癌癥干細胞特性及靶向治療進展

吳安琪，曙 光，王 晶，殷 剛 （中南大學湘雅基礎醫學院病理學系，湖南長沙410013）

·專家述評·

癌癥干細胞特性及靶向治療進展

吳安琪，曙 光，王 晶，殷 剛 （中南大學湘雅基礎醫學院病理學系，湖南長沙410013）

癌癥干細胞因其自我更新和治療抵抗等特性被認為是癌癥發生、發展、耐藥和復發的根本原因．癌癥干細胞的干性調控和耐藥性機制研究受到越來越廣泛的關注，同時一系列新研究證明了癌癥干細胞群體并非過去所認為的單一不變的群體，而是具有多樣性和可塑性．這一概念豐富了對癌癥干細胞的認識，為治療方案的研究提供了新的方法．本文將總結癌癥干細胞的重要特性，以及近年來基于干性調控通路開發的靶向治療臨床試驗中的成果和問題，展望其應用前景．

癌癥干細胞；自我更新與分化；耐藥性；靶向治療；多樣性與可塑性

0 引言

癌癥干細胞（cancer stem cells，CSCs）是指具有干細胞特征的癌細胞，能夠自我更新，并且產生異質性的腫瘤．有關CSCs的說法最早形成于白血病研究中，直接的證據來源于20世紀90年代，John Dick團隊在把白血病患者的外周血移植到非肥胖型糖尿病重癥聯合免疫缺陷（sever combined immune deficiency，SCID）小鼠身上后可誘發同類型白血病，同時發現外周血細胞的致瘤能力參差不齊，只有CD34＋CD38?亞群的細胞具有高致瘤能力，被認為富集了白血病始發細胞［1］．2003 年 Al?Hajj等［2］最早在實體腫瘤乳腺癌中分選出了一部分表達 CD24?／lowCD44＋Lineage?表面標志物的癌細胞亞群，即乳腺癌始發細胞，該群細胞具有高致瘤性，可以驅動腫瘤發生，并且由其長出的腫瘤依然具有異質性．隨后，通過相似的方法也相繼在其他多種實體腫瘤和癌癥細胞系中發現存在CSCs［3］．CSCs的發現與分離鑒定為腫瘤治療提供了新方向．

1 CSCs的自我更新與分化

通常認為CSCs具有與成體干細胞相似的自我更新與分化能力．自我更新是指親代細胞通過對稱或不對稱分裂產生的子細胞中至少有一個保留親代所有特征．其中不對稱分裂產生的子細胞部分或完全丟失親代干性，即為分化．基于CSCs與成體干細胞的相似性，有學者認為CSCs可能起源于成體干細胞．Tomasetti等［4］發現癌癥發生的風險與組織成體干細胞的分裂次數密切相關．DNA復制過程中伴隨著隨機突變的發生，導致干細胞以恒定的速率累積突變［5］，最終使干細胞發生癌變［6－7］．癌癥的發生發展被認為是一個漸變的過程，隨著癌細胞中驅動突變數目的累加，癌癥的惡性程度增強［8－9］．自我更新的特性有利于驅動突變在CSCs中累積，從而驅動腫瘤發展轉移．來自于腎癌、乳腺癌、肺癌等臨床樣本的分析也表明，CSCs的存在確實預示著預后不良［10－12］．

CSCs的分離與鑒定極大地促進了CSCs的機制研究．已有大量研究表明CSCs中存在一種或多種異常信號通路，調控著自我更新，研究較為透徹的有Wnt／β?catenin、Notch 和 Hedgehog［13－14］等，這些信號通路在胚胎發育和分化中起著重要作用，可能對CSCs的致瘤性至關重要，是阻礙CSCs自我更新、增殖和腫瘤發展的重要治療靶點．

