兩種鼠血清與兩種培養(yǎng)基對PK15細胞培養(yǎng)的比較

肖兵南，高中文，李劍鋒，蔣小文

（1湖南民康生物技術研究所，湖南長沙410022；2.湖南省寧鄉(xiāng)縣畜產品檢測中心，湖南寧鄉(xiāng)410600）

兩種鼠血清與兩種培養(yǎng)基對PK15細胞培養(yǎng)的比較

肖兵南1，高中文1，李劍鋒2，蔣小文1

（1湖南民康生物技術研究所，湖南長沙410022；2.湖南省寧鄉(xiāng)縣畜產品檢測中心，湖南寧鄉(xiāng)410600）

為比較研究DMEM培養(yǎng)基和RPM I-1640培養(yǎng)基對PK15細胞的培養(yǎng)效果，選擇效果好的作為基礎培養(yǎng)基，用大鼠血清和小鼠血清分別以不同量添加進行培養(yǎng)，用細胞顯微病變（CPE）觀察法和四甲基偶氮唑鹽(MTT)測定法測定其對細胞生長的影響，為血藥試驗選擇試驗動物提供依據。結果表明：DMEM培養(yǎng)基較RPM I-1640培養(yǎng)基對PK15細胞的培養(yǎng)效果好，加5％大鼠血清或2.5％小鼠血清配制DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)，對PK15細胞的培養(yǎng)生長無副作用，即兩種血清的無毒安全濃度分別為5％和2.5％。

鼠血清；培養(yǎng)基；DMEM；RPM I-1640；PK15細胞；培養(yǎng)

用含藥血清進行體外試驗時,經常會遇到選擇何種試驗動物的問題，原則上首先要使體外培養(yǎng)細胞在該種動物血清中生長良好、形態(tài)正常,對照組血清質量穩(wěn)定,并且血清添加量能夠比較高[1]。豬腎上皮細胞PK15，來源于豬腎，正常的細胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長。PK15細胞對多種病毒比較敏感，如豬圓環(huán)病毒（PCV）、豬細小病毒（PPV）、豬瘟病毒（CSFV）等，可應用于豬圓環(huán)病毒疫苗、豬細小病毒疫苗、豬瘟病毒疫苗等的制備，在科研中被廣泛使用，其優(yōu)點是它的遺傳穩(wěn)定，營養(yǎng)要求較低，可使用多種培養(yǎng)基，易培養(yǎng)、易保存[2,3]。為此，本試驗選用無血清培養(yǎng)基DMEM和RPMI-1640對PK15細胞作比較培養(yǎng)試驗，篩選出效果好的作基礎培養(yǎng)基，再添加大鼠和小鼠兩種常用試驗動物的血清，配制不同濃度的鼠血清培養(yǎng)基對PK15進行培養(yǎng)試驗，測定其對PK15細胞生長的影響，為血藥試驗選擇試驗動物提供依據。……