鄰苯二甲酸為背景吸收電解質的毛細管電泳法測定低分子量肝素中的陰離子

張明瑜, 康經武(生命有機化學國家重點實驗室, 中國科學院上海有機化學研究所, 上海 200032)

鄒漢法研究員紀念專輯(下)·研究論文

鄰苯二甲酸為背景吸收電解質的毛細管電泳法測定低分子量肝素中的陰離子

張明瑜, 康經武*
(生命有機化學國家重點實驗室, 中國科學院上海有機化學研究所, 上海 200032)

毛細管電泳;陰離子分析;低分子量肝素;穩定性監測

肝素是最早應用于臨床的生物大分子藥物之一,目前仍然被廣泛用于抗凝血、治療血栓栓塞性疾病以及心血管手術、心臟導管檢查、體外循環和血液透析等過程中儀器表面的抗凝處理。低分子量肝素(low molecular weight heparins,LMWHs)是由普通肝素(unfractioned heparin,UFH)通過物理化學或酶解的方法分級或解聚而得[1]。與UFH相比,LMWHs抗凝血作用更易預測,生物利用度更高,半衰期更長,清除率為非濃度依賴性[2],在臨床應用中更加方便且治療成本更低,LMWHs也因此成為制藥界和學術界的研究熱點。UFH和LMWHs主要通過糖鏈中一種特殊的五糖序列,即AGA*IA(A為GlcNAc6SO3或GlcNSO36SO3,G為GlcA,A*為GlcNSO33SO36SO3,I為IdoA2SO3;其中GlcN表示氨基葡萄糖,GlcA表示葡糖醛酸,IdoA表示艾杜糖醛酸,Ac表示乙酰化,SO3表示硫酸化,數字表示呋喃環上的取代位置)與抗凝血酶Ⅲ(antithrombin Ⅲ,ATⅢ)專一性結合而發揮抗凝血作用。同時,糖鏈與ATⅢ通過非專一性的靜電結合形成復合物對于肝素的抗凝血活性也具有非常重要的作用[3]。LMWHs糖鏈上硫酸化程度的改變會影響這兩方面的作用,進而影響其生物活性[3,4]。然而,UFH和LMWHs糖鏈上的硫酸基團并不穩定,在生產及儲存過程中易解離成游離的硫酸根[5,6]。……