退白顆粒與NB-UVB對白癜風患者IL-6、CD4+、Th17影響研究*

蒙 堅, 黃 熙,楊鳳元

桂林醫學院第一附屬醫院皮膚科(桂林541001)

?

退白顆粒與NB-UVB對白癜風患者IL-6、CD4+、Th17影響研究*

蒙 堅, 黃 熙,楊鳳元

桂林醫學院第一附屬醫院皮膚科(桂林541001)

目的：分析退白顆粒與窄譜中波紫外線(Narrow band ultraviolet B，NB-UVB)對白癜風患者IL-6、CD4+、Th17等調節作用。方法：將110例白癜風患者，按照隨機原則將其均分為觀察組和對照組，另以50例健康者做為健康組。觀察組給予退白顆粒口服聯合NB-UVB照射治療，對照組給予NB-UVB照射治療，觀察兩組的臨床療效。結果：觀察組的臨床有效率83.64%顯著高于對照組56.37%，P<0.05。治療后，觀察組IL-6水平、CD8+、Th17細胞的百分比顯著低于對照組，TGF-β水平、CD4+細胞的百分比及CD4+/CD8+顯著高于對照組。觀察組不良反應發生率12.72%與對照組10.91% 差異不顯著。結論：退白顆粒聯合NB-UVB治療白癜風患者，可以調節外周血免疫細胞，影響細胞因子表達，提高患者的免疫功能，發揮較好的治療作用，值得臨床應用。

白癜風是臨床上常見的一種后天性進展性色素脫失性皮膚病，由于皮膚表皮黑素細胞被破壞、功能消失而產生的皮膚黏膜白斑，隨著病情的進展會造成毛發的色素脫失；病理學檢查可見皮損區表皮、毛囊部黑色素細胞及黑色素顆粒缺失[1-2]。近年來，越來越多的中藥制劑被用于皮膚病及自身免疫性疾病的治療，且有較好的臨床療效，因此中西醫結合治療越來越受到白癜風患者的歡迎。本研究運用退白顆粒聯合NB-UVB治療白癜風患者，對上述相關指標進行分析，報告如下。

資料與方法

1 一般資料 選取2012年10月至2015年10月在我院皮膚科就診的白癜風患者110例，隨機均分為觀察組：55例，其中男21例，女34例，平均年齡(28.5±6.3)歲；病程4月～5年，平均病程(2.9±2.8)年；局限型16例，節段型12例，肢端型11例，散發型16例；皮損面積8～240cm2，平均(67.4±18.2)cm2；進展期31例，穩定期24例。對照組：55例，其中男23例，女32例，平均年齡(26.9±7.4)歲；病程6月～4.5年，平均病程(3.1±2.5)年；局限型17例，節段型15例，肢端型11例，散發型12例；皮損面積6～260cm2，平均(69.1±20.4)cm2；進展期29例，穩定期26例。兩組患者在年齡、性別、病程、皮損面積、病期等方面的差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。此外，另外選取50例來我院體檢中心體檢的健康人做為健康組，其中男30例，女20例，年齡16～67歲，平均年齡(29.1±5.7)歲。三組年齡、性別之間的差異無統計學意義，具有可比性。本研究經過我院中心醫學倫理委員會批準與認可，且所有入選患者均簽署知情同意書。

2 研究方法 藥物、主要試劑及儀器:藥物：退白顆粒：主要藥物成分有：白蒺藜30 g，白芷、何首烏、補骨脂、雞血藤、菟絲子各15 g，當歸、黃芪、丹參、紅花、烏梢蛇、陳皮、黑豆衣各10 g。

2.1 儀器及試劑:流式細胞儀，型號FACS Calibur ，美國BD公司生產；系統光療儀，型號UV100L，徳國Waldmann公司生產；日光紫外線模擬器，型號SUV-1000，上海Sigma公司生產；酶標儀，型號anthos201O型，奧地利產；白癜風表皮分離儀，型號BY-II型，上海躍進醫療器械廠生產；高速離心機，型號TGL-168，上海安亭科學儀器廠生產。人IL-6ELISA試劑盒,上海西唐生物科技有限公司生產。

2.2 治療方法:觀察組給予退白顆粒口服聯合NB-UVB照射治療。退白顆粒服用方法：加水200 ml沖服，早晚各100 ml。NB-UVB照射治療：用系統光療儀照射患處，NB-UVB波長為311 nm，初始劑量為0.4～0.6J/ cm2，其中面部0.4 J/cm2，軀干0.5 J/cm2，四肢0.6 J/cm2；以后每次劑量增加10%～20%，直到患者出現皮膚紅斑反應后，按照該劑量維持治療；每周3次；照射時應該對眼睛、外生殖器及正常的皮膚進行必要防護。對照組：僅給予NB-UVB照射，照射方法及時間同觀察組。兩組患者的治療時間均為3個月。

2.3 標本采集:分別抽取治療前、后兩組患者及健康對照者清晨空腹外周血5 ml,每次采集的樣本均分為兩份，一份以3000次/min離心15 min后取血清用于細胞因子測定， 一份用于流式細胞儀分析。