1．1 Wnt信號 Wnt信號中的int1最早被當做原癌基因在小鼠中被鑒別出來，隨后的研究發現了更多的int1相關基因，組成Wnt家族．目前已表征的Wnt信號包括經典Wnt信號通路和非經典Wnt信號通路，其中經典Wnt信號通路又稱為Wnt／β?catenin通路，由Wnt配體結合到Frizzled家族受體后，導致β?catenin在胞質的累積，最終轉位到核內，作為TCF／LEF家族轉錄因子的轉錄性共激活子發揮作用，靶向激活包括干細胞表面標志物和增殖等基因，在胚胎發育、成體干細胞和CSCs的維持和調控中均起著重要作用［15］．在包括肺癌、胃癌、結腸癌和乳腺癌在內的多種CSCs均高表達Wnt信號［16］．而且多種用來鑒定和分離CSCs的表面標記物，例如 Lgr5、CD44、CD24 和EpCAM等都是Wnt的靶基因，而TCF受體、β?catenin、RSPO和BCL9都與Wnt活性有關［17］．增強或減弱Wnt信號水平不僅可以影響CSCs的比例，同時也可以影響CSCs的自我更新能力．研究表明LGR5通過激活Wnt／β?catenin調控乳腺癌CSCs自我更新和致瘤能力［18］．Wnt信號通路同時受自身以及壁龕中鄰近細胞旁分泌的Wnt配體和細胞因子等調控［17］．最近一項研究表明小鼠和人類肺腺癌中存在兩個不同的亞群細胞，具有高Wnt信號活性的Wnt反應細胞具有致瘤能力等干細胞特性，而另一群細胞提供Wnt配體形成壁龕．通過基因手段干擾Wnt產物或者信號，或者通過小分子抑制劑靶向Wnt的轉錄后修飾都可抑制腫瘤的增殖和發展［19］．Vermeulen 等［20］通過利用具有Wnt活性的報告子發現具有高水平Wnt活性的腸癌細胞也表達CSCs標志物，而且用來自于肌纖維細胞或／和干細胞生長因子的條件培養基可在體外和體內恢復低Wnt活性結腸癌細胞的克隆形成潛能．靶向Wnt信號通路有助于癌癥的治療，可是Wnt信號在對正常干／祖細胞和CSC的調控中是否存在不同仍需要進一步的研究．

1．2 Notch信號 Notch是一種單穿膜受體蛋白，Notch信號與Wnt信號相似，均為原始保守的細胞命運調控通路．當Notch受體胞外段與相鄰細胞表面配體結合后，可導致蛋白水解作用，釋放Notch受體胞內段，進入胞核與CBF1和Mastermind形成復合物，激活靶基因的轉錄［21］．異常激活的Notch信號與宮頸癌、肺癌、結腸癌、頭頸癌、腎癌、胰腺癌和T細胞白血病等多種惡性腫瘤的發生發展密切相關．但是在肝癌、皮膚癌和小細胞肺癌等某些腫瘤類型中，Notch信號又可導致細胞死亡抑制癌癥［22］．這種功能的差異受多種機制的調控，包括受體?配體 land?scapes、組織拓撲、胞核環境和調控網絡的聯接度［23］．不同于Notch在腫瘤中的復雜功能，現有的研究大多表明Notch激活可促進CSCs的自我更新和生存．上游可致癌的刺激激活Notch通路以及微環境中存在的信號都可刺激CSCs擴增并促進腫瘤發展，相反Notch信號減少導致祖細胞群減少和分化增加［24］．Notch信號受體在結腸癌CSCs中表達量是常用結腸癌細胞系的10～30倍，以shRNA和小分子抑制劑敲除Notch后，p27和ATOH1表達量增加，誘導細胞凋亡，同時Notch也抑制了細胞系譜分化基因MUC2的分泌，維持CSCs的自我更新［25］．在乳腺癌CSCs群中Notch4信號是分化細胞的8倍，而CSCs群中Notch1信號較分化細胞低了4倍，通過藥物或者遺傳手段抑制Notch1或Notch4可導致干性和腫瘤形成能力下降，抑制Notch4后可導致腫瘤發生能力的徹底喪失［26］．在肝癌CSCs中發現了Notch2的激活，活化的Notch信號起著維持CSCs干性的作用［27］．卵巢癌研究中發現 microRNA?136不僅可通過 Notch3抑制CSCs活性，而且可以增強紫杉醇的抗腫瘤效應［28］．

