豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫效果評估

摘要：為了考察市售高效滅活疫苗與政府采購疫苗免疫效果之間差異分別選取了兩家疫苗公司生產(chǎn)的政府采購疫苗和高效滅活疫苗，分別在4個豬場展開免疫效果評估。4個豬場按照相同的免疫程序進行免疫，分別采集免疫前、加強免疫后30 d、加強免疫后60 d的血清，用O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒進行抗體檢測。結(jié)果表明，加強免疫后30 d，抗體平均效價依次為1∶196.9、1∶251.9、1∶256.0、1∶243.8。高效滅活苗與政府采購疫苗在同樣的免疫程序和免疫劑量下，同一時間點其抗體水平效價差異不顯著；但免疫副反應(yīng)方面，高效滅活疫苗比政府采購疫苗低，且差異極顯著。

關(guān)鍵詞：口蹄疫；高滅活效苗；效果評估

中圖分類號：S858.28 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）15-3950-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.15.037

Abstract： To examine the difference immune efficiency between commercially available inactivated vaccine and the Government Procurement vaccine. This experiment respectively selected two vaccines company which produce government procurement of vaccines and effective inactivated vaccines，four pig farms were launched immune effection assessment. Four pig farms were immunized according to the same immunization program，were collected before immunization，strengthening immunization 30 d，60 d strengthen the serum after immunization，O-FMD antibody were detectived by liquid phase blocking ELISA kit. The result shows，after booster 30 d，the average of antibody titers were 1∶196.9，1∶251.9，1∶256.0，1∶243.8. Inactivated vaccine of efficient and procurement vaccines under the same immunization program and immunization dose，the same time the level of its antibody titers were not significant； But the deputy responses of immune，The inactivated vaccine effective vaccine lower than the government procurement，and the difference was significant.

Key words：FMD； high efficiency inactivated vaccine； effect evaluation

口蹄疫（Aphthae epizooticae，F(xiàn)ood-and-mouth disease）是偶蹄動物共患的一種急性、發(fā)熱性、高度接觸性傳染病，是目前危害養(yǎng)豬業(yè)較為嚴重的一種烈性傳染病。其臨床特征是在口腔黏膜、蹄部和乳房皮膚發(fā)生水疤和潰爛[1]。以免疫為主的綜合性防治措施對動物口蹄疫的防控起到了一定的作用，但由于疫苗免疫保護率低、免疫抗體在動物體內(nèi)持續(xù)時間短，是口蹄疫疫病防控的主要技術(shù)瓶頸。為此大多數(shù)生產(chǎn)企業(yè)都生產(chǎn)并試銷了O型口蹄疫高效滅活疫苗，市場對“高效滅活疫苗”的反映較好，少數(shù)規(guī)模養(yǎng)豬場寧可花巨資購買高效苗也不用免費提供的政府采購疫苗，為了科學評價高效滅活疫苗的免疫效果以及免疫后生豬抗臨床發(fā)病情況開展本試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗豬場

在湖南省婁底市新化縣游家鎮(zhèn)選取養(yǎng)殖密度大、口蹄疫發(fā)病風險高的4個中等規(guī)模養(yǎng)豬場，養(yǎng)豬規(guī)模、健康狀態(tài)、管理條件接近，存欄母豬30～50頭左右。這4個豬場在2014年底均發(fā)生過疑似口蹄疫疫情。

1.2 疫苗與試劑

疫苗：豬O型口蹄疫高效滅活疫苗（M公司，生產(chǎn)批號：1510003；N公司，生產(chǎn)批號：H150207J）。豬O型口蹄疫政府采購滅活疫苗（M公司，生產(chǎn)批號為：1501006；N公司，生產(chǎn)批號：H151058J）

試劑：O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧獸醫(yī)研究所，生產(chǎn)批號：20151016101-5。

1.3 試驗方法

1.3.1 免疫程序

將4個試驗豬場隨機分為試驗1、2、3、4組，豬O型口蹄疫疫苗按統(tǒng)一免疫程序注射，母豬跟胎免疫2次，每次1頭份，每組選取60日齡、口蹄疫O型母源抗體水平基本一致的同批次仔豬30頭。4個試驗組分別注射M廠高效滅活疫苗、M廠政府采購滅活疫苗、N廠高效滅活疫苗、N廠政府采購滅活疫苗。免疫程序為仔豬在60日齡進行首免，90日齡加強免疫1次，兩次的免疫劑量均為2 mL。豬瘟、藍耳病等其他疫病按照國家有關(guān)規(guī)定進行免疫。