3 觀察指標 觀察兩組患者的臨床療效，療效評定標準[3]：無效：白斑縮小的面積很小或無變化，皮損處恢復正常膚色的面積占原有皮損面積的比值<10%；好轉：白斑部分消退或縮小的面積較大，皮損處恢復正常膚色的面積占原有皮損面積的10%～49%；顯效：白斑大部分消退，皮損處恢復正常膚色的面積占原有皮損面積的比值>50%；痊愈：白斑完全消退，皮損處恢復正常膚色的面積占原有皮損面積的比值≥50%。臨床有效率=(顯效例數+痊愈例數)/總例數×100%。

觀察患者外周血中IL-6、TGF-β的含量，采用酶聯免疫吸附試劑盒測定IL-6、TGF-β的含量。

觀察患者治療前后外周血T淋巴細胞亞群的檢測結果：運用流式細胞儀，按照試劑盒上的操作要求檢測兩組患者的CD4+、CD8+、Th17細胞的百分比，然后利用功能軟件計算CD4+/CD8+T細胞比值。

由于光療法照射時間長可能會對患者產生光老化、色素沉著等不良反應，因此治療結束后，應觀察兩組患者不良反應的發生情況；此外由于觀察組聯合運用退白顆粒，退白顆粒屬于中成藥，定期進行血、尿常規及肝腎功能等常規檢查。

結 果

1 觀察組、對照組患者的臨床療效比較 觀察組痊愈25例，顯效21例，好轉9例，無效0例,對照組痊愈18例，顯效13例，好轉17例，無效7例，觀察組臨床有效率46(83.64%)顯著高于對照組31(56.37%)，差異具有統計學意義(P<0.05)。

2 健康組及觀察組、對照組治療前后外周血中IL-6、TGF-β的含量變化的比較 見表1。

表1 健康組及觀察組、對照組外周血中IL-6、

注：與治療前比較，#P<0.05；與對照組治療后比較，*P<0.05；與健康組比較，?P<0.05

3 健康組與觀察組、對照組外周血中T淋巴細胞亞群的檢測結果的比較 見表2。

表2 健康組及觀察組、對照組外周血中T淋巴細胞亞群的檢測結果±s)

注：與治療前比較，#P<0.05；與對照組治療后比較，*P<0.05；與健康組比較，?P<0.05

4 不良反應 觀察組和對照組的光不良反應基本一致，患者主要表現為：照射后輕度的自覺皮膚燒灼感、刺痛感及瘙癢感；觀察組部分患者會出現輕度惡心、嘔吐及上腹部不適癥狀；觀察組患者治療前后的血、尿常規、肝腎功能均未見顯著變化。按照患者出現皮膚不適癥狀及胃腸道癥狀兩方面對患者的不良反應進行分析，結果觀察組不良反應發生率12.72%與對照組10.91%差異無統計學意義(P>0.05)。

討 論

白癜風是臨床上常見的一種皮膚病，由于其病因及發病機制至今尚未得到完全闡釋，所以目前尚未有統一的治療方案，就其研究現狀而言，自身免疫機制是多數專家、學者公認的發病機制之一[4]。因此臨床上對于白癜風的治療多從免疫機制角度入手，常用的治療方法是NB-UVB照射治療，通過刺激促黑激素產生、促細胞因子分泌、促黑素細胞增殖及黑素生成以及對移行和增殖的黑素細胞發揮保護作用等而發揮治療作用[5]。但近年來研究發現[6]，NB-UVB照射治療白癜風仍然存在不足，多數患者需要長期進行光照治療，長期光照可能會產生光老化、色素沉著等不良反應。因此臨床上目前多采用聯合中成藥或中藥湯劑療法治療白癜風[7]。

中醫學認為，白癜風的發病是機體內外因素互相作用的結果，內因為肝脾腎虛，多由肝血虛、腎陽虛、腎氣不足、致令機體陰陽失衡，氣血失和，在此基礎上濕熱風邪乘虛而入，客入肌膚，閉阻經絡血脈，肌膚不得溫煦，皮膚毛發失養致黑色素脫失而成白斑[8]。因此治療上應該養血益膚、驅風通絡；本研究中運用退白顆粒聯合NB-UVB治療，退白顆粒的作用機制如下：當歸、黃芪益氣補血，白蒺藜、烏梢蛇、白芷、菟絲子祛風發散通絡；雞血藤、補骨脂、何首烏、丹參、紅花、陳皮，滋養肝腎、理氣活血；黑豆衣補腎養血、祛風調氣。通過聯合運用退白顆粒，減少了NB-UVB的照射劑量，從而降低了NB-UVB照射可能引起腫瘤的風險。此外，研究發現補骨脂、白蒺藜等能夠提高皮膚對于NB-UVB照射的敏感性，加速黑色素的生物合成[9]；當歸、丹參等能明顯改善局部微循環，促進黑色素運轉和彌散，促進皮損部位黑色素的再生[10]。因此退白顆粒與NB-UVB聯合運用可以顯著提高臨床治療效果。本研究結果中觀察組的臨床有效率83.64%顯著高于對照組56.37%，與盛國榮等[11]研究結果相近。

