細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液的應用價值

羅政權 王寶軍 杜秀杰 逯娟 鄭宏江

(1.河北邯鄲峰峰集團總醫院病理科，河北 邯鄲 056200；2.邯鄲市第四醫院病理科，河北 邯鄲 056200)

?

細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液的應用價值

羅政權1王寶軍1杜秀杰2逯娟1鄭宏江1

(1.河北邯鄲峰峰集團總醫院病理科，河北 邯鄲 056200；2.邯鄲市第四醫院病理科，河北 邯鄲 056200)

目的 研究細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液的應用價值。方法 連續選擇68份高度懷疑惡性胸腹腔積液標本，分別進行細胞塊石蠟包埋切片和細胞脫落病理學檢查，對比診斷敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值的差異性。結果 細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的陽性率明顯低于最終結果，也明顯低于石蠟包埋，差異均有統計學意義(P<0.05)；石蠟包埋與最終結果比較，差異無統計學意義(P>0.05). 細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值明顯低于石蠟包埋。結論 細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液具有較好的應用價值。

細胞塊石蠟包埋切片； 胸腹腔積液； 細胞脫落病理學檢查

一直以來，細胞脫落病理學檢查被認為診斷胸腹腔積液性質的“金標準”[1]，然而H.Motherby[2]研究指出，其診斷惡性積液的陽性率僅為17.5%。對已知惡性積液的陽性診斷率為56%～65%，之所以出現較高假陰性原因可能與細胞學的制片技術有關[3]。常規細胞制片易受標本質量、涂片厚度、染色技術等影響[4]。細胞塊石蠟包埋切片利用組織團塊，聚集病變細胞，有效染色進行觀察，主要應用在組織病理學診斷中[5]。本研究通過比較這兩種技術在鑒別胸腹腔積液性質的價值，為臨床診斷提供新思路。

注：A、B為腺癌細胞；C、D為鱗癌細胞；A、C為石蠟包埋HE染色；B、D為細胞涂片巴氏染色。圖1 兩種檢測技術診斷惡性胸腹腔積液(400×)

1 材料與方法

1.1 材料來源 連續選擇2014年1月至2016年1月入我院行病理診斷，高度懷疑惡性胸腹腔積液標本共68份，標本無污染，采集后立即送檢。標本來源男性41例，女性27例；年齡37～76歲，平均(52.5±13.3)歲；胸腔積液35份，腹腔積液33份。

1.2 標本處理 52A 型醫用低速離心機(北京六一機械廠)，脫水機(ASP300，LEICA，德國)，包埋機(EG1160，LEICA，德國)，切片機(RM2235，LEICA，德國)，Olympus 光學顯微鏡(BX51，Olympus，日本)。

1.2.1 細胞脫落病理學檢查 預處理：標本至少100 mL、靜置15 min、棄上清、取沉淀2 500 r/min離心5 min、棄上清、取沉淀；涂片：取中間層細胞；固定：95%乙醇固定 15 min；巴氏染色：蒸餾水水洗2 min×2次、蘇木素染色5 min、流水沖洗1 min，放置鹽酸酒精中5 s、流水沖洗分色，放置飽和碳酸鋰溶液中返藍，梯度酒精脫水，放置橘黃 G6 中 10 s、95%乙醇迅速沖洗 3 次、放置EA50 中2min、95%乙醇沖洗2min×2 次，無水乙醇2 min×2 次脫水、二甲苯透明、中性樹脂封片。

1.2.2 細胞塊石蠟包埋切片 預處理同上、取沉淀震蕩與離心管分離、兩層擦鏡紙包裹放入脫水盒中，10%福爾馬林浸泡 3～4 h固定，梯度酒精脫水、酒精和二甲苯透明、浸入純石蠟2次、每次 2～3 h、溫度54～56 ℃，包埋、切片、蘇木素伊紅染色。染色步驟：脫蠟、水化、染核(蘇木精液染色 5 min、流水2～4 s，鹽酸乙醇 2～4 s、稍水洗 15～30 s、流水 11～16 min、蒸餾水 2～4 s)、染漿(0.5%伊紅液染色 1～5 min、蒸餾水快速沖洗 1～2 s)、脫水、透明、封片。

1.3 光學顯微鏡下閱片 均采用雙盲法，由兩名細胞病理學醫師同時閱片，并做出一致性診斷。依據《漿膜腔積液細胞病理學診斷》標準，診斷報告采用3 級分類法，即找到惡性細胞(鱗狀細胞癌、腺癌、小細胞未分化癌、大細胞未分化癌、腺鱗癌、癌型未定)，可疑惡性細胞和未找到惡性細胞。綜合多種檢查方法如生化、影像、臨床表現為最終確診結果。

1.4 統計學方法 采用SPSS 20.0軟件對數據進行分析處理，計數資料采用%表示，組間比較采用(校正)χ2檢驗；以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 惡性胸腹腔積液陽性率的比較 35例惡性胸腔積液中，細胞涂片診斷出陽性20例，陰性15例，陽性率為57.1%，而最終確診結果為陽性30例，陰性5例，陽性率為857.1%，石蠟包埋診斷出陽性28例，陰性7例，陽性率為80.0%，細胞涂片診斷的陽性率低于最終診斷結果，差異有統計學意義(χ2=7.000，P=0.008)，也明顯低于石蠟包埋(χ2=4.242，P=0.039)，石蠟包埋與最終確診結果比較，差異無統計學意義(χ2=0.402，P=0.526)；33例惡性腹腔積液中，細胞涂片診斷出陽性21例，陰性12例，陽性率為63.6%，而最終確診結果為陽性30例，陰性5例，陽性率為90.9%，石蠟包埋診斷出陽性28例，陰性5例，陽性率為84.8%，細胞涂片診斷的陽性率低于最終診斷結果，差異有統計學意義(χ2=6.988，P=0.008)，也明顯低于石蠟包埋(χ2=3.882，P=0.049)，石蠟包埋與最終確診結果比較，差異無統計學意義(χ2=0.142，P=0.706)。見圖1。

