ER、PR和HER2免疫組化檢測在乳腺癌穿刺活檢中的應(yīng)用

潘超　夏想厚

1.浙江省腫瘤醫(yī)院病理科，浙江杭州310022；2.浙江省腫瘤醫(yī)院乳腺科，浙江杭州310022

ER、PR和HER2免疫組化檢測在乳腺癌穿刺活檢中的應(yīng)用

潘超1夏想厚2

1.浙江省腫瘤醫(yī)院病理科，浙江杭州310022；2.浙江省腫瘤醫(yī)院乳腺科，浙江杭州310022

目的研究乳腺癌手術(shù)標(biāo)本與穿刺活檢組織中人類表皮生長因子受體-2（HER2）、孕激素受體（PR）、雌激素受體（ER）免疫組化檢測的準(zhǔn)確性。方法選取2014年8月～2015年8月間在本院實施乳腺癌根治術(shù)患者30例為研究對象，比較手術(shù)中切除標(biāo)本和術(shù)前穿刺活檢HER2、ER、PR免疫組化檢測結(jié)果。結(jié)果手術(shù)前與手術(shù)中ER陽性分別為24例（80.0%）、26例（86.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中PR陽性分別為21例（70.0%）、23例（76.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中的HER2陽性分別為18例（60.0%）、20例（66.7%）。組織學(xué)一致性、HER2為83.3%，PR為90.0%，ER為93.3%。PR與ER檢測的一致性較高，HER2的一致性則相對較低。結(jié)論PR、ER穿刺活檢與術(shù)中標(biāo)本的一致性較高，HER2較低，因此，需綜合考慮各方面因素再進行手術(shù)方案確定。

孕激素受體；雌激素受體；人類表皮生長因子受體-2（HER2）；免疫組化；乳腺癌

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，目前已居于女性惡性腫瘤的第二位，每年全世界有100多萬新增乳腺癌病例，其中有40多萬死亡[1]。在絕經(jīng)期前后、40～60歲女性中發(fā)病率較高，常發(fā)病于乳腺上皮組織[2]。乳腺腫瘤一般先采用影像學(xué)方法診斷，然后以病理活檢確診，手術(shù)后對切除的組織進行切片活檢為金標(biāo)準(zhǔn)，但是術(shù)前穿刺活檢也有重要價值。乳腺粗針穿刺活檢是取得乳腺腫瘤標(biāo)本的首選方法，可以通過此標(biāo)本檢測雌孕激素及HER2的表達情況而制定出針對性的治療方案[3]。病理活檢可采用細(xì)胞學(xué)方法和免疫組織化學(xué)法（免疫組化法），但是臨床實踐表明，細(xì)胞學(xué)方法不方便進行定量和定位，借鑒性較差[4，5]。而免疫組化法通過抗原抗體反應(yīng)對組織切片或標(biāo)本中的特定化學(xué)成分進行標(biāo)記，不僅能定性，還能定位、定量[6，7]。選擇合適的腫瘤標(biāo)志物對確定乳腺癌的病情進展和病理分型十分重要[8-10]。本文主要探討穿刺活檢時人類表皮生長因子受體-2（HER2）、孕激素受體（PR）、雌激素受體（ER）免疫組化檢測的準(zhǔn)確程度，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

以2014年8月～2015年8月間在本院實施乳腺癌根治術(shù)患者30例為研究對象，術(shù)前檢測凝血時間、血常規(guī)均正常，均未實施放化療，穿刺活檢在手術(shù)前進行，均呈浸潤性癌。患者均為女性，年齡36～63歲，平均（50.1±2.7）歲；右乳14例（46.7%），左乳16例（53.3%）；病灶大小8～22 mm，平均（13.3±1.5）mm；病理分期：T1期2例（6.7%），T2期19例（63.3%），T3期9例（30.0%）。

