高效液相色譜法測定復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量

程洪兵

（河南省濮陽市人民醫(yī)院，河南 濮陽 457000）

高效液相色譜法測定復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量

程洪兵

（河南省濮陽市人民醫(yī)院，河南 濮陽 457000）

目的 建立測定復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏中測定醋酸曲安奈德含量的高效液相色譜法。方法 色譜柱為 Welchrom C18柱（250 mm×4．6 mm，5 m），流動相為甲醇-水（70∶30），檢測波長為240 nm。結(jié)果醋酸曲安奈德質(zhì)量濃度在25．4～89．0 g／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，平均回收率為99．08%，RSD為1．10%(n＝6)。結(jié)論 該法簡便快捷、準(zhǔn)確可靠，可作為測定醋酸曲安奈德含量的質(zhì)量控制方法。

復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏；醋酸曲安奈德；含量測定；高效液相色譜法

復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏是本院醫(yī)院制劑（批準(zhǔn)文號為豫藥制字H20121649＜濮＞），用于脂溢性皮炎、神經(jīng)性皮炎、蟲咬性皮炎、濕疹、銀屑病等癥的治療，效果較佳，已在臨床應(yīng)用多年。該藥物原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，醋酸曲安奈德和尿素2組分的含量測定均采用紫外分光光度法。由于醋酸曲安奈德含量較低，且易受尿素和其他基質(zhì)的干擾，操作過程煩瑣、費(fèi)時，且準(zhǔn)確度較差。本研究中通過方法學(xué)考察，建立測定醋酸曲安奈德含量的高效液相色譜法[1]，旨在減少測定時間和強(qiáng)度，提高結(jié)果準(zhǔn)確度，更好控制藥品質(zhì)量。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Waters 515型高效液相色譜儀（美國Waters公司）；

92SM-202A型電子天平（瑞士Precisa公司）；電熱恒溫水溫箱（北京科學(xué)儀器廠）。

1．2 試藥

復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏及陰性樣品（批號分別為150722，150819，150915，濮陽市人民醫(yī)院制劑室提供）；醋酸曲安奈德對照品(中國食品藥品檢定研究院，供含量測定用，批號100125-201103)；甲醇為色譜純，水為注射用水。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Welchrom C18柱（250 mm×4．6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（70∶30）；流速：1．0 mL／min；檢測波長：240 nm；進(jìn)樣量：20 μL；柱溫：40℃。在擬訂色譜條件下，醋酸曲安奈德的保留時間為15．6 min，理論板數(shù)按醋酸曲安奈德峰計算應(yīng)不低于2 500。

2．2 溶液制備

取醋酸曲安奈德對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1 mL中約0．125 mg的溶液，作為對照品貯備液。精密量取此溶液20 mL，置50 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。取復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏3．0 g，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加甲醇約60 mL，置80℃水浴中加熱2 min，振搖使醋酸曲安奈德溶解，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2 h以上，取出，迅速濾過，取續(xù)濾液，放置室溫，作為供試品溶液。取處方中不含醋酸曲安奈德的其他藥物制成的陰性樣品同法制備陰性對照品溶液。

