濱蒿化學成分研究

麥爾旦·吐爾遜麥麥提 王琳琳 胡 旭 徐 芳 黃 華 趙 軍*

1.新疆醫科大學藥學院，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆藥物研究所維吾爾藥重點實驗室,新疆 烏魯木齊 830004

?

濱蒿化學成分研究

麥爾旦·吐爾遜麥麥提1王琳琳2胡 旭2徐 芳2黃 華2趙 軍2*

1.新疆醫科大學藥學院，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆藥物研究所維吾爾藥重點實驗室,新疆 烏魯木齊 830004

目的: 對濱蒿的化學成分進行研究。方法：采用硅膠、反相硅膠和Sphadex LH-20等色譜技術分離純化濱蒿中的化學成分，通過波譜技術結合理化性質鑒定化合物的結構。結果：從濱蒿中分離純化出4個單體化合物，分別鑒定為：4,5-O-二咖啡酰基奎尼酸(1)、3,4-O-二咖啡酰基奎尼酸(2)、3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸(3)和4′-羥基漢黃芩素(4)。結論：4個單體化合物均為首次從該植物分離得到，為濱蒿的進一步開發利用提供參考。

濱蒿；化學成分；咖啡酰奎尼酸

濱蒿又名豬毛蒿、山茵陳等，為菊科蒿屬植物一年或兩年生草本植物豬毛蒿ArtemisiascopariaWaldst. et Kit.的干燥全草，在我國各地均有分布[1]。收載于《中國藥典》[2]等中醫藥文獻中，具有清熱解毒、利膽退黃、化痰開竅、清濕熱等功效。研究發現，濱蒿化學成分包括黃酮、香豆素、有機酸等，具有抗炎、抗病毒和免疫調節等多種生物活性[3-5]。前期采用大孔樹脂和聚酰胺樹脂聯用的方法，對富含黃酮及酚酸的有效部位進行了富集純化，發現其具有較好的抗炎抗病毒活性[6-7]。為了進一步開發濱蒿藥用資源，筆者在有效部位研究及文獻調研基礎上，采用反相硅膠和Sephadex LH-20等色譜技術對該有效部位進行了系統的化學成分研究,現總結如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 VARIAN INOVA-400型超導核磁共振波譜儀(美國VARIAN公司)；WHF-203B暗箱式紫外分析儀(上海精科實業有限公司)。

1.2 材料 柱色譜及薄層色譜用硅膠(青島海洋化工廠)；聚酰胺樹脂(30～60目，浙江臺州四甲生化材料廠)；ODS RP-18(日本YMC公司)；Sephadex LH-20(瑞典Amersham Pharmacia Biotech AB公司)；所用其它試劑均為國產分析純。

藥材于2014年7月采自新疆烏魯木齊六道灣，由新疆藥物研究所何江副研究員鑒定為濱蒿ArtemisiascopariaWaldst. et Kit.的全草。

2 方法與結果

2.1 提取分離 濱蒿藥材10.0kg，以10倍量50%乙醇回流提取3次，每次1h，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，浸膏以水混懸后，上D101大孔吸附樹脂，先以10倍柱體積水洗脫除雜，再以70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓濃縮至無醇味后，上聚酰胺樹脂柱，以10倍柱體積水洗脫除雜后，再以70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓濃縮，真空干燥，得濱蒿有效部位。取濱蒿有效部位50.0 g，適量甲醇溶解上ODS RP-18柱后，以水:甲醇(0∶1～1∶1)梯度洗脫，其中第13～25流份減壓濃縮后，再經ODS RP-18和Sephadex LH-20反復柱層析，得到化合物1(575.0 mg)、2(109.7 mg)和3(85.4 mg)；第56～58流份經反復Sephadex LH-20柱層析，得到化合物4(16.7 mg)。