1.2方法

1.2.1穿刺取樣[11，12]超聲檢查患側(cè)乳房，確定病變大小與部位，在體表做穿刺點標(biāo)記。仰臥位，對皮膚做常規(guī)消毒，探頭涂抹少量耦合劑，2%利多卡因在穿刺點逐層浸潤麻醉，以破皮針在皮膚上刺一小口，超聲引導(dǎo)下將活檢針尖送達目的病灶，在活檢槍發(fā)出后，將針快速拔出，在10%福爾馬林液體中放置取下的組織條芯，行組織病理檢查，完成后對活檢部位壓迫止血，包扎消毒。

1.2.2免疫組化檢測[13，14]穿刺標(biāo)本以常規(guī)辣根過氧化物酶法（HRP）檢測HER2、ER、PR（試劑盒選用上海美軒生物科技有限公司產(chǎn)品）（檢測方法選用SP法）。細(xì)胞膜是HER2表達部位，＞30%為陽性；細(xì)胞核是PR、ER陽性表達部位，＞1%的表達數(shù)量為陽性。對確診患者實施手術(shù)，切除的病灶進行石蠟切片，以滴加新鮮配制的DAB工作液100μL（以覆蓋組織為宜）染色。若DAB顯色呈黃色，則判定結(jié)果為陽性。三種標(biāo)志物以三個切片進行檢測。

1.3觀察指標(biāo)

對比穿刺前、術(shù)中數(shù)值。術(shù)中標(biāo)本檢測與穿刺免疫組化一致則同屬陰性，同為陽性時程度差異不明顯的情況下等同于一致。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析處理研究中的數(shù)據(jù)與資料，計數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1術(shù)中標(biāo)本和術(shù)前穿刺活檢的HER2、PR、ER表達情況分析

手術(shù)前與手術(shù)中ER陽性分別為24例（80.0%）、26例（86.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中PR陽性分別為21例（70.0%）、23例（76.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中的HER2陽性分別為18例（60.0%）、20例（66.7%）。見表1。

表1　手術(shù)中標(biāo)本和術(shù)前穿刺活檢的HER2、PR、ER表達情況[n（%）]

2.2手術(shù)標(biāo)本和穿刺活檢組織學(xué)一致性情況分析

分析其組織學(xué)一致性，HER2為83.3%，PR為90.0%，ER為93.3%。PR與ER檢測的一致性較高，HER2的一致性則相對較低（ER與PR一致性比較，χ2=0.00，P＞0.05；ER與HER2一致性比較，χ2=0.65，P＞0.05；HER2與PR一致性比較，χ2=0.14，P＞0.05）。見表2。

表2　手術(shù)標(biāo)本和穿刺活檢組織學(xué)一致性情況

3　討論

乳腺由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成，原位乳腺癌并不致命，但癌細(xì)胞之間連接松散，容易脫落[15]，游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉(zhuǎn)移，危及生命。組織穿刺活檢的方法是診療癌腫技術(shù)進步的結(jié)果，在臨床中的應(yīng)用較為廣泛[16]，但需要選擇合適的腫瘤標(biāo)志物。目前對于標(biāo)志物的要求主要有靈敏度、特異度高，可反映腫瘤的動態(tài)變化，有器官特異性，可為臨床選擇化療藥提供依據(jù)等。

目前免疫組化技術(shù)在乳腺癌患者中的應(yīng)用越來越成熟，被廣泛應(yīng)用在乳腺癌中的ER、PR、HER2等檢測技術(shù)，不僅作出病變性質(zhì)診斷，還對其病變性質(zhì)在臨床預(yù)后關(guān)系選擇個性化治療提供依據(jù)[17]。腫瘤標(biāo)志物的種類很多，可分為癌胚抗原、糖類、酶類、蛋白質(zhì)類、激素類、基因類等。