2.2 診斷敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值的比較 細胞涂片診斷惡性胸腔積液的敏感性為62.5%、特異性為53.8%、陽性預測值為82.6%、陰性預測值為52.9%，診斷惡性腹腔積液的敏感性為66.9%、特異性為57.2%、陽性預測值為87.4%、陰性預測值為62.3%。石蠟包埋診斷惡性胸腔積液的敏感性為86.3%、特異性為72.9%、陽性預測值為88.4%、陰性預測值為72.0%，診斷惡性腹腔積液的敏感性為89.9%、特異性為80.1%、陽性預測值為88.6%、陰性預測值為83.3%。[敏感性=真陽性人數/(真陽性人數+假陰性人數)×100%，特異性=真陰性人數/(真陰性人數+假陽性人數))×100%，陽性預測值=真陽性人數/(真陽性人數+假陽性人數)×100%，陰性預測值=真陰性人數/(真陰性人數+假陰性人數)×100%]。

3 討 論

目前臨床中用于鑒別良惡性積液的檢查方法主要有影像學如CT、PET，惡性積液 CT 常見結節狀增后的胸腹膜，增厚常達 10 mm，多為不規則，若伴器官腫塊及淋巴結腫大，多提示為惡性[6]；常規生化檢查，如顏色、透明度、比重、凝固性、蛋白的定性與定量、糖、積液中的細胞數及細胞分類、pH 測定等[7]；腫瘤標志物，如糖類蛋白為廣譜腫瘤標志物，癌胚抗原多見于肺癌、結腸癌和乳腺癌等[8]；細胞 DNA 倍體分析可測定細胞內的 DNA 含量，是一種可靠的檢測手段；細胞脫落病理學檢查等[9]。

胸、腹腔積液中細胞成分較為復雜，良性積液中常見細胞主要有間皮細胞、淋巴細胞、中性粒細胞及嗜酸性粒細胞等，惡性積液中可見腺癌細胞(89.2%)、鱗癌細胞(5.7%)或惡性淋巴瘤細胞(3.1%)，偶見未分化癌和惡性間皮瘤[10]。細胞脫落病理學檢查優點是省時、費用低、方法簡單，但影響因素多、可控性差、診斷陽性率低，使之不能成為鑒別惡性積液的唯一手段[11]。石蠟包埋切片技術通過離心沉淀、聚集更多病變細胞，經甲醛固定液形成細胞塊、然后經石蠟包埋、切片和染色[12]。通過該研究得出：細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的陽性率明顯低于最終結果，也明顯低于石蠟包埋，差異均有統計學意義；石蠟包埋與最終結果比較，差異無統計學意義。細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值明顯低于石蠟包埋。

(本文圖1見封三)

[1] 林靜, 周英瓊. 脫落細胞學的細胞塊制作及應用的研究進展[J].醫學綜述，2014,20(15)：2739-2740.

[2] Motherby H, Nadjari B, Friegel P, et al. Diagnostic accuracy of effusion cytology[J]. Diagn Cytopathol 1999，20:350-357.

[3] 張婉儀，羅麗花，劉惠娟，等.胸腹水細胞塊制作技術及應用[J]. 臨床醫學工程，2014,21(1):147-150.

[4] 孫亞軍，李梅，吳建農，等.細胞塊技術聯合免疫細胞化學檢測漿膜腔積液中腺癌細胞的價值[J].實用醫技雜志,2013,20(9):933-935.

[5] 黃金長，張功亮，郭廣秀，等.細胞塊石蠟包埋及免疫細胞化學染色技術在胸腹水細胞病理學診斷中的應用價值[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(5):489-490.

[6] 虞紅珍,吳強.漿膜腔積液細胞學檢查中制片技術應用的現狀與進展[J].臨床與試驗病理學雜志,2014,30(4):434-435.

[7] 王炳淑,劉友斌,卜平鳳,等. 細胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學染色病理檢查對漿膜腔積液的定性診斷價值[J]. 山東醫藥,2015,55(28):98-99.

[8] 劉蘊霞,劉玉俠,鐘政榮,等.惡性漿膜腔積液200例細胞學檢驗的臨床分析[J]. 中華全科醫學,2012,10(1):111-112.

[9] 楊紅,王影,覃勝,等.漿膜腔積液細胞塊對提高細胞學診斷及開展基因檢測的價值[J].中華臨床醫師雜志,2013,7(21):71-73.

[10] 李慶國.細胞塊石蠟切片檢查對惡性漿膜腔積液的診斷價值[J]. 中國醫療設備,2015,30(3):111-113.

[11] 茅育蕾,傅江河. 細胞塊石蠟切片在胸腹水病理診斷中的應用價值[J]. 全科醫學臨床與教育,2016,14(1):100-101.

[12] 龔建化,何麗，周茂林.細胞塊技術在肺腺癌胸腔轉移診斷中的應用價值[J].中國醫師進修雜志,2012,35(4):41-43.

R730.4

B

1000-744X(2016)11-1197-03

2015-06-27)