HIV-1/2抗體唾液快速檢測試劑在貴陽市MSM人群中的應用及評價

馬黎婷 袁飛 周健 佘敏 石作宏△ 洪峰

(1.貴州醫科大學公共衛生學院，貴州 貴陽 550025；2.貴陽市疾病預防控制中心，貴州 貴陽 550003)

HIV-1/2抗體唾液快速檢測試劑在貴陽市MSM人群中的應用及評價

馬黎婷1袁飛2周健2佘敏2石作宏2△洪峰1

(1.貴州醫科大學公共衛生學院，貴州 貴陽 550025；2.貴陽市疾病預防控制中心，貴州 貴陽 550003)

艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型抗體； 唾液； 快速檢測試劑； MSM

自1981年在美國舊金山的男男性接觸人群(men who have sex with men，MSM)中發現5例艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome, AIDS)病人以來[1]，全世界每天有超過7000例新感染病例并且遍布世界各地[2]。其中MSM是感染人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)的高危人群。經性傳播是我國艾滋病最為主要的傳播途徑，而且男男同性性傳播增加明顯，MSM傳播HIV所占比例從2006年的2.5%增加到2013年的21.4%，已成為我國艾滋病病毒HIV感染率上升最快的人群之一[3]。因此，在MSM人群AIDS/HIV監測中，采用快速HIV抗體檢測試劑提高MSM人群的HIV感染檢出率，擴大干預人數，是控制HIV在MSM人群中蔓延傳播的關鍵。本研究以MSM人群唾液為檢測標本，對HIV-1/2抗體唾液快速檢測試劑進行靈敏度和特異度的比較研究，進一步驗證唾液檢測試劑的準確性，為唾液試劑在人群HIV1/2抗體篩查中的推廣應用提供依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象

采用滾雪球抽樣方法，選擇134名未知自己HIV感染狀況的自愿咨詢檢測HIV的MSM為研究對象，同時平行采集口腔黏膜滲出液和血液標本；根據國家2009年版《全國艾滋病檢測技術規范》標準評判其HIV感染狀況。所有研究對象在其知情同意后入選，不設排除標準。

1.1.1 口腔黏膜滲出液的采集 用試劑袋中口腔拭子的布墊端沿受試者上牙齦線慢慢來回擦拭，用時5～6 s，再用布墊端的另一面擦拭下牙齦線，用時5～6 s，立即將口腔拭子的布墊插入試劑袋內裝有稀釋液的試管中，讓布墊兩面緊貼試管壁，上下刮擦6～8次，完成取樣。口腔黏膜滲出液樣本進行現場檢測并判讀結果，不予保存。

1.1.2 血液采集 用加有EDTA-K2抗凝劑的真空采血管抽取3～5 mL靜脈血，輕輕顛倒混勻3～4次，將采集的抗凝全血1500 r/min 離心15 min，吸出上層血漿20℃保存待檢。

1.2 檢測方法

1.2.1 唾液標本快速檢測 唾液樣本使用人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液檢測試劑盒(北京瑪諾生物制藥有限公司生產)進行檢測(膠體金法)，批號20130302，按其使用說明書進行操作和結果判定。

1.2.2 血液標本檢測 血液樣本使用人類免疫缺陷病毒抗體(HIV1/2)檢測試劑(廣州萬孚生物技術股份有限公司及Standard Diagnostics Inc生產)進行初篩檢測(膠體金法)，批號20140528、20140415，按其使用說明書進行操作。如果初篩檢測結果為陽性，則需要使用不同廠家生產的不同試劑進行第二次初篩檢測，最后使用確證試劑進行確證檢測。

1.2.3 確證檢測 血液樣本使用人類免疫缺陷病毒(HIV1/2型)抗體檢測試劑盒(MP生物醫學亞太私人有限公司生產)進行HIV初篩檢驗呈陽性結果的血清樣本的確證檢測(免疫印跡法)，批號20120929，按其使用說明書進行操作。

1.3 結果對比

唾液檢測結果和血液檢測結果作對比，評價唾液檢測試劑的靈敏度和特異度。靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%；特異度=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%。

2 結 果

2.1 兩種檢測試劑結果對比

唾液檢測試劑和血液檢測試劑共檢測樣本134份，唾液檢出陽性49份，血液檢出陽性48份，唾液檢測陰性85份，血液檢出陰性86份。見表1。

表1 唾液試劑和血液試劑試驗結果對比(n=134)

2.2 兩種檢測試劑確證結果對比

見表2。

表2 唾液與血液試劑確證結果對比(n=134)

2.3 唾液檢測試劑的評估結果

由表1和表2可以得出本次唾液檢測試劑的靈敏度為97.9%(47/48)，特異度為97.7%(84/86)，由靈敏度和特異度可以計算出唾液檢測試劑檢測的正確率為95.6%(97.9%+97.7%-100%)。