HER2是一種膜蛋白，30%的乳腺癌患者中存在HER2基因過表達，HER2陽性的乳腺癌患者對內(nèi)分泌治療的反應(yīng)較差，對其進行檢測可提示患者的預(yù)后情況。其表達狀況屬于乳腺癌曲妥珠單抗靶向治療的選擇依據(jù)，也是判斷乳腺癌預(yù)后的獨立指標(biāo)[18]。雌激素受體（ER）是一種蛋白質(zhì)分子，它們較多地存在于靶器官的細(xì)胞內(nèi)，可與激素發(fā)生特異性結(jié)合而形成激素-受體復(fù)合物，使激素發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。ER是個核受體，其主要配體是17-β-雌二醇，作為配體依賴性轉(zhuǎn)錄因子來調(diào)節(jié)涉及乳腺癌細(xì)胞增殖、存活、侵襲和腫瘤新生血管形成的下游基因，這種作用能夠通過封閉受體或剝奪循環(huán)配體而減弱[19]。孕激素受體（PR）作為配體激活的轉(zhuǎn)錄因子，是類固醇激素受體家族的一員。PR有兩個異構(gòu)體PR-A（94kDa）和PR-B（114kDa）。雖然它們的轉(zhuǎn)錄活性相反，但它們的DNA和配體結(jié)合親和力相似。PR-B是孕激素敏感基因的激活劑，而PR-A則抑制PR-B功能。研究發(fā)現(xiàn)HER2、PR、ER均可以作為檢測乳腺癌的重要指標(biāo)[20]，ER、PR的表達決定了治療方案的選擇。

在本次研究中，PR與ER的術(shù)前術(shù)中檢測一致性較高，HER2則較低，提示通過穿刺活檢檢測雌孕激素受體可為臨床提供較好的內(nèi)分泌治療的依據(jù)。但HER2的一致性為83.3%，而且在穿刺活檢中的陽性表達率偏低，說明在靶向治療的選擇中，穿刺活檢的HER2免疫組化結(jié)果指導(dǎo)意義有限，應(yīng)根據(jù)手術(shù)標(biāo)本的免疫組化檢測等較為成熟的方法來指導(dǎo)采用靶向治療。

綜上所述，在診治乳腺癌的過程中，術(shù)前免疫組化檢測有其使用價值，應(yīng)綜合考慮各項因素后決定手術(shù)方法的選用。

[1]藍(lán)云飛.乳腺癌穿刺活檢組織ER、PR和HER2免疫組化檢測準(zhǔn)確性的研究[J].中國醫(yī)療前沿，2013，8（17）：98-99.

[2]閆曉紅，趙新漢，劉堯，等.TOPⅡa基因擴增對蒽環(huán)類藥物在HER2陽性乳腺癌新輔助化療中的療效預(yù)測[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，23（9）：1224-1226.

[3]王海.乳腺癌穿刺活檢組織ER、PR和HER2免疫組化檢測準(zhǔn)確性的研究[J].醫(yī)學(xué)信息（上旬刊），2011，24（6）：3744-3745.

[4]陳小媚，鄒宇君，江燕.中晚期乳腺癌多支超選擇性動脈化療聯(lián)合手術(shù)治療的臨床應(yīng)用價值[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015，36（24）：3631-3632.

[5]周愛清，陳志軍，孫正魁，等.乳腺癌患者血清HER-2/ neu濃度與組織HER-2表達水平的相關(guān)性[J].實用癌癥雜志，2015，30（4）：479-481.

[6]胡祖健，徐海濱，任興昌，等.乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因、尿激酶型纖溶酶原激活劑在乳腺癌組織中的表達[J].全科醫(yī)學(xué)臨床與教育，2015，13（2）：132-134.

[7]Hoegh A，Lindholt S.Basic science review.Vascular sistensibility as a redictive ool in the management of small symptomatic bdominal aortic aneurysms[J].Vase Edovascular Surg，2009，（4）：333-338.

[8]Várady E，F(xiàn)eher E，Levai A，et al.Estimation of vesselage and early diagnose of atherosclerosis in progeria syndrome by using echo-tracking[J].Clin Hemorheol Microcirc，2010，44（4）：297-301.