1．3 Hedgehog 信號 Hedgehog（Hh）為高度保守的通路，在自我更新和細胞命運決定中起重要作用．異常的Hh信號與發育、多種癌癥的發生發展以及CSCs的維持均有關［29－30］．經典的 Hh 配體有三種：Sonic（Shh）、Desert（Dhh）和 Indian（Ihh），可結合受體復合物Patched（PTCH1和 PTCH2），解除 PTCH 介導的Smoothened（SMO）抑制．SMO可驅動信號級聯導致胞核glioma相關原癌基因轉錄因子（GLI1，GLI2，GLI3）轉位和激活．GLI可根據環境激活特定的調控自我更新、細胞命運、存活、血管生成、上皮間質轉化和細胞侵襲的基因．作為 Hh轉錄靶標，GLI1和PTCH形成反饋循環調控Hh信號［30］．Hh信號可通過破壞干性決定基因驅動CSCs表型，Nanog作為決定胚胎干細胞自我更新和分化的體細胞多能重編程的重要的轉錄因子，是Hh信號通路的直接轉錄靶標．而且Hh信號通過驅動干性調控基因（例如Oct4、Sox2和 Bmi1）的表達維持了多種癌癥的干性標志［29］．Hh信號驅動了肺癌、乳腺癌、胰腺癌、結腸癌、膠質瘤、多發性骨髓瘤和慢性髓系白血病中的CSCs維持．這些腫瘤中Hh信號選擇性地在CSCs中活化，通過調控CSCs標志物乙醛脫氫酶、BMI1、WNT2和CD44直接驅動了CSCs表型．臨床前期研究表明多種腫瘤CSCs都對Hh通路抑制劑敏感，靶向Hh治療可阻斷CSCs引起的耐藥性、復發和轉移［30］．Clement等［31］發現 Hh?Gli信號調控了 CD133＋膠質瘤 CSCs的自我更新和干性基因的表達．通過環巴胺或者慢病毒介導的沉默干擾Hh?Gli信號結果強調了Hh?Gli信號是腫瘤發生所必須的．Shh通路在胰腺癌CSCs中高度活化，并且在調控干性基因表達和維持干性中起重要作用，其效應可通過萊菔硫素（sulforaphane，SFN）所阻斷［32－33］．甲狀腺未分化癌細胞系中，抑制Shh通路導致CSCs自我更新降低，放療敏感性增強；反之，過表達Gli1導致微球形成增加，CSC擴增和放療抵抗增加［34］．

2 CSC的耐藥機制

在過去的半個世紀中，化療和放療是臨床腫瘤科的標準護理手段，可顯著減少腫瘤負荷，提高生存率．不足之處是復發率較高，且有部分患者對治療不敏感．越來越多的證據表明白血病和實體腫瘤CSCs固有的或者獲得的臨床治療抵抗導致了復發．CSCs與分化的癌細胞相比，對化療和放療都更加耐受，因此放療和化療導致了腫瘤的縮小和 CSCs的富集［35］．CSCs產生治療抵抗機制在近十年內得到了越來越多的關注和研究．

2．1 主動泵出藥物 CSCs表面存在轉運蛋白可主動排出化學藥物，被認為是CSCs耐藥機制之一．ABC轉運蛋白是一組跨膜蛋白，可利用ATP水解能量，逆濃度方向將一系列化合物轉運通過膜結構［36］．干細胞和CSC與分化細胞相比，高表達特定ABC轉運蛋白來排出細胞毒性藥物，增強生存能力．早期干細胞分離方法就利用了這一特性，將能夠排出Hoechest33342染料的細胞通過流式細胞儀分選出來，命名為側群細胞（side population，SP）．對23個成神經細胞瘤臨床樣本的分析顯示，65%腫瘤中可檢測到SP，這些細胞可持續增長，也可進行不對稱分裂，產生SP和非SP，高表達ABCG2和ABCA3轉運蛋白基因，并且可有效排出米托蒽醌等細胞毒性藥物．在乳腺癌、肺癌、膠質瘤細胞系也可檢測到SP［37］．因此，靶向ABC轉運蛋白可能降低化療耐藥性，但是不幸的是，之前三代抑制劑的開發都以失敗告終，其原因可能是藥代動力學的相互作用或者存在其他的轉運蛋白［38］．Snider 等［36］利用酵母雙雜交技術描繪了19個非線粒體ABC轉運蛋白的相互作用路線圖和機理，揭示ABC轉運蛋白與涉及多種細胞過程的蛋白相關，該研究結果將有助于研發更具有針對性的治療癌癥的藥物．其他轉運蛋白，例如MDR?1的表達可見于晚期白血病CSCs［39］，也具有將藥物排出細胞的能力，而OCT?1則作用于藥物的攝入［40］．

