產植酸酶芽孢桿菌對艾維茵肉雞生產性能、免疫器官指數和腸道菌群的影響

摘要：本試驗旨在研究產植酸酶芽孢桿菌對艾維茵肉雞生產性能、免疫器官指數和腸道菌群的影響。選取240只1日齡健康艾維茵肉雞，隨機分4組，每組20只，3個重復。對照組飼喂基礎飼糧；試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎飼糧中分別添加終濃度為1.0×106、1.0×107和1.0×108 CFU/g的產植酸酶芽孢桿菌制劑，試驗期為42 d。結果表明，在1～42日齡時，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的平均日增重顯著高于對照組（P<0.05），試驗Ⅱ組的料重比顯著低于對照組（P<0.05）。產植酸酶芽孢桿菌對肉雞的免疫器官指數無顯著差異（P>0.05），但試驗組與對照組相比均有提高趨勢，其中試驗Ⅱ組免疫器官指數最高。21日齡時，試驗Ⅱ組腸道乳酸桿菌和雙歧桿菌數量極顯著地高于對照組（P<0.01），各試驗組的大腸桿菌數量均極顯著地低于對照組（P<0.01）；42日齡時，各試驗組的乳酸桿菌數量極顯著地高于對照組（P<0.01），各試驗組的雙歧桿菌數量顯著高于對照組（P<0.05），各試驗組的大腸桿菌數量極顯著地低于對照組（P<0.01）。由此可知，飼料中添加一定量的產植酸酶芽孢桿菌具有提高艾維茵肉雞的生產性能、免疫器官指數和改善腸道菌群的作用，其中按1×107 CFU/g劑量添加效果最好。

關鍵詞：芽孢桿菌；植酸酶；艾維茵肉雞；生產性能；免疫器官指數；腸道菌群

中圖分類號：S831 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）15-3942-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.15.035

Abstract： This experiment was conducted to investigate the effects of phytase producing Bacillus on the production performance，immune organ index and intestinal microbiota in avain broiler. A total of 240 one-day old broiler chicken were randomly divided into 4 groups with 20 chicken per group and， 3 replicates. Control group（Group） were fed the basal diet，the test group（GroupⅠ，Ⅱ，Ⅲ） were fed with the basal diet and different dose of Bacillus（1.0×106 CFU/g，1.0×107 CFU/g，1.0×108 CFU/g） respectively. The experiment lasted for 42 days. The results showed as follow： Compared with the control group， the average daily gain in group Ⅰand Ⅱ were significantly increased（P<0.05），and the feed/weight ratio of broilers in group Ⅱ were significantly decreased（P<0.05） during day 1 to 42. There was an increasing trend in the immune organ index between experimental groups and the control group，and the immune organ index in group Ⅱ was highest，but there were no significant differences in all groups（P>0.05）. On day 21，compared with the control group，the number of Lactobacillus and Bifidobacterium in the intestinal of group Ⅱwere significantly increased（P<0.01），and the number of E. coli in the intestinal of all test groups were significantly decreased（P<0.01）. On day 42，compared with the control group，the number of lactobacillus in the intestinal of all test groups were significantly increased（P<0.01），the number of Bifidobacterium in the intestinal of all test groups were significantly increased（P<0.05），and the number of E. coli in the intestinal of all test groups were significantly decreased（P<0.01）. The results suggest that supplementing a certain amount of phytase producing Bacillus to fodder can increase the production performance and immune organ index，improve the intestinal microbiota， and the optimum added dose was 1.0×107 CFU/g.

Key words： Bacillus； phytase； Avain broiler； production performance； immune organ index； intestinal microbiota

隨著對健康意識的不斷增強，人們對動物性食品質量愈加關注。科學研究表明人類的一些健康問題與肉、蛋、奶中的抗生素、激素和其他合成藥物的殘留有關[1]，所以動物性食品中的藥物殘留已成為當今最熱門的話題。近年來，為了尋找抗生素的替代品，國內外學者進行了大量研究，其中益生菌作為抗生素替代品已被廣泛應用于畜禽養殖業[2]。芽孢桿菌是最理想的微生物飼料添加劑，它不僅營養需求簡單，易于培養，而且抗逆性較強，還能分泌動物所需的蛋白酶、淀粉酶及植酸酶等。動物食用后能夠消耗其腸道內的氧氣，抑制需氧致病菌的增殖，可以提高動物的生產性能和免疫功能[3]。植酸酶能夠提高飼料中植酸磷的利用率，解除植酸的抗營養作用，提高飼料中礦物元素蛋白質和氨基酸的利用率，以提高動物的生產性能。因此，本試驗以前期分離的產植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C為飼料添加劑飼喂肉雞，通過檢測生產性能、免疫器官指數、腸道菌群數量等指標，以評價該菌株開發為微生態菌種的可能性，并為其作為飼料添加劑替代抗生素在畜牧業上應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種 產植酸酶紡錘形賴氨酸芽孢桿菌B.Ld2-C制劑（經液體發酵制備，含活菌數1×1010 CFU/g），由河南科技大學宏翔生物飼料實驗室分離保存。

