摘要:石斛是中國名貴中藥材,多糖是石斛的主要有效成分之一。本文測定了不同產地,種植方式以及不同部位的齒瓣石斛多糖含量,對齒瓣石斛栽培應用有重要意義。
關鍵詞:齒瓣石斛多糖;含量測定;比較
石斛屬(Dendrobium)是蘭科第二大屬,全球約有1500種,主要集中分布在我國華南和西南地區[1]。石斛為我國名貴中藥,具有滋陰清熱、益胃生津等功效。齒瓣石斛化學成分類型多樣,其中糖類也是重要化學成分,廣西的加工品一級楓斗含量高達45.89%[2]。本文對不同齒瓣石斛多糖含量進行測定比較。
1儀器和試藥
1.1儀器 UV-2450紫外分光光度計(日本島津);電子天平;分析天平(FA200413)。
1.2試藥 對照品:D-無水葡萄糖(中國食品藥品檢定研究院,批號:110833-201205)。
1.3試劑 雙蒸水:自制;無水乙醇,95%乙醇,苯酚。
1.4藥材 見表1。
2實驗方法
2.1紫外可見分光光度法測定石斛多糖含量[3]。
2.1.1對照品溶液的配置 取D-無水葡萄糖對照品適量,精密稱定,加水制成每1 ml含94.66ug的溶液,即得。
2.1.2供試品溶液的制備 取石斛鮮品莖約60 g,精密稱定,置于九陽豆漿機中,選擇五谷模式榨汁,加水定容至1000ml,混勻,離心(轉速為4000轉/min)20min,上清液稀釋8倍,精密量取2ml置10ml塑料離心管中,精密加入無水乙醇10ml,搖勻,冷藏1 h,離心,棄上清,加80%乙醇洗滌2次,每次8ml,離心,棄上清,沉淀用熱水溶解,轉移至25ml容量瓶中,放冷,加水至刻度,搖勻,即得。
2.1.3標準曲線的繪制 精密量取對照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml,分別置10 mL具塞棕色試管中,加水補至1.0 ml,加5%苯酚溶液(臨用時配)1.0 ml,搖勻,迅速加入濃硫酸5.0mL,置沸水浴加熱20min,取出,立即置冰水浴中冷卻5 min后取出,以相應試劑為空白,照紫外-可見分光光度法在488nm波長處測定吸光度。以吸光度(A)為縱坐標,進樣量(c)為橫坐標,制備標準曲線,得回歸方程為A=0.0097c+0.0032(r=0.9997,n=7)。結果表明,D-無水葡萄糖的進樣量在0~94.66ug范圍內與吸光度呈良好的線性關系。
2.1.4樣品測定方法 精密量取供試品溶液1 ml,置于10 ml干燥具塞棕色試管中,照\"2.1.3\"項下方法自\"加水至1.0 ml\"起依法測定吸光度,從標準曲線上讀出供試品溶液中所含D-無水葡萄糖的重量(ug),計算,即得,見表2。
2.2結果 對收集到的10批云南不同產地、不同栽培方式、不同采收時間、不同保存方法齒瓣石斛多糖的含量測定,見表2。
多糖含量(%)=C*D*V*f/W
C:樣品溶液中葡萄糖濃度(ug/ml);D:樣品溶液的稀釋因素;V:樣品溶液體積(ml);f:換算因素;W:樣品的重量(g)
3討論
通過不同采收時間比較,齒瓣石斛存放時間較長時,多糖含量有所降低;不同的保存方式對齒瓣石斛多糖含量影響不大,建議常溫通風干燥保存,更方便保存運輸;不同的種植方式的齒瓣多糖含量為基質種植>橫木種植>活樹種植>自然生長。不同種樣品中多糖含量均較高,但也有較大的差異,提示各藥材的品質有差異,樣品生長環境、生長年限、保存方式及種植方式對齒瓣石斛多糖含量有影響。
參考文獻:
[1]明興加,張明,陶文靜,等.名貴中藥齒瓣石斛的開發前景[J].重慶中草藥研究,2006,54(2):51.
[2]李滿飛,徐國鈞.中國石斛類多糖的含量測定[J].中草藥,1990,10(21):10-12.
[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)[S].2010年版.北京:中國醫藥科技出版社,2010:附錄30、265.編輯/丁一