2．2 高效修復 離子放射中產生的自由基可導致DNA損傷，CSCs中有著高效修復機制，可能是導致放療抵抗的原因之一．乳腺癌CSCs高表達自由基清掃系統基因，從而使CSCs中活性氧（reactive oxygen species，ROS）保持在低水平并避免DNA損傷，通過藥物抑制CSCs中ROS清除系統以后，其克隆形成能力和放療抵抗降低［39］．在膠質瘤中，CSCs可優先激活DNA損傷檢查點，更快地修復DNA損傷，避免離子放射誘導的凋亡．通過藥物抑制檢查點激酶CHK1和CHK2也可使 CSCs增加對放療的敏感性［41］．因此，與DNA修復相關的機制可能介導了放療抵抗．

除上述重要機制外，干細胞沉默、壁龕中細胞因子作用、細胞?細胞相互作用和上調生存相關信號分子等機制也與治療抵抗相關，其中部分機制將在下文涉及．值得注意的是，盡管CSCs表現出高水平ABC轉運蛋白等，構成CSCs的特性之一，但ABC轉運蛋白并不直接調控干性，通過靶向轉運蛋白可幫助消除CSCs，但是目前尚不明確靶向轉運蛋白能否消除所有CSCs，否則有效地縮小腫瘤負荷后仍有可能復發．前文述及的靶向CSCs干性調控機制的藥物，理論上可減少甚至徹底消滅CSCs，從而增強腫瘤組織對治療的敏感性．但是，最新研究發現，當選擇性地去掉lgr5＋結腸癌癥干細胞后，并沒有觀察到預期中的腫瘤退化，而且在停止處理后lgr5?細胞能快速補充丟失的 lgr5＋細胞［42－43］．鑒于之前另一項系譜跟蹤實驗已對lgr5＋細胞的干細胞特性進行了驗證［44］，研究者推測可能存在儲備CSCs或者說其他癌細胞可逆轉為CSCs來代償干細胞的丟失．這一結果提示CSCs多樣性、可塑性等問題在腫瘤治療中不可忽視．

3 CSCs的多樣性與可塑性

傳統的CSCs理論認為組織中只存在一小部分CSCs，這一小撮細胞通過自我更新和分化驅動腫瘤發生發展并維持腫瘤的生長，層級內進行單向分化．隨著研究的深入，現在的理論認為同一腫瘤內可能存在著多種CSCs，CSCs之間以及CSCs和非CSCs之間的轉化，即CSCs多樣性和可塑性．兩者并不矛盾，可能為截取某一時間和空間層面對同一個體的研究結果．

3．1 CSCs的多樣性 系譜追蹤實驗在小腸上皮中鑒定出了兩種干細胞，一種為主要存在于基底隱窩的柱狀細胞，表達lgr5且細胞周期循環快［45］；另一種主要存在于基底隱窩以上且表達Bmi1［46］．選擇性地殺死lgr5＋細胞后并未擾亂腸上皮的平衡，同時Bmi1＋細胞產生子代增多來代償lgr5＋細胞的缺失．系譜追蹤也顯示Bmi1＋細胞可產生lgr5＋細胞，說明Bmi1可能代表了儲備干細胞，可作為補充lgr5＋細胞的來源［47］．如前文所述Lgr5＋CSCs已經證明是腫瘤轉移所必須的，但是腫瘤的維持卻是非必須的［42］，結腸癌中很可能與小腸上皮類似，也存在兩種 CSCs．研究表明Bmi1過表達被發現廣泛存在于胃腸道癌，與臨床預后相關［48］，但是Bmi1是否標記了一群不同于lgr5的結腸癌CSCs，并且能夠補充lgr5＋CSCs仍有待進一步驗證．