1.1.2 試驗動物分組與管理 選取1日齡健康艾維茵肉雞240只，隨機分為4組，每組20只，3個重復。對照組飼喂基礎飼料；試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎飼料中分別添加終濃度為1.0×106、1.0×107、1.0×108 CFU/g的產植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C制劑。試驗期為42 d。基礎飼料參照我國飼料成分及營養價值表（2014年第25版）肉雞營養需求配制。試驗期間各組飼養管理條件一致。

1.2 測定指標

1.2.1 生產性能 分別在試驗雞1、7、14、21、28、35、42日齡時空腹稱重，記錄各組雞的體重和耗料量，計算各組平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.2.2 免疫器官指數 分別在雞只21 d和42 d時，從各組每個重復隨機抽取3只雞稱重并剖殺，取脾臟、法氏囊和胸腺，剔除脂肪后稱重，計算免疫器官的絕對質量并計算免疫器官指數，計算公式為：免疫器官指數（g/kg）=免疫器官重（g）/體重（kg）

1.2.3 腸道菌群 在上步剖殺雞的同時，取中段回腸約3 cm結扎后送實驗室無菌取樣1 g，加入9 mL生理鹽水，充分混勻，進行10梯度稀釋，取合適梯度的稀釋液20 μL分別滴種到乳酸桿菌（MRS培養基）、雙歧桿菌（BBL培養基）、大腸桿菌（伊紅-美蘭培養基）的專性培養基進行相應的微生物數量測定。用1 g腸內容物所含細菌數量的對數[lg（CFU/g）]表示。

1.3 數據統計與分析

所有數據采用SPSS 19.0軟件進行統計分析，采用單因素方差分析one-way ANOVA進行差異性比較，差異顯著者用Duncan氏法進行多重比較。數據以平均值±標準誤表示，P>0.05表示差異不顯著，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 產植酸酶芽孢桿菌對肉雞生產性能的影響

產植酸酶芽孢桿菌對肉雞生產性能的影響見表1。由表1可知，21日齡內，與對照組相比，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的平均日增重均極顯著提高（P<0.01），且極顯著高于Ⅲ組（P<0.01）；試驗Ⅱ組的料重比顯著低于其余各組（P<0.05），其余各組間的料重比無明顯差異（P>0.05）。22～42日齡，與對照組相比，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的平均日增重有上升的趨勢，但兩者間無顯著差異（P>0.05）。在1～42日齡，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的平均日增重顯著地高于對照組（P<0.05），料重比顯著地低于對照組（P<0.05）。

2.2 產植酸酶芽孢桿菌對肉雞免疫功能的影響

產植酸酶芽孢桿菌對肉雞免疫功能的影響見表2。由表2可知，各組間的胸腺指數、法氏囊指數和脾臟指數均無顯著差異（P>0.05），但試驗組與對照組相比均有提高趨勢，表明添加芽孢桿菌能有效提高肉雞免疫器官指數。總體來講，試驗Ⅱ組的免疫器官指數最高。

2.3 產植酸酶芽孢桿菌對肉雞主要腸道菌群的影響

從表3中可知，21日齡時，在乳酸桿菌和雙歧桿菌數量方面，試驗Ⅱ組極顯著地高于對照組（P<0.01），試驗Ⅰ組顯著高于對照組（P<0.05），試驗Ⅲ組也高于對照組，但差異不顯著（P>0.05）；各試驗組的大腸桿菌數量與對照組相比均極顯著地降低（P<0.01），各試驗組之間差異不顯著（P>0.05）。42日齡時，各試驗組的乳酸桿菌細菌數量極顯著的高于對照組（P<0.01），而大腸桿菌數量極顯著的低于對照組（P<0.01），各試驗組的雙歧桿菌數顯著高于對照組（P<0.05）。