2.2 結構鑒定

2.2.1 化合物1 灰白色粉末，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色呈墨綠色；1H-NMR(DMSO -d6, 400MHz)δ: 7.47(1H,d,J= 16.0 Hz,H-7′), 7.53(1H, d,J=16.0 Hz, H-7′′), 7.03(1H, brs, H-2′), 7.06(1H, brs, H-2′′), 7.00 (H, m,H-6′), 7.02 (H, m,H-6′′), 6.79 (2H,d,J=8.0 Hz,H-5′, H-5"), 6.19(1H,d,J=16.0 Hz,H-8'), 6.29(1H,d,J= 16.0 Hz, H-8′′), 5.39(1H, brs, H-5), 5.00(1H, d,J= 8.0 Hz, H-4), 4.21(1H, brs, H-3), 2.20(2H,m, H-2a,6a), 2.06(1H, m, H-6b), 1.92(1H, m, H-2b)；13C-NMR(DMSO-d6, 100MHz)δ: 175.0(C-7), 166.2(C-9′), 165.8(C-9′′), 148.7(C-4′,4′′), 145.8(C-7′,7′′), 145.7 (C-3′,3′′), 125.6(C-1′,l′′), 121.7(C-6′), 121.6(C-6′′), 116.0(C-5′,5′′), 115.1(C-8′,8′′), 114.1(C-2′), 113.8(C-2′′), 73.8(C-1), 73.7(C-4), 67.9(C-3), 66.1 (C-5), 37.7(C-6), 36.9(C-2)。以上數據經分析，與文獻[8]報道相一致，鑒定該化合物為(4,5-O-二咖啡酰基奎尼酸4,5-O- dicaffeoylquinic acid)。

2.2.2 化合物2 灰白色粉末，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色呈墨綠色；1H-NMR(DMSO -d6, 400 MHz)δ: 7.41(1H, d,J= 16.0 Hz,H-7′), 7.47(1H, d,J=16.0 Hz, H-7′′), 7.03(1H, brs, H-2′), 7.05(1H, brs, H-2′′), 6.98 (H, m,H-6′), 7.00 (H, m,H-6′′),6.76 (2H,d,J=8.0 Hz,H-5′,5"), 6.17(1H,d,J=16.0 Hz,H-8'), 6.24(1H,d,J=16.0 Hz, H-8′′), 5.34(1H, brs, H-3), 5.17(1H, d,J= 8.0Hz, H-4), 4.12(1H, brs, H-5), 2.16(1H,m, H-2a), 2.13(1H, m, H-6a), 1.98(1H, m, H-6b), 1.94(1H, m, H-2b)；13C-NMR(DMSO-d6, 100 MHz)δ: 175.6(C-7), 166.3(C-9′), 165.8(C-9′′), 148.6(C-4′), 148.5 (C-4′′), 145.8(C-7′,7′′), 145.4(C-3′), 145.0(C-3′′), 125.8(C-1′,l′′), 121.6(C-6′), 121.4 (C-6′′), 116.0 (C-5′,5′′), 115.1 (C-8′,8′′), 115.0 (C-2′), 114.3(C-2′′), 72.4 (C-1), 72.7(C -4), 70.7 (C-5), 71.1(C-3), 36.1(C-6), 34.6(C-2)。以上數據經分析，與文獻[8]報道相一致，鑒定該化合物為(3,4-O-二咖啡酰基奎尼酸3,4-O-di caffeoylquinic acid)。

2.2.3 化合物3 灰白色粉末，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色呈墨綠色；1H-NMR(DMSO-dM6, 400 MHz)δ: 7.48(1H,d,J= 16.0 Hz,H-7′), 7.46(1H, d,J=16.0 Hz, H-7′′), 7.06(1H, brs, H-2′), 7.03(1H, brs, H-2′′), 6.97 (2H, m,H-6′,6′′), 6.76 (2H,d,J=8.0 Hz,H-5′, H-5"), 6.35(1H,d,J=16.0 Hz,H-8'), 6.16(1H,d,J= 16.0 Hz, H-8′′), 5.30(1H, brs, H-5), 3.71(1H, d,J= 8.0Hz, H-4), 5.15(1H, brs, H-3), 1.89(2H,m, H-2a,2b), 2.11(1H, m, H-2a), 1.76(1H, m, H-6a)；13C-NMR(DMSO-d6, 100 MHz)δ: 177.7(C-7), 166.7(C-9′), 165.4(C-9′′), 148.6(C-4′), 148.5(C-4′′), 145.9(C-7′,7′′), 145.9 (C-3′), 144.7(C-3′′), 125.9(C-1′), 125.8(C-l′′), 121.5(C-6′), 121.2 (C-6′′), 116.1 (C-5′), 116.0(C-5′′), 115.4 (C-8′), 115.0 (C-8′′), 114.9 (C-2′), 114.8(C-2′′), 73.6 (C-1), 73.0(C -4), 71.6 (C-5), 70.7 (C-3), 36.7(C-2,6)。以上數據經分析，與文獻[9]報道相一致，鑒定該化合物為3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸(3,5-O-dicaffeoylquinic acid)。