2.4 唾液檢測試劑和血液檢測試劑相關特性比較

對比唾液檢測試劑和血液檢測試劑的特性顯示，唾液和血液初篩試劑的共同點是都可以在室溫下進行操作，都可以通過肉眼判讀結果；不同點在于唾液試劑不需要采血，也不需要特殊的實驗室和儀器；免疫印跡法確證試劑操作比初篩試劑還要復雜，需要特殊的實驗室和判讀結果儀器，初篩實驗需要使用酶標儀、洗板機及規范的初篩實驗實，免疫印跡法需要具備規范的確證實驗室。

3 討 論

近年來，中國大中城市MSM 人群規模和AIDS疫情呈現日趨上升趨勢，貴陽、重慶、成都、昆明等西南主要城市MSM人群HIV感染率在10%以上，高于全國平均水平[4]。本研究調查134名MSM，HIV感染檢出率高達35.8%，由于AIDS的不可治愈，預防控制HIV傳播是減少AIDS對健康危害的唯一措施，早檢測、早發現、早治療是預防控制HIV傳播的有效措施之一。

傳統的HIV抗體檢測試劑都是檢測血液樣本，這類試劑必須在規定場所(如艾滋病篩查/確證實驗室)中使用，而且采集血液具有損傷性，對醫務人員等存在職業暴露的潛在危害，檢測結果等待時間長，不適于對可疑人群實施規模化的普查和篩查，所以，在長期實踐中，人們日益認識到理想中的HIV檢測方法應該具有無損傷性、安全性、靈敏性等特點[5]。隨著HIV抗體檢測試劑的發展，2004年美國FDA批準了Ora Quick公司生產的唾液HIV快速檢測試劑盒，2006年我國企業生產的以尿液和唾液作為標本進行艾滋病快速檢測的試劑也已面市，國家2009年版《全國艾滋病檢測技術規范》已將唾液HIV-1/2抗體檢測列入，但該試劑目前在國內還沒有廣泛地應用到人群中，一方面可能是由于唾液檢測試劑價格偏高(該檢測屬于自愿支付)，另一方面HIV感染高危人群如MSM對唾液檢測試劑結果還存在不信任態度[6]。本研究結果表明，與血液試劑檢測結果比較，唾液試劑靈敏度為97.9%，特異度為97.7%，和其他研究者的結果有一定差異，可能的原因一是本研究樣本量較小，雖然只有2例假陽性，1例假陰性，但對靈敏度和特異度的計算影響較大，二是本研究檢測出的49例陽性中有2例假陽性在試紙上顯示弱陽性，檢測區的指示線為淡紅色，為防止漏檢陽性將其判讀為陽性，在一定程度上間接影響了靈敏度和特異度。綜合本研究結果與相關文獻報道，可以認為唾液檢測試劑是一種比較可靠的HIV快速檢測試劑。

由于唾液檢測試劑具有無創、快速、無需特殊檢測場所、無需特殊檢測儀器、剩余樣本不必按生物危害樣本處理等優點，尤其適用于非血源性的個人檢測如老人、小孩、吸毒者等難于采集血樣的人群以及不必抽血檢測的人群的現場檢測，當唾液HIV抗體快速檢測試劑可以進入到家庭、娛樂場所、特殊高危人群等部分公共場所和個人生活環境時，可以更好地推進HIV預防工作開展，擴大HIV檢測覆蓋面，及時發現潛在的感染者。在擴大艾滋病檢測可及性的政策背景下，HIV快速檢測方法必將受到更多的關注。

[1] 劉楊, 黃薇, 孟建彤, 等.一種口腔滲出液中HIV抗體檢測試劑的 實驗研究[J].中國衛生檢驗雜志, 2012,2(7):1576-1577.

[2] 姜鳳云.艾滋病的流行趨勢及預防控制策略[J].中國醫藥指南，2012,10(34):470-471.

[3] 中國疾病預防控制中心. 2014年7月全國艾滋病性病疫情及主要防治工作進展[J]. 中國艾滋病性病,2014, 20(9):629.

[4] 張國磊, 姜影, 梁欣，等.HIV唾液快速檢測在公園場所MSM 人群中的應用[J].中國艾滋病性病,2013,19(4):261-263.

[5] 李曉娜, 鄭吉龍, 關一夫. 唾液中HIV抗體快速檢測診斷膠體金免疫層析試紙條的研制[J]. 遼寧師范大學學報, 2013,36(2):250-254.

[6] 許瑜楠，齊嘯，李東亮，等. 北京市男男性行為者HIV唾液快檢支付意愿調查[J]. 中國公共衛生,2013, 29(12):1721-1725.

R512.91；R446.62

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1000-744X(2016)02-0204-03

2015-05-20)

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