1.3.2 樣品采集 分別在初次免疫前，加強免疫后30、60 d進行前腔靜脈采血5 mL，室溫靜置2 h后，離心，取血清置于EP 管內(nèi)，-20 ℃保存。

1.3.3 抗體水平檢測 按照O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒說明書的操作方法進行。

1.3.4 結(jié)果判定 抗體效價大于或等于1∶128時，判定為陽性；1∶64～1∶128時，判定為疑似；小于或者等于1∶64，判定為陰性。對結(jié)果為疑似的樣品進行復測，復測抗體效價大于或等于1∶128，判定為陽性，小于1∶128判定為陰性。

1.3.5 免疫副反應(yīng)觀察 每次免疫當天開始，連續(xù)觀察3 d。若有食欲減退、嘔吐、體溫升高等，及時記錄；若出現(xiàn)焦躁不安、呼吸加快、肌肉震顫、口角白沫、鼻腔出血等，立即救治并記錄；觀察各組豬的飲食狀況，疫苗注射1～2 d后，觀察注射部位有無吸收不良現(xiàn)象。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗體檢測結(jié)果

試驗豬分別在初次免疫前，加強免疫30、60 d后采血，進行抗體效價檢測。由表1可知，4個試驗組在免疫的抗體效價結(jié)果均為陰性，加強免疫30 d后抗體效價水平整體最高，加強免疫60 d后，依然有較高的效價，隨著免疫時間的推移抗體效價逐漸下降（圖1）。采用SAS3.0.1軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，各試驗組在免疫后30 d、60 d抗體效價差異均不顯著。4個豬場的抗體合格率在加強免疫后30 d達到峰值，在加強免疫后60 d仍然在90%以上（表2）。

2.2 免疫副反應(yīng)觀察結(jié)果

統(tǒng)計觀測試驗期間進行口蹄疫疫苗免疫注射的豬只，有少數(shù)豬只出現(xiàn)臨床不良反應(yīng)，主要表現(xiàn)為休克（表3）。試驗1組和試驗3組的免疫副反應(yīng)極顯著低于試驗2組和試驗4組。

3 討論

幾年來口蹄疫疫苗的免疫效果評價不一，國家推行強制免疫方案以來，一直采取政府采購，免費發(fā)放給養(yǎng)殖戶，但是其免疫效果及臨床抗病能力頗有爭議[2]。隨著國家動物疫病強制免疫計劃的調(diào)整，對疫苗的政府采購逐步放寬，部分地區(qū)試點實行養(yǎng)殖戶自行采購的形式來防控。很多疫苗生產(chǎn)公司逐步推出口蹄疫高效滅活苗，其宣傳免疫效果比政府采購苗好，副反應(yīng)小。

目前口蹄疫疫苗主要以滅活疫苗為主，副反應(yīng)比較大[3，4]。在此次試驗中，兩家公司生產(chǎn)的高效苗和政府采購苗在同樣的免疫劑量和免疫程序下，其免疫抗體水平差異不顯著。但是高效苗比政府采購苗其免疫副反應(yīng)低，說明高效苗可能是生產(chǎn)工藝改進，在政府采購疫苗的基礎(chǔ)之上進一步純化。

影響疫苗免疫效果的因素有很多，如豬群的健康狀態(tài)、疫苗的質(zhì)量、合理的免疫程序等[5-7]。在母源抗體水平較高的情況下，進行口蹄疫疫苗的免疫也會顯著降低免疫效果[8]。筆者認為應(yīng)根據(jù)豬場自身免疫抗體水平情況，制定適合于本場的免疫程序。每年進行兩次全群抽樣監(jiān)測評估群體保護率，及時補注避免疫情的發(fā)生。俗話說豬病都是養(yǎng)出來的，場主管理員應(yīng)注重豬場飼養(yǎng)管理，提供舒適的飼養(yǎng)環(huán)境。加強場內(nèi)生物安全體系建設(shè)，從控制傳染源和切斷疫病傳播途徑這兩個方面入手，防范重大動物疫病的發(fā)生。

參考文獻：

[1] 劉在新.全球口蹄疫防控技術(shù)及病原特性研究概觀[J].中國農(nóng)業(yè)科學，2015，48（17）：3547-3564.

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