BVDV P7蛋白的原核表達及其生物信息學分析

李田田，翟軍軍，倪宏波

（黑龍江八一農墾大學動物科技學院，大慶 163319）

BVDV P7蛋白的原核表達及其生物信息學分析

李田田，翟軍軍，倪宏波

（黑龍江八一農墾大學動物科技學院，大慶 163319）

為了對BVDV-1 P7蛋白進行原核表達及生物信息學分析，采用RT-PCR的方法擴增BVDV NADL株BVDV-1 P7的ORF，擴增產物經BamH I、Sal I雙酶切后插入原核表達載體pEGX4T-1（+），構建P7基因原核表達載體并將其轉化至工程菌E.coli BL21（DE3）中進行誘導表達，并對其進行生物信息學預測。結果表明，成功擴增并構建了BVDV NADL株的BVDV-1 P7原核表達載體，命名pEGX4T-1-P7。SDS-PAGE和Western blot表明，在分子質量34 kDa的位置出現與預期大小一致的蛋白條帶；生物信息學結果表明在P7蛋白有信號肽，存在疏水區。該研究成功的表達了P7蛋白，該蛋白是一個疏水性蛋白，為其進一步的功能研究奠定了堅實的基礎。

BVDV；P7基因；原核表達；生物信息學

牛病毒性腹瀉粘膜病病毒（Bovine Viral Diarrhea-mucosal Disease Virus，BVDV）是引起牛病毒性腹瀉粘膜病的病原。歐美牛體中普遍存在輕性或隱性感染，與豬瘟病毒（HCV）、羊邊界病病毒（BDV）具有同一種抗原有交叉反應，牛體中的抗體檢出率高[1]。BVDV可以感染綿羊、豬、駱駝、山羊和其他野生動物，宿主廣泛，其中牛的感染最多。是一種人畜共患病，近年來已經有報道。其臨床表現為發熱、母畜流產、胎兒畸形、咳嗽、腹瀉等癥狀，給養殖業帶來很大的損失[2]。

BVDV根據能否引起細胞病變分為兩種生物型：非致細胞病變型（NCP型）和致細胞病變型（CP型），雖然有明顯的抗原異質性和顯著的種間遺傳，但BVDV僅有一種血清型。BVDV為單股正鏈RNA病毒，有囊膜，基因組全長約12.3～12.5 kb，5’端無“帽子”結構?！?br>