現代化中藥安全性評價和關鍵技術研究體系的建立與應用

胡 雷,鐘 飛,張彩霞,徐德璐,葛 鵬,劉艷菊,蘭天龍,周博宇,申秀萍,張宗鵬

(1. 天津藥物研究院新藥評價有限公司，天津 300301；2.天津藥物研究院有限公司，天津 300193)

專題研究

現代化中藥安全性評價和關鍵技術研究體系的建立與應用

胡 雷1,鐘 飛1,張彩霞2,徐德璐1,葛 鵬1,劉艷菊1,蘭天龍1,周博宇1,申秀萍1,張宗鵬1

(1. 天津藥物研究院新藥評價有限公司，天津 300301；2.天津藥物研究院有限公司，天津 300193)

中藥引起的不良反應事件時有發生，但是目前缺乏科學、客觀、規范的中藥安全性評價方法。在中藥臨床前評價的過程中，形成一套科學的、規范的、可行的現代中藥評價體系標準勢在必行。本項目建立了包括臨床前安全性評價用供試品質量控制體系、現代化中藥及其制劑毒性評價體系、評價管理體系在內的現代化中藥臨床前安全性評價體系，規范了中藥臨床前安全性評價的每個研究環節。無論從保障患者身體健康、增加臨床用藥的安全性，還是從豐富完善中醫藥學術、發展中醫藥學、促進中醫藥與國際藥學相互接軌方面，都具有重要的指導意義和應用價值。

安全性；臨床前評價；現代中藥

1 研究背景

中藥是我國人民防病治病和強身健體的主要武器，數千年來它對保障國人的健康和中華民族的繁衍昌盛發揮了巨大的作用[1]。中藥的認識和應用充分反映了我國自然資源及歷史、文化等方面的若干特點，其品種繁多，僅古籍記載就有3000種以上，發展至今已達12800余種[2]。現代許多疑難病的治療都用到了中藥并取得了較好的療效，例如用中藥相思子毒素治療各種癌癥，砒霜治療白血病，蜈蚣治療各種結核，蜂毒治療風濕性疾病，水蛭治療血栓性疾病等，而且隨著研究的深入中藥在疑難病的治療前景越來越廣闊[3]。正因為中藥這種無可替代的資源優勢和療效優勢，國外對中藥的應用也日益增多。但是，在中藥廣泛應用的同時，不良反應事件也在增多，如比利時的腎毒性事件[4]、新加坡的黃連素事件[5]、日本的柴胡事件[6]及國內發生的魚腥草事件[7]、刺五加事件[8]等。這些不良反應事件的發生使中藥的安全性評價受到廣泛關注。

據統計，中藥中毒類型大體有心臟毒、肝臟毒、 腎臟毒、神經毒、過敏反應等。導致中藥不良反應發生的原因是多方面的，根本原因是缺乏對中藥毒副作用、不良反應的正確認識，缺乏科學、客觀、規范的中藥安全性評價方法[3]。因此無論從臨床保障患者身體健康、增加臨床用藥的安全性，還是從豐富完善中醫藥學術、發展中醫藥學、促進中醫藥與國際藥學相互接軌方面來講，都有必要建立一套針對中藥毒性特點的評價體系。

中藥傳統的安全性評價往往來自于歷代中醫藥學家對生活的觀察、親身嘗試及臨床應用的經驗總結[9]。某味中藥的毒性只有在使用固定的劑量和用法時才能被發現。在日常使用中，又經常用炮制的方法降低中藥的毒性，從而使人們在用藥的過程中發生毒性反應的概率大大降低，因此造成了普遍認為中藥毒性較小的誤解[10,11]。但是，現代化的中藥新藥在制備方法、劑型、劑量、服法等方面與傳統中藥有很多不同之處，所以其產生的毒性不一定與人們已知的毒性相同[12]。

