畜禽血樣采集技術及注意事項

遠永來 ， 張彥庭 ， 王國輝 ， 徐義強 ， 劉俊麗

(河南省西華縣畜牧局 ， 河南 西華 466600)

畜禽血樣采集技術及注意事項

遠永來 ， 張彥庭 ， 王國輝 ， 徐義強 ， 劉俊麗

(河南省西華縣畜牧局 ， 河南 西華 466600)

近年來隨著我國養殖業集約化、規模化的高密度式養殖模式的迅速發展，加之種畜禽頻繁從國外引種導致畜禽疫病復雜化，臨床獸醫憑眼觀或以經驗的傳統診療方式已遠遠不能滿足實際生產的需要，因此要對畜禽疫病進行準確的診斷分析，實驗室診斷勢在必行，血清學抗體檢測不但為實驗室診斷動物疫病的方法之一，而且為畜禽免疫程序的制定及調整提供科學依據，為定期分析評估豬場疫情趨勢，把握養殖場疫情動態，科學判斷防控形勢提供技術支持。采血工作是開展動物疫病診斷、免疫抗體效價檢測等工作的基礎，樣品質量的優劣與檢測結果的準確性息息相關，因此，如何獲得符合衛生要求、高質量的樣品，是擺在我們廣大獸醫工作者和畜禽養殖者面前的實際問題，筆者所在的工作崗位需每月定期進行采樣監測工作，介紹體會如下。

1 樣品采集前的準備事項

1.1 采樣用品的準備 采樣前應當準備數量充足的一次性注射器或盛放樣品的容器，還需準備防護服、口罩、一次性手套、棉手套、保定器具、碘酊棉、酒精棉、記號筆、恒溫箱等器具。

1.2 采樣方法的確定 血樣的采集部位和方法，與檢測項目、試驗方法及用血量有關，應當依據實際需要而定。

1.3 采樣比例的確定 依據不同的檢驗目的確定采樣數量，在進行疫病診斷時發病畜禽采樣數不低于10份，進行免疫效果評價時每群采樣不低于30份。

1.4 動物準備 所采樣的畜禽在采樣前應禁食6-8 h，此時血液中的各種生化成分較為恒定，對檢測結果影響最小。豬只保定多用站立保定法，從豬的側后方套豬上頜的成功概率要遠大于正前方，正前方套時豬只看到保定人員多往后退易導致保定失敗，側后方套取時豬只多會抬頭或甩頭，即使豬只后退保定人員也易順勢將其保定。保定住豬只后，可以讓豬只的臀部靠墻或圈欄，這樣被采樣豬只會有一種相對的安全感，其掙扎反應相對較少，特別是在進行耳靜脈采血時效果顯著。脾性溫順的牛多采用徒手站立保定，暴躁的須借助保定架保定。個體較小的羊可用騎跨保定法，脾性暴躁及個體大的羊宜用拴系保定法或側臥保定法。家禽依據采血方法的不同可徒手進行相應姿勢的保定。被采樣畜禽采血部位需進行剪毛，先用碘酊棉進行點狀螺旋式消毒，之后用酒精進行脫碘。

2 采樣方法

畜禽由于皮膚肌肉組織及血管分布的差異，采樣方法也不盡相同，豬的采樣方法常用的有耳緣靜脈采血法及前腔靜脈采血法，牛常用頸靜脈或尾靜脈采血法，羊主要使用頸靜脈采血法，禽類常用翅靜脈采血法。

2.1 豬血樣的采集

2.1.1 耳緣靜脈采血 其操作要領為豬只行站立提鼻保定，用一乳膠帶系住豬耳根部或助手用力在耳根捏壓靜脈的近心端，手指輕彈或揉搓耳靜脈使血管怒張，采血前可先將注射器回抽留點空隙，方便驗證針頭是否刺入血管內，入針時不可推動針栓以免注入空氣對豬只造成傷害，進針時針頭斜面朝上呈20度左右角度刺入血管，進入血管后針頭降低角度呈平行狀態再適當進入，若刺入血管內的話，血液因壓力會自動流入注射器內，此時不要太過用力抽血，若不然常會導致血管變癟，血液回流受阻，應緩慢抽取所需血液量，完成后用干棉球或棉簽按壓止血。筆者在實際工作中，感覺到如果朝遠心端的方向進針，且在采血時適當按壓近心端能提高耳緣靜脈采血的成功幾率及速度。如果進針時針頭斜面朝下，針頭在血管內處于傾斜的狀態的話，勢必會影響采血速度。在針頭的選擇上，可用輸液帶的軟針頭來代替一次性注射器上的針頭，可大大減少因豬只掙扎扭動導致針頭刺穿血管或離開血管的幾率，提高耳緣靜脈采血成功的比例。耳緣靜脈采血時由于血管細血量少，故采血速度較慢，還易受豬只掙扎的影響不易成功，不適于大批量采樣及體重小于15 kg以下的豬只。