乳腺癌研究提供了CSCs多樣性的直接證據．CD24?CD44＋和ALDH＋是富集乳腺癌癥干細胞最常用的兩種標志物［2，49］．Liu 等［50］對乳腺癌組織的研究表明用CD24?CD44＋和 ALDH＋標識的癌癥干細胞在空間上并不完全重合，屬于不同的細胞亞群．CD24?CD44＋標識的是上皮向間質轉化態癌癥干細胞，這些細胞一般處于靜止期，通常位于癌組織的侵襲前沿，而ALDH＋標識的是間質向上皮轉化態的癌癥干細胞，這些細胞一般處于擴增期，通常位于癌組織的中間部位，兩者可相互轉化．另一些研究也支持了腫瘤中存在多種CSCs的猜想，Hermann等［51］發現胰腺癌中CD133＋CXCR4＋細胞是腫瘤轉移所必須的，去除這一群細胞即可特異性地抑制腫瘤細胞轉移，卻不影響腫瘤細胞的致瘤能力，說明胰腺癌中存在不同的CSCs細胞群分別具有轉移性和致瘤性．Wang等［52］也發現分別通過CD133和HCBP?1在H460腫瘤微球中鑒別的CSCs之間只存在極少的一部分重疊．其他多種類型腫瘤研究中也報道過不同CSCs標記物的使用，這些標志物是否標記了同一群細胞，不同標記的CSCs功能有無異同以及彼此之間的關系仍需要進一步的研究．

3．2 CSCs可塑性 另一種類型的轉化也有報道．Weinberg團隊發現乳腺癌細胞在體外和體內條件下均可自發地轉化產生富有侵襲性的CSCs［53］．Gupta等［54］也觀察到乳腺癌中非CSCs和CSCs細胞群之間可相互轉化，快速地達到一定的平衡比例．Roesch等［55］發現 H3K4去甲基酶（JARID1B）可調控黑色素瘤細胞系的致瘤性，JARID1B?細胞可轉變為 JAR?ID1B＋并且獲得自我更新能力．Auffinger等［56］發現化療也可誘導黑色素瘤模型中已分化癌細胞轉化為CSCs樣細胞．這一系列的研究結果說明腫瘤層級中不僅存在多種CSCs，還存在著雙向分化．一般情況下雙向分化中的去分化發生率很低，特定因素可顯著促進去分化的發生，代償CSCs的不足．

CSCs多樣性和可塑性特征對不同腫瘤的治療影響深遠．在同一個腫瘤中可能存在著多種CSCs，特異性地針對一群CSCs治療可能產生篩選效應，或者喚醒沉默的CSCs開始增殖，導致停藥后發生高效轉化，同時代償前期治療中丟失的CSCs，最終產生復發和轉移．同時靶向腫瘤中存在的多種CSCs或者阻斷CSCs可能的所有來源，可能治愈癌癥并防止復發．值得注意的是，不同的腫瘤類型中，甚至來源于不同患者的同種腫瘤中存在的CSCs類型比例以及可塑性可能存在差異，今后可能需要結合大規模篩選和精準醫療進一步優化腫瘤的治療方案．

4 CSCs微環境調控CSCs命運

CSCs存在于特定壁龕環境中，有助于維持CSCs的基本特性，保持表型可塑性，促進轉移潛能［57］．腫瘤微環境中包括了多種細胞和非細胞成分，多種因素都被證明與CSCs命運調控相關．已知可促進去分化的因素包括了重構的細胞外基質、來自多種微環境細胞的分泌信號以及細胞?細胞相互作用等．

基質細胞中的腫瘤相關纖維細胞被證明與多種腫瘤的發展密切相關，其促癌作用可能是通過對CSCs的調控．胰腺癌模型中星形細胞（肌纖維細胞）分泌因子可誘導干細胞樣或間充質樣命運相關基因表達，促進CSCs表型［58－59］．結腸癌體內體外模型中，肌纖維細胞分泌的肝細胞生長因子可使癌細胞上調Wnt通路，恢復 CSCs樣表型［60］．

癌癥組織中通常存在著不同程度的炎癥細胞浸潤，巨噬細胞和T細胞等可分泌多種炎癥因子，調控CSCs命運．IL?6可由腫瘤微環境中多種免疫細胞分泌，IL?6可使多種乳腺癌和前列腺癌細胞系中的非CSCs轉化為CSCs［61］，也可通過激活腫瘤相關纖維細胞，誘導前列腺癌發生 EMT增加干性［62］．CD4＋T細胞可分泌IL?22，作用于癌細胞，激活STAT3和甲基轉移酶DOT1L，誘導核心干細胞基因NANOG、SOX2和Pou5F1，導致結腸癌細胞干性和致瘤能力增加［63］．卵巢癌 CSCs壁龕細胞產生 IL?17，可促進 CD133＋CSCs的微球形成能力和致瘤能力，基因表達譜分析表明IL?17通過 NF?κB和 p38分裂刺激蛋白激酶（mitogen activited protein kinase，MAPK）信號通路促進自我更新［64］．