2．3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn)：取2．2項(xiàng)下的對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液，按擬訂色譜條件進(jìn)行測定。結(jié)果供試品溶液中醋酸曲安奈德和其他組分色譜峰可達(dá)到基線分離，陰性對照品溶液對醋酸曲安奈德的測定無干擾，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：分別精密量取對照品貯備液2．0，3．0，4．0，5．0，6．0，7．0 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。分別吸取20 μL，按擬訂色譜條件進(jìn)樣，測定醋酸曲安奈德峰面積。以醋酸曲安奈德質(zhì)量濃度（C，μg／mL）對峰面積（A）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程A＝2．081 9×104C＋1．415 1×104，r＝0．999 9(n＝6)。結(jié)果表明，醋酸曲安奈德質(zhì)量濃度在25．4～89．0 μg／mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：精密量取2．2項(xiàng)下的同一對照品溶液20 μL，按擬訂色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次，以峰面積計算。結(jié)果的 RSD為0．46%(n＝5)，表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：精密量取同一批號的樣品（批號為150819）5份，依法制備供試品溶液并進(jìn)樣，測得峰面積。結(jié)果的 RSD為 0．65%（n＝5），表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一份供試品（批號為150819）溶液，室溫放置，于0，1，2，4，8 h時分別進(jìn)樣20 μL，按擬訂色譜條件，注入高效液相色譜儀，記錄峰面積。結(jié)果的 RSD為0．81%(n＝5)，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn)：取同一批樣品（批號為150915，含量為1．95 mg／g）6份，精密稱取，分別精密加入醋酸曲安奈德對照品貯備液6．0，8．0，10．0 mL，依2．2項(xiàng)下供試品溶液方法制備溶液，按擬訂色譜條件進(jìn)行測定，并計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 醋酸曲安奈德加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

2．4 樣品含量測定

分別精密量取樣品 3批（批號分別為 150722，150819，150915），依2．2項(xiàng)下的方法制備3份供試品溶液，分別吸取對照品溶液和3份供試品溶液各20 μL注入液相色譜儀中，測定峰面積，按內(nèi)標(biāo)法計算含量，結(jié)果見表2。

表2 3批樣品中醋酸曲安奈德含量測定結(jié)果（n＝3）

3 討論

曾考察超聲30 min提取樣品，經(jīng)圖譜比較計算，最終選擇置80℃水浴中加熱2 min后冰浴提取的方法。對醋酸曲安奈德對照品溶液進(jìn)行波長掃描，顯示于240 nm波長處有最大吸收，尿素在此處無吸收。由于本品中尿素含量較高，曾選用其他成分及比例的流動相[2-4]，結(jié)果顯示流動相比例為70∶30，醋酸曲安奈德峰與鄰近組分色譜峰分離度大于 1．5，保留時間適宜。保持柱溫40℃，醋酸曲安奈德峰對稱性好，其他組分峰明顯減少，結(jié)果滿意。

高效液相色譜法測定復(fù)方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量，簡便快捷、準(zhǔn)確可靠，可作為測定醋酸曲安奈德含量的質(zhì)量控制方法。

[1]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（二部）[M]．北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄23-附錄24．

[2]劉光斌，劉效栓，姜芳寧，等．高效液相色譜法測定濕疹乳膏中氯霉素和醋酸曲安奈德乳膏含量[J]．中國藥業(yè)，2010，19（23）: 34-35．

[3]王 艷，徐 暉，劉玉強(qiáng)，等．HPLC法測定乳膏中聯(lián)苯芐唑和醋酸曲安奈德的含量[J]．中國新藥雜志2007，16（8）:631-633．

[4]李愛英，尹艷連，趙作連．復(fù)方曲氯乳膏的制備及臨床應(yīng)用[J]．中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2007，27（2）:260-262．

Content Determination of Triamcinolone Acetonide Acetate in Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream by HPLC

Cheng Hongbing
(Puyang People′s Hospital,Puyang,Henan,China 457000)

Objective To establish an HPLC method for the content determination of triamcinolone acetonide acetate in Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream．Methods Welchrom C18column(250 mm×4．6 mm,5 μm)was used with methanol-water (70∶30)as mobile phase and UV detection wave length was 240 nm．Results The linear range of triamcinolone acetonide acetate was 25．4～89．0 μg／mL．The average recovery was 99．08% and RSD was 1．10%(n＝6)．Conclusion The method is simple,convenient and accurate．It can be used for quality control of Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream．

Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream;triamcinolone acetonide acetate;content determination;HPLC

R927．2；R986

A

1006－4931(2016)11－0063－03

程洪兵，男，大學(xué)本科，副主任藥師，主要從事藥品檢驗(yàn)及新制劑開發(fā)工作，（電子信箱）pychbing＠126．com。

2015－08－13；

2016－01－11)