2.1.2 前腔靜脈采血 前腔靜脈采血缺點是看不到血管，給人以采血難度較大的感覺，其實不然，如果技術熟練的話，采血順暢、省時，采血量可滿足需要，可用于大批量采樣。此法可根據豬的大小來確定其保定方法，體重20 kg以下的豬可采用倒提保定法或仰臥保定法，體重20 kg以上的可采用提鼻保定法。成年公豬、母豬選用16×50 mm針頭；中、大豬選用12×38 mm針頭；體重10 kg以下乳豬選用9×20 mm針頭；體重10-30 kg小豬選用9×25 mm針頭。保定姿勢得當的情況下，頸靜脈溝的末端剛好處于胸腔入口處前方所形成的凹陷，采血的時候多在右側進行，因為其左側迷走神經較右側豐富，將針從此凹陷處向對側肩關節頂端刺入，回抽見血即可。由于成年公母豬在進行前腔靜脈采血時需用5 cm以上的長針頭，但現實是多數豬場并不儲備，加之大多數母豬皮下脂肪較厚，造成采樣難度增加，筆者認為成年公母豬耳緣靜脈較粗，用耳緣靜脈采血的方法也很快。

2.2 牛血樣的采集

2.2.1 頸靜脈采血 如在右側頸部進行，用左手的食指、中指及無名指按壓或半握拳狀按壓采血部位頸靜脈近心端，導致血液回流受阻而使血管怒張，另一手緊持消毒并干燥的針頭，用腕力以飛針方式把針頭刺入采血位置，用管接血時應將管傾斜以使血液順管壁緩慢流入，避免因垂直滴入管底產生氣泡或紅細胞破裂而引起溶血，此種方式因使血液暴露于空氣中，易受牛毛、皮屑及舍中塵埃等雜物的污染，使用20 mL規格的一次性注射器直接刺入頸靜脈血管可避免血樣受污染，采樣過程中需手持注射器的針頭針管結合部，以避免針管折斷。

2.2.2 尾靜脈采血 采血者站在牛正后方，用左手緊握牛尾的中間并盡量高舉，使牛尾從尾跟處自然高抬，保持與背中線垂直，在尾跟中線腹側第2與第3尾椎之間(距離肛門約10 cm左右)的凹陷部正中處，垂直于縱軸進針約0.5-1 cm即可。此法牛應激較小，采血速度快，但不適于犢牛以免造成犢牛尾部血管的永久性損傷。

3 羊血樣的采集

羊主要用頸靜脈采血法，羊只保定消毒后，采血者左手拇指摁住頸靜脈近心端，使靜脈血流回流受阻而怒張，采血者右手持一次性注射器，依據羊的膘情，在血管隆起的最高位置，沿頸靜脈縱向與頸部呈適宜角度，向上刺入頸靜脈針頭進入血管時感覺到阻力消失，回抽注射器見到回血即可。

4 家禽血樣的采集

由助手將禽只的翅膀展開，將翅膀根部的羽毛拔去找到翼下靜脈，采血者用左手拇指按壓翼下靜脈的近心端使血管怒張，右手持5 mL一次性注射器，由翅膀根部斜向刺入翼下靜脈進行采血。由于雞的皮膚較松弛，血管易于滾動導致采血時將血管刺穿，皮下形成血腫，導致采血失敗或者養殖戶的反感，筆者在采樣中感覺到在入針時從血管側面進針或由助手繃緊采血部位皮膚，可減少從上方刺入因血管滾動導致的皮下出血，能極大提高采血成功率。

5 樣品采集后的注意事項

5.1 不管何種采血方法，在采血完成后，用一次性注射器時注射器內要留點空隙以利于血清析出，并將針頭折彎，蓋上針帽，以免血清析出后從針頭流出，然后將注射器傾斜擺放，使血液在注射器內形成斜面，以利于血清的析出。

5.2 若需要把血樣注入離心管內時，最好去掉針頭，以避免血樣注入時產生壓力導致速度快而使紅細胞破裂溶血，筆者認為如果不是有特殊的要求，可不必將其注入離心管內，在注射器內如果血清析出效果好的話，不經離心就能直接倒入離心管內備用，相比還能節省一個離心管。

5.3 在完成采樣后的前0.5 h盡量不要劇烈晃動樣品，以免造成溶血而影響血清質量。

5.4 根據運輸距離的遠近及室外溫度，采取適當的降溫或保溫措施，避免血樣腐敗或凍結而影響血清質量。

5.5 在豬和羊采樣量較大時，動物極易嚎叫，采血人員可用棉球將耳朵塞上以免不適。

S854.43

B

0529-6005(2017)09-0044-02

2016-12-31

遠永來(1981-)，男，獸醫師，本科，主要從事動物疫病防治工作，E-mail:1006632573@qq.com

張彥庭，E-mail:35033391@qq.com