肺鱗癌中磷脂酶Cε和核因子-κB p65的表達及意義

呂紅瓊 謝 玲 倪明立

(鄭州大學附屬洛陽中心醫院腫瘤二科，河南 洛陽 471000)

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肺鱗癌中磷脂酶Cε和核因子-κB p65的表達及意義

呂紅瓊 謝 玲 倪明立

(鄭州大學附屬洛陽中心醫院腫瘤二科，河南 洛陽 471000)

目的 應用免疫組化方法檢測肺鱗癌術后組織中磷脂酶Cε1(PLCE1)、核因子(NF)-κB p65的表達，探討其臨床價值。方法 63例行肺鱗癌根治手術患者的臨床資料及術后蠟塊組織作為研究組，無腫瘤的支氣管斷端22例作為對照組。應用免疫組化方法檢測兩組中PLCE1和NF-κB p65的表達。結果 研究組PLCE1和NF-κB p65表達的陽性率明顯高于對照組。研究組PLCE1和NF-κB p65的表達均與分化程度、腫瘤最大徑和增殖細胞核抗原(PCNA)標記的增殖指數密切相關。研究組NF-κB p65的表達與淋巴結轉移明顯相關性，而PLCE1與淋巴結轉移無明顯相關性。相關分析顯示研究組PLCE1和NF-κB p65的表達無相關性。結論 肺鱗癌術后組織中PLCE1和NF-κB p65高表達，二者對腫瘤的形成和進展可能具有一定作用。PLCE1和NF-κB p65之間無明顯協同作用。

肺鱗癌；磷脂酶Cε(PLCE)1；核因子(NF)-κB p65；免疫組化

肺鱗癌病變的形成與多種蛋白表達失調有關。磷脂酶Cε1(PLCE1)是PLC基因編碼的一種正向同源蛋白，是磷脂酰肌醇信號通路中的關鍵酶〔1,2〕；近年研究發現其在腫瘤中異常表達，可能對腫瘤的多種功能有一定的調節作用〔3,4〕。核因子(NF)-κB p65的異常表達對促進腫瘤進展有一定作用〔5,6〕。本研究觀察肺鱗癌中PLCE1和NF-κB p65的表達，分析其臨床價值及相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2015年12月我院行肺鱗癌根治手術的患者作為研究組，共63例，術后留取蠟塊組織，臨床資料完整。其中男34例，女29例；年齡43～85歲，平均61.3歲。均經再次切片并經病理醫師證實。無腫瘤的支氣管斷端的22例黏膜組織作為對照組，其中男11例，女11例；年齡46～78歲，平均59.8歲。兩組常規資料無明顯差別。

1.2 免疫組化方法檢測PLCE1和NF-κB p65的表達 應用免疫組化SP法進行檢測，應用二氨基聯苯胺(DAB)顯色，操作中做好質量控制工作。

1.3 PLCE1和NF-κB p65結果判定方法 PLCE1和NF-κB p65的陽性定位在細胞質，選擇上皮細胞集中且染色密集的區域進行觀察，共選擇5個高倍視野(400倍)。陽性根據以下兩個方面：①陽性細胞數：<5%為0分；5%～25% 1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76% 4分。②染色強度：無色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩者相乘作為最終判定結果。0～4分為陰性，5～12分為陽性。

1.4 統計學方法 應用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗、線性相關分析。

2 結 果

2.1 兩組中PLCE1和NF-κB p65表達的比較 兩組中PLCE1和NF-κB p65表達的陽性率差別有統計學意義。見表1。

表1 兩組中PLCE1和NF-κB p65表達的比較〔n(%)〕

2.2 研究組中PLCE1和NF-κB p65在不同臨床特征中的比較 研究組中PLCE1和NF-κB p65的表達均與分化程度、腫瘤最大徑和增殖細胞核抗原(PCNA)標記的增殖指數密切相關。研究組中NF-κB p65的表達與淋巴結轉移密切相關，而PLCE1與淋巴結轉移無明顯相關性。見表2。

表2 研究組中PLCE1和NF-κB p65在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3 研究組中PLCE1和NF-κB p65的相關性 研究組中PLCE1和NF-κB p65的表達無明顯相關性(P>0.05)。

3 討 論

肺鱗癌是最具代表性的多發生于吸煙人群的惡性腫瘤。目前的研究對鱗癌分子病理學改變及相關調控蛋白的認識遠遠落后于腺癌〔7〕。近來研究已發現了少數具有潛在臨床指導意義基因和蛋白〔8〕。PLCE1是磷脂酶C家族的一種同工酶，具有位于C端的RAS結構域和位于N端的CDC25結構域〔9,10〕。PLCE1其激活后可能在胞膜到胞核的信號轉導過程中發揮作用，并有效調節細胞的生長、分化和增殖，同時細胞骨架也有一定的影響〔11,12〕。有研究認為PLCE1能通過催化多磷酸肌醇如磷脂酰肌醇4,5-二磷酸鹽水解，產生第二信使三磷酸肌醇和二脂酰甘油，促進鈣離子從細胞內釋放，并能引起蛋白激酶C的過度表達，實現細胞信號的轉導，調控基因的表達〔13,14〕。NF-κB最初是從B細胞核的抽提物中發現的免疫球蛋白，是Rel蛋白家族的成員，其家族共有5個成員，包括P65、RelB、C-Rel、P50/P105、P52/P100，這些蛋白質都有一個大約由300個氨基酸組成的氨基末端〔15,16〕。NF-κB p65是家族中的典型功能蛋白，也是轉錄復合體。有研究認為NF-κB p65結合位點可以接受多種免疫刺激，并通過一個或多個信號途徑激活蛋白激酶，同時激活相關級聯基因〔17〕。NF-κB p65在部分腫瘤中高表達〔5〕。 本研究提示PLCE1和NF-κB p65異常表達可以促進腫瘤的發生。肺鱗癌的發生與腺上皮的鱗化有關，鱗化主要源于多種外源性刺激，如吸煙、粉塵吸入等，腺上皮鱗化后，上皮異型增生，發生鱗癌，此過程伴有PLCE1和NF-κB p65異常表達的調節。本文結果提示PLCE1和NF-κBp65二者參與腫瘤的分化進程、腫瘤生長及細胞增殖〔18,19〕。PLCE1包含幾種Ras的結合區，此區域可以結合Ras家族的小G蛋白，成為GTP的效應器，進而有效地調節腫瘤細胞的增殖、分化、凋亡和血管再生〔20〕。分化是腫瘤內在的因素，因此二者高表達可以在一定程度上阻止細胞的成熟進程，腫瘤處于幼稚分化的某一階段，此時腫瘤細胞異型性增加，腫瘤失控性增生明顯，腫瘤處于活躍狀態中。NF-κB p65異常表達可能是轉移相關的蛋白，而PLCE1可能與轉移的關系不明顯。Cui等〔21〕認為PLCE1上調后可以促進NF-κB p65的高表達，二者是否具有協同作用可能與腫瘤的特異性有關。也有研究認為PLCE1可能與P53等基因表達的作用具有相關性〔22〕，但是PLCE1的具體調節有待更多實驗證實。

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〔2015-03-25修回〕

(編輯 苑云杰)

呂紅瓊(1978-)，女，碩士，主治醫師，主要從事惡性腫瘤研究。

R734

A

1005-9202(2016)22-5626-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.060