[9]Geerin O，Soto ME，Brocker P，et al.Nutritional status assessment during Alzheimer's disease[J].J Netr Health Aging，2012，9（2）：81-84.

[10]Araki T，Emoto M，Teramura M，etal.Effectofadiponectin on carotid arterial stiffness in type 2 diabetic patients treated with pioglitazone and metformin[J].Metabolism，2012，55（8）：996-1001.

[11]Mor IA，Uchida N，Inomo A，et al.Stiffness of systemic arteries in appropriate and small for gestational age newborn infants[J].Pediatrics，2012，118（3）：1035-1041.

[12]Zhang Y，Li W，Yan T，et al.Early detection of lesions of dorsal artery of foot in patients with type 2 diabetes mellitus by high-frequency ultrasonography[J].J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci，2011，29（3）：387-390.

[13]Shingu Y，Shiiya N，Ooka T，et al.Augmentation index is elevated in aortic aneurysm and dissection[J].Ann Thorac Surg，2009，87（5）：1373-1377.

[14]Nicoll MR，Haskins K，F(xiàn)lores SC.Oxidant stress，immune dysregulation，and vascular function in type I diabetes[J]. Antio Xid Redo X Signal，2012，9（7）：879-889.

[15]朱文標(biāo)，鄭少秋，盧善明，等.IHC與FISH檢測118例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌HER-2的對比分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2015，12（11）：5-7.

[16]Gokce N，Vita JA，Mc Donnell M，et al.Effect of medical and surgical weight loss on endothelial vasomotor function in obese patients[J].Am J Cardiol，2011，95（2）：266-268.

[17]譚敏華，雷偉華，譚冬玲，等.浸潤性乳腺癌ER、PR、HER-2、E-cadherin、CK5/6檢測與臨床預(yù)后關(guān)系[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志，2011，27（9）：933-938.

[18]葛文凱，楊奔，左文述，等.乳腺癌穿刺活檢對HR和HER-2及Ki-67評價可靠性以及化療對其影響研究[J].中華腫瘤防治雜志，2014，21（11）：847-853.

[19]汪海新，應(yīng)明真，王梅.ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的表達及臨床意義[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2013，42（2）：27-31.

[20]Brodszki J，Lnne T，Marsál K，et al.Impaired vascular growth in late adolescence after intrauterine growth restriction[J].Circulation，2011，111（20）：2623-2628.

Application of ER,PR and HER2 immunohistochemical tests in breast cancer biopsy

PAN Chao1XIA Xianghou2
1.Department of Pathology,Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China；2.Department of Galactophore,Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China

Objective To study the accuracy of HER2,PR and ER immunohistochemical tests in the surgical sample and biopsy tissue of breast cancer.Methods A tiotal of 30 patients,treated with radical mastectomy in our hospital from August 2014 to August 2015,were selected as research subjects,and the results of HER2,ER and PR immunohistochemical test in the surgical resection samples and preoperative biopsy were compared.Results The number of positive cases of ER before the surgery and during the surgery were 24(80.0%)and 26(86.7%)respectively；the number of positive cases of PR before the surgery and during the surgery were 21(70.0%)and 23(76.7%)respectively；the num ber of positive cases of HER2 before the surgery and during the surgery were 18(60.0%)and 20(66.7%)respectively. The histological consistency rates of HER2,PR and ER were 83.3%,90.0%and 93.3%respectively.The consistency rates of PR and ER were higher,while the consistency rate of HER2 was relatively lower.Conclusion The consistency rate of PR and ER in biopsy and surgical sample is higher,while that of HER2 is lower.Hence,various factors should be put into consideration before the surgical protocol is determined.

Progesterone receptor；Estrogen receptor；HER-2；Immunohistochemistry；Breast cancer

R730.4

A

1673-9701（2016）29-0026-03

浙江省自然科學(xué)基金（LY12H16030）

（2016-07-12）