現代中藥及天然藥物組方復雜、生產質量控制較難把控，尤其是中藥一類、部分二類已經很難用傳統的中醫理論闡述其功能主治，其從化學本質、毒性潛力上有別于傳統的中藥[13]。因此我們對中藥不良反應的認識決不能局限于傳統中醫藥文獻記載的那些有毒中藥上，必須結合現代科學理論和實驗技術建立一套標準規范的現代化中藥的臨床前安全性評價體系，應用安全、有效、質量可控的受試藥物，全面、客觀、定量或半定量對觀察指標進行研究，判斷藥物能否進入臨床研究，是否具有開發價值，為臨床用藥提供參考。

本項目建立的現代化中藥臨床前安全性評價體系是在中藥安全性評價過程中將傳統中醫中藥的優勢特色與現代科學理論、科學技術相結合，建立了具有現代科學內涵的中藥安全性評價體系，為臨床合理用藥提供參考資料，也對深入探討藥物作用機制具有重要的指導意義。該體系的建立規范了中藥臨床前安全性評價的每個研究環節，無論從保障患者身體健康，增加臨床用藥的安全性，還是從豐富完善中醫藥學術，發展中醫藥學，促進中醫藥與國際藥學相互接軌方面，都具有重要的指導意義和應用價值。

2 研究目的

藥物的臨床前安全性評價是藥物研發過程中不可或缺的一個重要環節，是判斷藥物是否具有開發價值、能否進入臨床研究的關鍵步驟。在祖國醫藥學急速發展的今天，必須具有中藥學、毒理學、藥理學、病理學、臨床醫學及實驗動物學等知識，才能對現在中藥誘發的毒性反應進行綜合分析判斷，作出科學的評價。

本項目主要建立了國際先進的完整、科學、規范的中藥及其不同劑型藥物臨床前安全性評價體系。(1)臨床前安全性評價用供試品質量控制體系：對不同劑型的中藥供試品進行規范化管理，嚴格控制毒理學研究用樣品的質量，確保試驗結果的準確可靠。(2)現代化中藥及其制劑毒性評價體系：針對中藥常見的不良反應，該項目建立了心臟毒性評價體系、肝毒性評價體系、腎毒性評價體系、制劑安全性評價體系、行為學毒性評價體系，并對中藥的毒性成分在血漿和毒性靶器官內的暴露情況進行追蹤。(3)研究項目管理體系：本項目建立的GLP管理體系和AAALAC管理體系，通過規范化管理在保證動物福利的同時提高了實驗數據質量，避免數據的偶發變動，保證原始數據的準確性。

3 創新點

(1)首次建立了完整、科學的、基于 GLP 規范的現代中藥的臨床前安全性評價體系，包括：中藥供試品質量控制體系、現代化中藥及其制劑毒性評價體系、評價管理體系。目前該體系已應用于百余項藥物臨床前研究，為我國新藥研制做出了突出貢獻。

(2)該項目建立了完整、科學、國內領先的臨床前安全性評價用供試品質量控制體系。在新藥評價中對保證試驗結果的準確性、可靠性方面發揮著重要作用。

(3)建立VAP(Vascular Access Port)模型犬[14-19]，實現清醒犬大動脈血壓的建立。創新性將傳統的頸動脈插管術與新興的生理遙測技術相結合[20]，在犬頸總動脈植入動脈壓力檢測器以及給動物佩戴馬甲系統，使用無線生理遙測技術檢測動物血壓、心電，將其應用于中藥一類新藥的心血管安全性評價研究中。

(4)建立了行為學毒性評價體系。對非嚙齒類動物(比格犬、食蟹猴)行為學觀察指標進行統一，對嚙齒類動物(ICR小鼠)行為學評價指標進行量化，建立了行為學毒性評價體系。應用全自動視頻追蹤分析技術研究小鼠運動路徑(移動的距離和速度等)、路徑形狀(轉動角度，頭部朝向)、個體行為(活動度，伸展程度)、社會行為(相對距離，相對運動參數)等行為學指標[21-26]。