某些實體腫瘤中CSCs傾向于存在血管旁，鄰近內皮細胞［65］．在膠質瘤體外培養模型中，來自內皮細胞的條件培養基可誘導分化的膠質瘤細胞去分化為CSCs，其中基礎型纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）即可誘導分化的膠質瘤細胞重新表達CSCs標志物，并使其微球形成能力增加［66］．最近的研究表明通過下調腫瘤相關內皮細胞中腫瘤抑制因子／檢查點胰島素樣生長因子結合蛋白?7（insulin?like growth factor?binding protein 7， IGFBP7）和上調胰島素樣生長因子1（insulin?like growth factor 1，IGF1），可使內皮細胞異常激活FGFR1?EST2通路，從而使多種腫瘤中的惰性腫瘤細胞獲得癌癥干細胞樣活性［67］．與之相反的是，Heddleston 等［68］發現低氧也可使非CSCs細胞的微球形成能力增加并且上調重要的干細胞因子，在非CSCs細胞中強制表達不可降解的HIF2a后可誘導CSCs標志物，并且增強致瘤能力．這種矛盾可能代表了腫瘤發展不同時期對微環境需求不同．

上述研究對CSCs理論進行了擴充，為靶向CSCs的治療研發提供了新的方向．Verastem公司研發的Defactinib是一個FAK抑制劑，FAK是由PTK?2基因編碼的非受體酪氨酸激酶，在多種腫瘤中高表達，對CSCs的存活和致瘤能力至關重要．Defactinib可通過調節腫瘤微環境，增強抗腫瘤免疫能力以及減少CSCs來達到治療癌癥的目的．該藥在單藥給予KRAS突變非小細胞肺癌患者和聯合紫杉醇給予復發性卵巢癌患者的耐受性臨床試驗中已經初步顯示有效，目前已開始胰腺癌、非小細胞肺癌、卵巢癌和間皮瘤的聯合治療臨床試驗［69］．由Dompé公司研發的一種用于治療移植排斥反應的藥物reparixin被證明可通過作用于CSCs上的IL?8受體CXCR1，抑制IL?8造成的炎癥反應來影響CSCs的復制．前期實驗證明reparixin在體外體內實驗中都可減少 CSCs細胞群［70］．目前該藥正在治療三陰乳腺癌的二期臨床（fRida）評估中．

5 靶向CSCs藥物的臨床實驗進展

20世紀末，美國國家癌癥研究所和部分制藥公司已經開始將靶向重要干細胞活化信號通路的藥物投入臨床先驅試驗．

OncoMed 公司研發的 vantictumab（ANTI?FZD，OMP?18R5）和 ipafricept（FZD8?FC，OMP?54F28），為選擇性的 Wnt抑制劑，靶向 Wnt信號通路．Vantic?tumab可結合Fzd受體保守抗原的胞外段，從而抑制多個Wnt家族成員誘導的Wnt信號．臨床前試驗中Vantictumab可減少CSCs頻率，誘導細胞從高致瘤性向低致瘤性分化，并且使患者對傳統化療更加敏感［71］．Vantictumab作為第一個進入臨床試驗的抑制Wnt信號通路的單克隆抗體，聯合化療藥物治療Her2陰性乳腺癌和晚期胰腺癌后均顯示出良好的耐受性和抗腫瘤活性［72－73］．Ipafricept是一種融合蛋白，包含了來自Wnt通路的Frizzled 8受體的一部分以及人IgG1的Fc域，可選擇性結合激活Wnt信號的配體［74］．在聯合化療藥物治療胰腺癌和卵巢癌的臨床Ib 期也展現了可觀的抗腫瘤活性［75－76］．

該公司進行臨床試驗的候選藥物中還有靶向Notch信號通路的．Navicixizumab可同時特異性拮抗Delta 樣配體4（delta?like ligand 4， DLL4）和血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor， VEGF）［77］，該藥在臨床Ia期試驗中顯示出單藥抗腫瘤活性，目前已進入臨床 Ib期研究［78］；brontictuzumab可拮抗Notch1，在某些晚期腫瘤中顯示出抗腫瘤活性，尤其是針對過表達活化Notch1的腫瘤［79］，已開始了臨床Ib期的招募．

