卵巢癌組織中miR—26a的表達及其臨床意義

摘要：目的 探討分析卵巢癌組織中miR-26a的表達及其臨床意義。方法 采用qRT-PCR檢測卵巢癌組織中miR-26a的表達情況，分析卵巢癌組織中miR-26a表達與其臨床分期及淋巴結轉移間的關系。結果 qRT-PCR檢測顯示，miR-26a在25例卵巢癌組織中的表達值為0.47±0.07，miR-26a在癌旁對照組中表達值為1.12±0.14相比，存在差異，具有統計學意義（P<0.01）；卵巢癌臨床Ⅲ/Ⅳ期、Ⅰ/Ⅱ期組織中miR-26a表達值分別為0.66±0.09，0.21±0.02，存在差異，具有統計學意義（P<0.01）；miR-26a在淋巴結轉移和無淋巴結轉移組織中表達值分別為0.54±0.08、0.34±0.05，存在差異，具有統計學意義（P<0.01）。miR-26a的表達隨著卵巢癌臨床分期演進而增高。結論 miR-26a與卵巢癌的發生、臨床進展、轉移密切相關，其可能成為卵巢癌治療、預后判斷的潛在生物學指標。

關鍵詞：miR-26a；卵巢癌；生長與侵襲

miR-26a在多種惡性腫瘤的異常表達，同時與腫瘤細胞的增殖、轉移等相關。Shen等[1]研究證明miR-26a 的異位表達促進卵巢癌細胞增殖和克隆形成，且促進卵巢癌細胞生長的作用是通過ER-α的轉錄后的的miR-26a的抑制作用介導的。Chung[2]通過miRNA芯片分析了2例漿液性卵巢癌患者與健康組對照的miRNA 血清表達譜，血清中miR-26a被視為是漿液性卵巢癌潛在候選的新生標志物。本研究利用RT-qPCR 技術檢測卵巢癌患者組織miR-26a的表達改變與臨床病理參數之間的關系，探討卵巢癌發病機制及為臨床有效的治療方法提供了實驗依據。

1資料與方法

1.1一般資料 標本來自本院2011年7月～2013年2月卵巢癌和癌旁正常組織標本25例。

1.2逆轉錄 常規Trizol試劑（Invitrogen公司）抽提組織總RNA。紫外分光光度計測定RNA純度、濃度。逆轉錄按轉錄miRNA逆轉錄試劑盒（吉瑪生物公司）說明書進行。

1.3 qPCR檢測 采用Biorad公司的定量PCR儀 IQ5進行定量PCR反應。

1.4統計學分析 數據采用SPSS 13.0進行相關數據分析，計數資料采用 x±s表示，組間比較實施t檢驗。P<0.05存在差異，具有統計學意義。2結果

2.1 miR-26a在卵巢癌組織中的表達情況 qRT-PCR檢測顯示，miR-26a在25例卵巢癌組織中的表達值為0.47±0.07，miR-26a在癌旁對照組中表達值為1.12±0.14相比，存在差異（P<0.01），具有統計學意義。

2.2 miR-26a表達水平與卵巢癌臨床病理參數之間的關系 卵巢癌臨床Ⅲ/Ⅳ期、Ⅰ/Ⅱ期組織中miR-26a表達值分別為0.66±0.09，0.21±0.02，存在差異，（P<0.01），具有統計學意義；miR-26a在淋巴結轉移和無淋巴結轉移組織中表達值分別為0.54±0.08、0.34±0.05，存在差異，（P<0.01），具有統計學意義。miR-26a的表達隨著卵巢癌臨床分期演進而增高。

3討論

卵巢癌的發病率占所有女性生殖腫瘤第六位，其中每年約有230，000例新發卵巢癌患者。卵巢癌由于缺少有效的篩查手段，確診時70%以上已是晚期，而且目前大部分病人對目前的化療案已產生耐藥，對卵巢癌患者的治療成功率很低。大約每年有140，000位卵巢癌患者死亡，且對人民的生命健康造成嚴重威脅[3]。

研究證明，miRNAs成為分子生物學研究的焦點，且與腫瘤的發生發展有著極為密切的關系，研究者通過利用芯片等高等檢測技術發現miRNAs在腫瘤組織與正常組織之間存在明顯差異，且組織特異性明顯，重要的是現發現miRNAs能在人體的血清、血漿等體液中被檢測出來，進一步為無創技術診斷帶來了可能[4]。目前有關miR-26a在腫瘤中的作用的研究報道很少。Chai等[5]發現在肝細胞癌中miR-26a能使PI3K/AKT通路能下調巨噬細胞集落刺激因子的表達抑制巨噬細胞的招募。同時研究者發現miR-26a在乳腺癌細胞中顯著下調，miR-26a模擬物能顯著抑制乳腺癌組織及細胞增殖生長。通過凋亡試劑盒檢測發現，miR-26a過表達將引起乳腺癌細胞凋亡。本文運用qRT-PCR進行檢測miR-26a在卵巢癌組織中的表達情況，同時分析其臨床表達意義。結果顯示與對照正常組上皮組織相比，miR-26a在卵巢癌組織表達顯著上調，存在差異（P<0.05），具有統計學意義；此外，miR-26a隨著卵巢癌的臨床分期進展而表達增高，且有淋巴結轉移的卵巢癌表達明顯高于無淋巴結轉移的卵巢癌，存在差異（P<0.01），具有統計學意義。

我們的結果表明miR-26a在卵巢癌細胞與對照正常組織之間存在表達差異，同時也證明血清中miR-26a可以作為卵巢癌診斷的分子指標；卵巢癌患者血清miR-26a表達與卵巢癌的臨床分期、病理等級呈正相關，同時也表明miR-26a可能作為癌基因參與卵巢癌的發生發展過程，不過日后仍需進行大量實驗進行驗證。

參考文獻：

[1]Shen W，Song M，Liu J，et al.MiR-26a promotes ovarian cancer proliferation and tumorigenesis[J].PLoS One.2014；9（1）：e86871.

[2]Chung YW，Bae HS，Song JY，et al.Detection of microRNA as novel biomarkers of epithelial ovarian cancer from the serum of ovarian cancer patients[J].Int J Gynecol Cancer.2013，23（4）：673-9.

[3]Wright JD，Shah M，Mathew L，et al.Fertility preservation in young women with epithelial ovarian cancer[J].Cancer，2009，115（18）：4118-26.

[4]WitwerKW.Circulating microRNA biomarker studies： pitfalls and potential solutions[J].Clin Chem. 2015 Jan；61（1）：56-63.

[5]Chai ZT，Zhu XD，Ao JY，et al.microRNA-26a suppresses recruitment of macrophages by down-regulating macrophage colony-stimulating factor expression through the PI3K/Akt pathway in hepatocellular carcinoma. J Hematol Oncol.2015 May 29；8：56.

編輯/孫杰