2.2.4 化合物4 淡黃色粉末，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色呈黃綠色，10%硫酸乙醇溶液顯色呈黃色；1H-NMR(DMSO-d6, 400MHz)δ: 13.08(1H, s, 5-OH), 10.72 (1H, s, 7-OH), 10.38 (1H, s, 4′-OH), 7.93(2H, d,J= 8.0 Hz, H-2′,6′), 6.92(2H, dd,J=8.0 Hz, H-3′,5′), 6.79(1H, s, H-3), 6.59 (3H, s, H-6), 3.75 (3H, s, 8-OCH3)；13C-NMR(DMSO-d6, 100MHz)δ: 164.0(C-2), 102.6(C-3), 183.4(C-4), 157.5(C-5), 94.5(C-6), 153.0(C-7), 131.6(C-8), 152.6(C-9), 104.3(C-10), 121.4(C-1′), 128.7 (C-2′,6′), 161.4(C-4′),116.2(C-3′,5′), 60.2(8-OCH3)。上述波譜數據及理化數據經分析，與文獻[10]基本一致，鑒定該化合物為4′-羥基漢黃芩素(4′-hydroxywogonin)。

3 討論

作為常用的一種藥材，濱蒿的化學成分及生物活性已被多篇文獻所報道。筆者進一步從該藥材分離純化得到了3個咖啡酰奎尼酸類成分和1個黃酮類成分，這些成分均為首次從該植物中分離得到。咖啡酰奎尼酸類成分具有良好的抗菌抗病毒等生物活性[11]，已成為近年來天然藥物研究的熱點化合物。研究結果對于濱蒿藥效物質基礎的揭示以及進一步的開發應用具有重要的意義。

[1]中國植物志編輯委員會.中國植物志(第76卷)[M].北京：科學出版社. 1991.

[2]國家藥典委員會.中國人民共和國藥典(一部)[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010:223.

[3]張啟偉,張永欣,張穎. 濱蒿化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志,2002, 27(3): 202-204.

[4]羅群會,王乃利,劉宏偉. 濱蒿的化學成分[J].沈陽藥科大學學報,2006, 23(8): 492-494.

[5]史銀基,司麗君,劉燕,等. 濱蒿總黃酮抗炎、鎮咳、解熱作用的實驗研究[J].新疆醫科大學學報,2015,38(5):574-577.

[6]王玉梅,王林林,姚華,等.濱蒿抗流感病毒活性部位的篩選[J].時珍國醫國藥,2011,22(4):799-800.

[7]王玉梅,王雪,劉燕,等.濱蒿總黃酮對小鼠免疫功能的影響[J].西北藥學雜志,2011,26(3):189-191.

[8]李菁,于德泉.燈盞花化學成分研究[J].中國中藥雜志,2011，36(11):1458-1463.

[9]B.N., Timmermann, J.J., Hoffmann. Constituents of Chrysothamnus Paniculatus: 3,4,5-trieaffeoylquinin acid(a new shikimate prearomatie acid) and 3,4-, 3,5- and 4,5-dicaffeoylquinic acids[J]. Journal ofNatural Products, 1983(46)：365-368.

[10]趙東保,張衛,李明靜.頂羽菊化學成分研究[J]. 中國中藥雜志, 2006,31(22): 1869-1873.

[11]趙昱，趙軍，李湘萍，等. 咖啡酰奎尼酸類化合物研究進展[J].中國中藥雜志, 2006, 31(11): 869-874.

Studies on Chemical Constituents fromArtemisiascopariaWaldst. et Kit

Maierdan·Tuerxunmaimaiti1WANG Linlin2HU Xu2XU Fang2HUANG Hua2ZHAO Jun2*

1.College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China;2.Xinjiang Key Laboratory for Uighur Medicines, Xinjiang Institute of Materia Medica,Urumqi 830004, China

Objective To study chemical constituents ofArtemisiascopariaWaldst. et Kit. Methods Four compounds were isolated and purified from this plant by various chromatographic methods. The structures were elucidated on the basis of spectral analysis. Results Their structures were identified as 4,5-O-dicaffeoylquinic acid (1), 3,4-O-dicaffeoylquinic acid (2), 3,5-O- dicaffeoylquinic acid (3) and 4′-hydroxywogonin (4).Conclusion These compounds are isolated fromArtemisiascopariaWaldst. et Kit for the first time.It provides reference for further development and utilization ofArtemisiascopariaWaldst. et Kit.

ArtemisiascopariaWaldst. et Kit; Chemical Consituents; Caffeoylquinic Acid

國家自然科學基金項目(81360657)。

麥爾旦·吐爾遜麥麥提(1991-)，男，維吾爾族，碩士研究生在讀，研究方向為天然藥物化學。E-mail: 418590756@qq.com

趙軍(1973-)，男，博士，研究員，研究方向為中藥與天然藥的研究與開發。E-mail: zhaojun21cn@163.com

R284.1

A

1007-8517(2017)14-0015-02

2017-05-16 編輯：陶希睿)