3 討論

3.1 產植酸酶芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

Li等[4]研究發現，飼料里添加B. subtilis CGMCC 1.1086明顯促進了AA肉雞的日增重和飼料轉化率。譚莉等[5]研究發現地衣芽孢桿菌制劑和枯草芽孢桿菌制劑能顯著提高1～21日齡肉雞平均日采食量和平均日增重，有增加料重比的趨勢。由此可見，飼料中添加芽孢桿菌對肉雞的生產性能有一定的促進作用。本試驗表明，肉雞日糧中添加一定劑量的芽孢桿菌制劑，可顯著提高肉雞的體重并降低料重比。本試驗采用在飼料中添加菌粉的方式飼喂肉雞，劑量分別為1.0×106、1.0×107、1.0×108 CFU/g。從整個喂養過程來看，按照1.0×107 CFU/g劑量添加時，不管是在增加肉雞的平均體重還是降低料重比上，效果均優于1.0×106、1.0×108 CFU/g劑量添加組，表明菌量加的過多或過少都不能明顯增加肉雞的生長性能，有時反而會降低生長性能。

3.2 產植酸酶芽孢桿菌對免疫功能的影響

禽類最重要的免疫器官就是胸腺、脾臟和法氏囊，其中胸腺是細胞免疫的中樞器官，法氏囊是禽類特有的體液免疫器官，脾臟則是禽類最大的外周免疫器官，參與了全身的細胞免疫和體液免疫。免疫器官指數是這些免疫器官占活體體重的比例，這個比例反映了這些器官的相對發育程度，也反映了機體的免疫功能。近年的研究表明，芽孢桿菌能促進動物免疫器官的發育，能提高動物機體的T細胞、B細胞的數量，提高動物體液和細胞免疫的水平。林顯華等[6]研究發現枯草芽孢桿菌可顯著提高飼喂雛雞的脾臟指數和法氏囊指數。潘寶海等[7]發現在肉雞日糧中添加芽孢桿菌能可明顯提高免疫器官指數和血清中IgG水平。李衛芬等[8]研究表明枯草芽孢桿菌可促進雛雞盲腸和回腸黏膜中IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α的表達。本試驗也發現試驗組添加產植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C后其免疫器官指數高于對照組，按1×107 CFU/g劑量添加時，肉雞免疫器官指數最高，表明在飼料中添加一定量的芽孢桿菌可提高機體的免疫水平。

3.3 產植酸酶芽孢桿菌對肉雞腸道菌群的影響

一般來說，健康動物腸道中各種細菌的比例基本是保持不變，動物長期持續飼喂芽孢桿菌可產生病原菌拮抗物質，拮抗腸道病原細菌，起到維護和調節腸道微生態平衡的作用。芽孢桿菌為需氧菌，在生長過程中需要大量的氧氣，大量吸收了動物腸道內游離的氧，降低了腸道內氧的濃度，有利于乳酸桿菌、雙歧桿菌等厭氧菌的生長，同時使腸道中需氧菌的生長受到抑制，從而提高動物機體的抗病能力。葉玉娥等[9]將芽孢桿菌制劑飼喂肉雞后可顯著降低肉雞盲腸道內的大腸桿菌數。楊家軍等[10]研究表明，在痳雞日糧中添加地衣芽孢桿菌能增加腸乳桿菌和雙歧桿菌數量，減少腸球菌和葡萄球菌的數量。本試驗中添加植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C肉雞的乳酸桿菌和雙歧桿菌的數量均上升，大腸桿菌數量下降，其中1.0×106 CFU/g和1.0×107 CFU/g添加量的作用更明顯，表明產植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C可以優化腸道菌群結構，促進有益菌的增殖。

4 結論

本試驗結果表明，飼料中添加產植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C可顯著提高艾維茵肉雞的生產性能，極顯著地改善腸道菌群，且可提高免疫器官指數，按1.0×107 CFU/g劑量添加的效果優于其他添加劑量。

參考文獻：

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[7] 潘寶海，孫冬巖，王文娟，等.芽孢桿菌對肉雞免疫機能的影響[J].飼料研究，2014（21）：46-47.

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[10] 楊家軍，錢 坤，章 薇，等.地衣芽孢桿菌對肉雞腸道菌群和小腸形態學的影響研究[J].中國獸醫學報，2014，34（4）：664-668.