Notch信號通路中進入臨床試驗的另一個候選藥為γ分泌酶抑制劑（gamma secretase inhibitor，GSI）．默克公司研發的MK?0752原被用于治療阿爾茨海默病和多種惡性腫瘤，被發現可通過抑制γ分泌酶來抑制Notch胞內段的激活，從而抑制Notch下游基因的表達［80］．臨床前期和臨床I期試驗結果顯示MK?0752聯合多西他賽治療晚期乳腺癌后，腫瘤中的CD44＋CD24?細胞亞群和 ALDH＋細胞亞群減少，腫瘤細胞的微球形成率也降低，提示可有效地針對CSCs起作用．作為第一個測試GSI與化療藥物聯合治療的臨床實驗，該結果支持繼續對其進行臨床研究［80］．

Hedgehog信號通路的小分子抑制劑GDC?0449，又稱vismodegib，于2012已經獲得FDA批準用于治療基底細胞癌．基底細胞癌中所有細胞Hedgehog信號通路均存在異常，而胰腺癌中CSCs也有較高的Hedgehog信號，為明確vismodegib能否對為數不多的CSCs起作用，研究者設計了一項結合吉西他濱聯合治療轉移性胰腺癌的臨床試點試驗，試驗結果雖然顯示大部分患者的Gli1和PTCH1均有顯著下降，但是CSCs群未觀察到明顯改變［81］．

通過調控Wnt、Notch和Hedgehog信號通路來靶向CSCs有希望預防癌癥復發，但是研發這些試劑的過程充滿挑戰．部分候選藥因為沒有達到預期結果而終止了研發．因為上述信號通路同樣存在于正常組織的干細胞中，受試藥通常會引起嚴重不良反應，在不良反應可控的情況下，大規模研究表明這些藥物對大多數的癌癥沒有明顯療效［82］．另外信號通路也不是孤立的起作用的，而是作為一個協調的網絡運作．鑒定并且靶向信號通路中的關鍵節點或者多通路抑制可能得到更好的效果．

6 結語

癌癥干細胞作為腫瘤發展、維持、轉移、耐藥和復發的根源，成功地靶向癌癥干細胞治療有望徹底治愈癌癥，成為癌癥治療上的里程碑．靶向癌癥干細胞藥物聯合化療藥物，理論上可為癌癥問題帶來解決方法，可是直到目前，尚無大規模患者受益的臨床試驗數據，多項臨床實驗止步三期，但這并不意味著靶向癌癥干細胞的策略錯誤．結合癌癥干細胞多樣性與可塑性研究結果，對癌癥組織中存在的多種癌癥干細胞的全面鑒定以及阻斷癌癥干細胞的其他來源，可能是通過靶向癌癥干細胞治愈癌癥的前提．另外值得注意的是，不同的癌癥組織中，癌癥干細胞種類組成可能不同，這意味著癌癥也可能需要個體化治療．

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Progress on cancer stem cell features and targeted treatment

WU An?Qi， SHU Guang， WANG Jing， YIN Gang
Department of Pathology， School of Basic Medicine， Central South University， Changsha 410013， China

Cancer stem cells were thought to be responsible for the tumor initiation， progression， drug resistance and relapse because of their abilities of self?renewal and treatment resistance．There are more and more studies focus on their regulation mecha?nism of self?renewal and drug?resistance， and a series of studies showed that the cancer stem cell population may not be a single stasis population but they are diverse and malleable．This notion enriches the knowledge of cancer stem cells，can provide new approaches for the development of treatment．The current review summarized the key features of cancer stem cells，the results and problems of clinical trial through targeted treatment based on the interfering of stemness regulation pathways，and discussed the prospects of cancer stem cells．

cancer stem cell； self?renewal and differentiation；drug resistance； target treatment； diversity and plasticity

R73

A

2095?6894（2017）09?01?08

2017－05－05；接受日期：2017－05－18

國家自然基金面上項目（81572900）

吳安琪．博士．研究方向：乳腺癌和卵巢癌干細胞．E?mail：wu＿anqi＠ qq．com

殷 剛．研究員，博導．研究方向：卵巢癌干細胞和microRNA．E?mail：gang．yin＠ csu．edu．cn