Gli—1 Smo和Cripto—1在肺癌組織中的表達和相關性研究

摘要：目的 探討Gli-1，Smo和Cripto-1在肺癌中表達及其相關性。方法 采用免疫組化方法測定40例肺癌標本及癌旁組織中Gli-1，Smo和Cripto-1三種蛋白的表達并分析Gli-1，Smo和Cripto-1的關系。結果 免疫組化結果顯示：Gli-1，Smo和Cripto-1在肺癌組織中高表達，在癌旁組織中不表達或者低表達，（P<0.05）三者在肺癌組織中的陽性表達率明顯高于癌旁組織（P<0.05）。而且肺癌組織中Cripto-1的表達與Gli-1和Smo的表達成正相關（P<0.05）。結論 Sonic hedgehog信號通路異常激活和Cripto-1高表達在肺癌的發生發展中起著重要作用，二者可能共同參與了肺癌的發生。

關鍵詞：Gli-1；Smo；Cripto-1；肺癌

肺癌是常見的惡性腫瘤之一，肺癌一經發現就處于疾病的中晚期，喪失了手術機會，由于化療耐藥，肺癌目前有效率尚不足40%[1]。近期研究表明Gli-1和Smo在肺癌的發生發展中起著重要作用[2-3]，Cripto-1作為表皮生長因子的成員之一，也參與了多種腫瘤的發生發展甚至侵襲轉移[4-5]。本文采用免疫組化的方法檢測肺癌組織及癌旁組織中Gli-1，Smo和Cripto-1，探討三種蛋白在肺癌的表達及Gli-1，Smo和Cripto-1的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集大連市第五人民醫院2008～2014年手術切除并經病理證實肺癌為手術石蠟包埋標本40例，其中男性28例，女性12例；平均年齡（56.3±5.4）歲；同時癌旁組織作為對照組。

1.2方法

1.2.1材料 Gli-1，Smo和Cripto-1單抗購自美國Epitomics公司；SP免疫組化試劑盒、磷酸鹽緩沖液、中性樹膠、DAB顯色試劑盒、蘇木素染液購、枸櫞酸鈉抗原修復液均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.2.2免疫組化檢測肺癌組織及癌旁組織中Gli-1，Smo和Cripto-1蛋白的表達所有標本經10%中性甲醛固定，石蠟包埋，4 μm連續切片，二甲苯脫蠟，梯度乙醇水化，0.01 mol/L枸櫞酸鈉緩沖液抗原熱修復，內源性過氧化物酶37℃封閉20 min；加一抗，4℃孵育過夜；加二抗37℃孵育30 min；加入辣根過氧化物酶（HRP）37℃孵育20 min；DAB顯色，蘇木素復染，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，光學顯微鏡下檢測并拍照[2]。

1.3統計學處理 所有實驗均重復3次以上，采用SPSS16.0軟件處理，計量資料采用χ2檢驗，Cripto-1與Gli-1，Smo蛋白表達的相關性采用Spearman相關分析，以P<0.05表示有顯著性差異。

2 結果

2.1 Cripto-1，Gli-1，Smo免疫組化檢測結果 Cripto-1，Gli-1，Smo免疫組化檢測結果在肺癌組織中高表達，在癌旁組織中低表達或者不表達。Cripto-1在肺癌組織中的陽性表達率為75%，明顯高于已癌旁組織（12.5%），兩者比較有顯著性差異（P<0.05）；Gli-1在肺癌組織中的陽性表達率為65%，而癌旁組織的陽性表達率僅為10%，兩組間比較有顯著差異（P<0.05）；Smo在肺癌組織和癌旁組織中陽性表達率分別為70%，22%，二者比較有統計學差異（P<0.05）。

2.2 Cripto-1與Gli-1，Smo蛋白表達的相關性 Spearman相關分析顯示術前化療肺癌組織中Cripto-1的表達與Gli-1表達呈正相關（r=0.663，P<0.05），其表達與Smo表達亦呈正相關（r=0.655，P<0.05），見表1。

3 討論

Sonic hedgehog信號通路是人類胚胎發育過程中的重要信號通路，Gli-1和Smo作為該通路的關鍵因子參與了多種腫瘤的發生發展，包括乳腺癌，胰腺癌，食道癌，大腸癌等[6-8]。本研究結果顯示：Gli-1和Smo在癌旁組織不表達或者弱表達，其在肺癌組織中的陽性表達率明顯高于癌旁組織（P<0.05）。

諸多研究發現Cripto-1在結腸癌、乳腺癌、胃癌和胰腺癌等多種惡性腫瘤組織中高表達，而在正常組織中不表達或者低表達[9]。我們研究表明Cripto-1在癌旁組織不表達或者弱表達，其在肺癌組織中的陽性表達率明顯高于癌旁組織（P<0.05）。提示Cripto-1也在肺癌的發生發展中起著重要作用。

此外我們的研究表明肺癌組織中Cripto-1的表達與Gli-1和Smo表達成正相關（P<0.05）。提示Sonic hedgehog信號通路和Cripto-1密切相關。

綜上，Sonic hedgehog信號通路異常激活和Cripto-1高表達在肺癌的發生發展中起著重要作用，二者可能共同參與了肺癌的發生，二者內在關系有待于進一步研究。

參考文獻：

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[9]楊瑩，康靜波.Cripto-1與腫瘤的發生和發展[J].安徽醫藥，2013，17（10）：1648-1649.

編輯/翟辰萬