頜口頰部分的口腔黏膜以接近與口腔黏膜水平方向，注入約為0.02mL細菌溶液，24h后重復感染一次，以制備大鼠急性咽炎模型。章晨峰等[8]用水合氯醛麻醉大鼠，然后翻開大鼠上頜口頰部分的口腔黏膜，用帶金黃色葡萄球菌的注射針頭，以接近水平方向，注入約為0.1mL細菌溶液，24h后重復感染一次，以制備大鼠急性咽炎模型。

通過細菌注射感染的方法制備急性咽炎模型，實驗動物咽部出現紅腫、受感染黏膜有點狀的膿性分泌物，或出現黏膜上皮角化嚴重，釘突明顯，腺體細胞肥大增生，黏膜的固有層、黏膜下層、肌層的間質可見明顯的炎細胞浸潤，但皮下出血和血管擴張較不明顯的現象，血清中一氧化氮和髓過氧化物酶的水平較空白組明顯升高，IL-1β、IL-6β、TNF-α等水平較空白組明顯升高。該方法建立的急性咽炎模型，致病因素與臨床急性咽炎相同，表征也與臨床相近，說明該方法建立的急性咽炎模型成功。

3　慢性咽炎動物模型研究概況

3.1氨水直接噴霧法：該方法主要是利用低濃度的氨水溶液長時間刺激咽部黏膜，形成慢性炎癥。具體操作有南淑玲等[12]采用2.5％的氨水溶液噴大鼠咽部，2次/d，3撳/次，連噴15d，制備大鼠慢性咽炎模型；王藝等[13]采用5％的氨水溶液噴大鼠咽部，噴霧3次/d，2撳/次，連噴21d，制備大鼠慢性咽炎模型；李雪梅等[14]采用4％的氨水溶液噴家兔咽部，噴霧2次/d，3撳/次，連噴14d，制備家兔慢性咽炎模型；李凱等[15]采用2.5％的氨水溶液給大鼠咽部噴霧，1次/d，3撳/次，連噴15d，制備大鼠慢性咽炎模型。

通過氨水直接噴霧的方法建立慢性咽炎動物模型，大鼠出現咽部黏膜組織和纖維組織明顯增生，血管擴張、炎性細胞浸潤等現象；家兔出現體重下降、頻飲水、分泌物增多、納食和自發活動減少，咽部充血、黏膜及其組織有不同程度出血、水腫，炎細胞浸潤明顯，并有嚴重淤血、局部成膿腫等現象，TNF-α等細胞因子水平顯著升高，由此可見，采用氨水直接噴霧的方法可以復制慢性咽炎動物模型。

3.2氨水+松節油復合因素法：采用氨水+松節油法復制慢性咽炎模型，其中氨水作為刺激性物質，通過長時間局部噴霧反復刺激咽部黏膜，其間將松節油注射于咽部黏膜下，對咽部組織產生持續性刺激，二者結合，使咽部組織逐漸形成慢性炎癥。具體方法有祁友松等[16]采用2.5％的氨水溶液，噴于兔咽部，1次/d，連噴20d，其間于d11將25％的松節油注射于兔咽部左右兩側黏膜下，每只動物按0.2mL/kg計算，制備家兔慢性咽炎模型；張丹丹等[17]采用2.5％的氨水溶液，噴于兔咽部，2次/d，連噴16d，d8將松節油注射于兔咽部黏膜下，每只動物0.5mL，制備家兔慢性咽炎模型。

采用本法復制慢性咽炎模型，模型動物的咽部黏膜炎性細胞浸潤、水腫，上皮層發生輕度增生性改變，釘突延長，固有膜內見散在彌漫性炎細胞浸潤，血管擴張明顯，黏膜下層內黏液腺分泌較多，漿內含大量分泌顆粒，以上改變說明氨水+松節油法可成功復制慢性咽炎動物模型。

3.3細菌注射感染法：梁璐[18]給每只大鼠上頜口頰部分的口腔黏膜，以接近與口腔黏膜水平方向，用注射針頭注入濃度為108cfu/mL的乙型溶血性鏈球菌溶液0.02mL，每3天重復感染一次，連續15d，以制備大鼠慢性咽炎模型。

采用本法制備慢性咽炎模型，大部分實驗動物從造模開始就出現少納食、頻飲水、精神狀態欠佳、體重增長緩慢的情況，造模結束后，大鼠咽部黏膜上皮增生明顯，存在明顯的炎細胞彌漫性浸潤現象，血管擴張和顯微組織增生現象明顯，且伴有黏液腺分布，和空白組比較存在顯著差異，說明該方法可成功復制慢性咽炎動物模型。

4　其他咽炎動物模型研究概況

4.1去勢法：戚本明等[19]將大鼠麻醉后，切除雙側卵巢，30d后大鼠咽部黏膜發生萎縮性改變，成功制備大鼠萎縮性咽炎模型。

采用本法制備萎縮性咽炎模型，實驗動物去勢后15d開始，血清中的雌二醇水平顯著降低，促黃體生成素水平顯著升高；咽部黏膜組織在去勢后30d開始發生萎縮性改變，說明該法可以成功制備萎縮性咽炎動物模型。

5　討論

建立動物模型是藥物療效評價的重要環節，適宜的動物模型不僅能反映藥物作用的效果，還能為臨床合理治療提供依據，建立成功的急、慢性咽炎動物模型對探索研究治療咽炎的藥物作用機制及各種治療方法，具有重要意義。

采用致病菌致炎的動物咽炎模型，與人類發病機制較為相近，但是由于感染致病菌的動物具有一定的傳染性，實驗操作者會有被感染風險，對實驗安全性要求較高，使該方法使用受限。

氨水直接噴霧法、氨水定點定量涂抹法、氨水+松節油法等以化學物質刺激致炎的動物咽炎模型，模型動物病理損傷和血清細胞因子指標變化與臨床指標有一定的相似性，且操作方法簡單、安全，雖然可能由于操作不當造成實驗動物的黏膜損傷、肺灼傷等情況，但仍然是目前使用最廣泛的模型建立方法。

去勢法制備的動物咽炎模型，主要是使動物體內激素水平下降引起萎縮性咽炎，該模型對于研究治療更年期女性因激素水平降低引發的咽部不適具有一定的幫助作用。

綜上所述，廣大研究者可以根據實驗目的和條件選擇適當的模型建立方法。

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△基金支持：2016內蒙古自治區創新創業訓練計劃項目（201610132001）；2016內蒙古醫科大學英才培育項目；2016內蒙古醫科大學實驗室開放基金項目（2016ZN05）。

R766.14

A

1672-8351（2016）10-0121-02