吡喹酮治療血吸蟲肝纖維化效果及細胞因子變化的臨床觀察

摘要：目的 研究吡喹酮治療血吸蟲肝纖維化前后血清IFN-Y、lL-4、IL-5、IL-10水平及肝纖維化的變化。方法 用ELISA雙抗體夾心法檢測吡喹酮治療前后IFN-Y、lL-4、IL-5、IL-10水平，行肝臟彩超觀察吡喹酮治療肝纖維化的效果。結果 治療前患者血清IFN-Y、lL-4、IL-5、IL-10 水平較正常組顯著下降（P<0.01），治療后IFN-Y、IL-4、IL-5、IL-10水平較治療前顯著增加（P<0.01），治療后患者肝纖維化有部分好轉。結論 治療前患者免疫應答水平明顯下降，治療后患者免疫應答水平明顯回復，肝纖維化可部分好轉。

關鍵詞：吡喹酮；細胞因子；血吸蟲病；肝纖維化

人類感染血吸蟲后，沉積于肝臟的蟲卵引發慢性肉芽腫反應并導致漸重的肝纖維化，在形成肝纖維化的免疫應答過程中，TH1類細胞因子和TH2類細胞因子起著重要的作用。吡喹酮是治療血吸蟲肝纖維化的首選化療藥物，本文研究吡喹酮治療對血吸蟲肝纖維化患者免疫應答的影響，就治療前后細胞因子的應答水平及肝纖維化治療效果進行了分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇自2013年5月～2015年5月到我院就診，初次診斷為慢性血吸蟲病（符合血吸蟲病診斷標準WS 261-2006），且肝臟彩超示血吸蟲肝纖維化（II級）患者32例，其中男性19例，女性13例，年齡12～63歲，平均38歲；另隨機選30例健康者對照，其中男性18例，女性12例，年齡11～65歲，平均37歲，均采血備用。

1.2方法 感染組予以吡喹酮（劑量60 mg/kg，分2 d口服，體重>60 kg患者總劑量為3600 mg，仍分2 d口服）治療，治療2個月后再次采血。

1.3實驗方法 取患者及健康者血離心，取上清于1.5 mL離心管中-70℃超低溫冰箱保存備用。IFN-Y、IL-4、IL-5、IL-10檢測試劑盒 購 自 北 京 達 科 為 生 物 技 術 有 限 公 司 ，參照試劑說明書進行，4種細胞因子檢測的最低靈敏度均為15.6 ng/L，用ABC-ELISA雙抗體夾心法檢測細胞因子，從標準曲線上查找對應濃度，確定樣品含量。并且半年后復查肝臟彩超了解肝纖維化程度。

2 結果

2.1吡喹酮治療肝纖維化效果 32例患者經標準吡喹酮治療后，有3例患者復查肝臟彩超示肝臟形態正常，有8例患者示肝纖維化I級，有21例患者肝臟彩超無明顯變化，提示吡喹酮治療可部分逆轉血吸蟲肝纖維化。

2.2血清IFN-Y、Ll-4、IL-5、IL-10 檢測結果 與正常組比較，感染組治療前所有細胞因子水平均顯著下降（P<0.01），且以IFN-Y、IL-10下降更為明顯；吡喹酮治療后較治療前所有細胞因子水平均顯著升高，且以IFN-Y、lL-10上升更為明顯，見表1。

3 討論

宿主感染血吸蟲后，機體持續處于對血吸蟲蟲卵抗原的免疫應答狀態，導致肝星狀細胞異常激活轉化為肌成纖維細胞并大量增殖，產生大量的細胞外基質（ECM），超過了機體的降解能力，致使ECM在肝內過量沉積而導致肝纖維化，Thl型與Th2型免疫反應應答及失衡起著重要作用。Th1類免疫應答產生細胞免疫，其細胞因子主要包括IFN-Y、IL-12、、IL-2、IL-18等，Th 2類免疫應答產生體液免疫，其細胞因子主要包括IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等，Th1型細胞因子與Th 2型細胞因子有相互拮抗作用。許多研究證實，IFN-Y是一種很強的抗纖維化因子，其顯著抑制細胞外基質（ECM）的合成，也可明顯抑制重要的基質產生細胞肝儲脂細胞、HSC的激活.抑制α-肌動蛋白（α.SMA）及其mRNA的表達[1]；lL-4、IL-5、IL-10均屬TH2型細胞因子，其中lL-4、IL-5的作用較明確，可促進肝纖維化；IL-10目前其作用不一，有些學者認為其具有雙向調節作用[2]。

國內外學者認為，血吸蟲肝纖維化是可以逆轉的，而肝硬化是不可逆轉的，應用吡喹酮治療血吸蟲肝纖維化，可降低肝纖維化的程度，本研究支持了該觀點[3]。

在小鼠感染血吸蟲模型提示， 在日本血吸蟲感染初期可能主要引起一個以產生IFN-Y等為主的Th1優勢應答， 而當蟲體成熟排卵后，又誘導出一個以產生IL-4為主的Th2 優勢應答， 并抑制Th1反應， 使蟲卵肉芽腫炎癥反應逐漸減弱轉為慢性血吸蟲病[4]。但本研究顯示，感染組治療前所有細胞因子水平均下降，考慮與長期反復血吸蟲感染導致免疫下調有關[5]。且以IFN-Y、IL-10下降最為明顯，可能與兩者為抗纖維化因子，而療前患者以向肝纖維化發展有關。吡喹酮治療后所有細胞因子水平均升高，考慮是因為下調的免疫應答水平明顯回復， 其中又以IFN-Y、lL-10上升最為明顯，可能與治療后機體以抗纖維化為主有關。調節血吸蟲感染患者免疫應答水平，特別是Th1、Th2細胞因子的平衡，在預防和控制肝纖維化的形成和發展方面，是一個值得研究的課題。

參考文獻：

[1]龔國富，李曉明，王少海.細胞因子在日本血吸蟲病肝纖維化形成中的研究進展[J].現代檢驗醫學雜志，2010，25（6）：8-10.

[2]Hoffmann KF.Cheever AW.Wynn TA.IL-10 and the dangers of immune polarization：excessive type l and type 2 cytokine responses induce distinct forms of lethal immunopethology in murine schisto-somiasis[J].J Imraunol，2000，164（12）：16406-6416.

[3]Okazaki Watanabe T，Hozawa S，et al.Reversibilitg of hepatic fibrosis ： from the first report of collagenase in the liver to the possibilitg of gene threapg for recoverg[J].Keio J Med，2001，50（2）：58-65.

[4]夏超明，龔唯，駱偉，等.日本血吸蟲感染小鼠肝肉芽腫與Th1/Th2細胞因子水平的動態變化[J].復旦學報（醫學科學版），2001，28（1）：39-41.

[5]沈蕾，吳海瑋，張兆松，等.日本血吸蟲病流行區人群吡喹酮治療前后細胞因子水平的研究[J].中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志，2000，2（18）：14-16.

編輯/翟辰萬