(5)確定以藥物代謝產物中的杠柳次苷為毒性標記物，應用LC-MS技術建立方法學，檢測杠柳次苷在比格犬不同臟器內的暴露情況，通過檢測各臟器中的杠柳次苷暴露量，研究毒性標記物杠柳次苷與毒性靶器官之間的關聯性，首次以此方法用于評價這類藥物對實驗動物主要臟器的毒性作用。

(6)建立了基于細胞、分子生物學技術水平的藥物早期心臟毒性預測模型。用胰蛋白酶和Ⅱ型膠原酶分步消化乳鼠心肌組織，改良大鼠原代心肌細胞培養方法，采用RT-PCR、Western-Blot等技術建立藥物早期心臟毒性預測模型[27]。

4 討論

隨著中藥學的發展，越來越多的人認識到在中藥臨床前評價的過程中，形成一套科學的、規范的、可行的現代中藥評價體系標準，可以有效減少系統誤差，提高毒性評價準確性和一致性，成為判斷受試物是否安全的可靠依據。本項目建立的體系規范了中藥臨床前安全性評價的每個研究環節，為判斷藥物是否具有開發價值、能否進行臨床研究提供依據，指導臨床合理用藥，保障患者人身安危，增加臨床用藥的安全性。

在本項目建立的體系中，對小鼠自主活動的評價應用了先進的全自動視頻追蹤分析技術，豐富了自主活動的檢測指標，為更加全面、深入研究藥物神經毒性做出了突出貢獻；建立的早期心臟毒性預測模型在細胞和分子水平上揭示了藥物心臟毒性的作用機制；建立的VAP模型犬，能直接檢測清醒犬大動脈的血壓，提高了數據的準確性，并將其用于心臟安全性的評價，填補了國內外研究的空白；建立了早期肝臟毒性預測模型和體內肝毒性評價體系，豐富了肝毒性評價方法；腎毒性評價體系中檢測指標全面、客觀，實現指標定量或半定量；制劑安全性評價體系適用于多種劑型中藥的安全性評價。

利用所建立的評價體系，為全國部分科研院所、大專院校和國內知名的制藥企業等多家機構進行了百余個中藥的臨床前評價，其中10余個中藥已經上市，20余個中藥已經獲得臨床批件，其余新藥正在申請臨床研究中。期間公開發表相關論文、會議摘要近20篇，非公開發表研究報告百余篇。該評價體系的應用獲得的直接經濟效益超過億元。

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The establishment and application of safety evaluation and key technology research system for modem Chinese herbal drug

HU Lei1, ZHONG Fei1, ZHANG Cai-xia2, XU De-lu1, GE Peng1, LIU Yan-ju1, LAN Tian-long1, ZHOU Bo-yu1, SHEN Xiu-ping1, ZHANG Zong-peng1

(1. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research New Drug Evaluation Co.Ltd, Tianjin 300301,China;2. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Co.Ltd, Tianjin 300193)

The adverse reactions caused by traditional Chinese medicine have occurred frequently, but there is a lack of scientific, objective and standardized methods for safety evaluation of traditional Chinese medicine. In the process of preclinical evaluation of traditional Chinese medicine, it is imperative to form a set of scientific, standardized and feasible evaluation system of modem Chinese herbal drug. We established the preclinical safety evaluation system of modem Chinese herbal drug including the quality control system of samples for the preclinical safety evaluation, the toxicity evaluation system of modem Chinese herbal drug and its preparation and the evaluation management system, and standardized each research link of preclinical evaluation of traditional Chinese medicine. Whether from protecting patients’ health and increasing the safety of clinical medication, or from enriching and improving traditional Chinese medicine science, developing traditional Chinese medicine and promoting mutual connection of traditional Chinese medicine and international medicine, it has important instructional significance and application value.

Safety;Preclinical evaluation;Modem Chinese herbal drug

胡雷，碩士生，副研究員，研究方向：臨床前藥物安全性評價。E-mail: hul@tjipr.com

R-33

A

1671-7856(2017) 05-0012-04

10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.05.005

2017-01-04