白癜風是一種T細胞介導的自身免疫相關性疾病[12]。TGF-β是一種促生長因子，參與許多生理病理過程，在維持機體免疫平衡中起著重要作用，在許多疾病發病的急性階段中，其合成會明顯減少，TGF-β在白癜風中的作用機理在于CD4+CD25+調節性T細胞產生的膜性TGF-β與未知的受體結合，從而傳遞細胞接觸-依賴性抑制信號，抑制免疫活性細胞的增殖，調節細胞表型及抑制淋巴細胞等，進而導致黑素細胞自身抗原的耐受性破壞，形成白癜風[13]。本次研究中觀察組TGF-β水平治療后顯著高于對照組，筆者推斷與退白顆粒的免疫調節作用相關，但具體機制尚不明確且當歸、丹參等能明顯改善局部微循環，促進黑色素運轉和彌散，促進皮損部位黑色素的再生，從而改善觀察組治療情況，增加其治療有效率。

此外，白癜風發病過程中Th17細胞分泌的IL-17A作用于表皮角質形成細胞及真皮成纖維細胞，促進IL-6的大量分泌，使IL-6在血液和局部微環境中的濃度顯著增高，作用于黑素細胞，IL-6能促進黑素細胞表面的細胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達，ICAM-1是中性白細胞與黑素細胞黏附的必需因子，IL-6通過增加效應細胞的遷移及其與靶細胞間的黏附，引起黑素細胞功能失調，進而導致白癜風。 退白顆粒對小鼠的體液免疫及T細胞介導的免疫反應有一定的調節作用；CD3+T細胞和CD4+T細胞對于白癜風發病起到免疫抑制性調節作用，通過實驗研究發現去除CD4+T細胞的小鼠體內CD3+T細胞數量增加了10倍，并且超過一半的小鼠出現了白癜風的體征。因此本研究中治療后，觀察組及治療組IL-6水平、CD8+、Th17細胞的百分比較治療前降低，表明NB-UVB照射治療可以抑制IL-6對黑素細胞的損傷，并通過調節T細胞免疫調節機體免疫功能，進而改善白癜風癥狀。治療后，觀察組IL-6水平、CD8+、Th17細胞的百分比顯著低于對照組,CD4+細胞的百分比及CD4+/CD8+顯著高于對照組，表明NB-UVB聯合退白顆粒對抑制IL-6分泌，Th細胞分泌功能優于單用NB-UVB照射治療。此外，觀察組的不良反應發生率與對照組差異無統計學意義，可見聯合治療的安全性尚可，這一結果再次表明了中醫藥在治療白癜風方面的優勢。

綜上所述，運用退白顆粒聯合NB-UVB治療白癜風患者，可以調節患者的外周血免疫細胞，影響細胞因子的表達，從而提高患者的免疫功能，發揮較好的治療作用，值得臨床應用。

[1] 魏亞東.白癜風丸配合吡美莫司軟膏治療白癜風的臨床研究[J]. 陜西中醫, 2015，36(10):1400-1401.

[2] 牟寬厚,李 盼.白癜風皮膚組織角質形成細胞釋放警報素分子的研究[J].陜西醫學雜志,2014，43(10):1275-1277.

[3] 吳蓓玲，孫 潔，楊曉紅，等.卡介苗多糖核酸聯合中藥對白癜風患者T細胞亞群及Fas/FasL系統表達的調節.中華皮膚雜志，2012,45(6)：426-428.

[4] 王衛亮,陳 燕,劉奉彬,等. NB-UVB、曲安奈德、白癜風顆粒三聯療法治療后白癜風患者外周血及皮損組織中病情相關指標的評估[J]. 海南醫學院學報,2016,22(8):825-828.

[5] 趙玉鳳.Th17細胞在白癜風發病中的作用研究進展[J].中國全科醫學,2012,15(20):2256-2258.

[6] 陳 鵬，蔣 獻.窄譜中波紫外線治療皮膚病的作用機制[J].國際皮膚性病學雜志，2007，3(1):33-35.

[7] 梁津寧. Th17細胞及其相關細胞因子在白癜風發病機制中作用的研究[D].濱州醫學院,2011.

[8] 房 欣,喬樹芳.白癜風免疫學機制與中藥對其作用的研究進展[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志,2013,12(6):398-403.

[9] 許兆毅，張峻嶺，張丹丹，等．中醫藥聯合NB-UVB治療白癜風的研究進展[J].中國皮膚性病學雜志，2014,28(4):415-417.

[10] 夏 毓．中藥內服聯合NB-UVB照射治療白癜風60例臨床觀察[J].中國皮膚性病學雜志，2014,28(10)：1067-1068．

[11] 盛國榮,丁曉云,劉海琴，等. 退白湯聯合NB-UVB對尋常型白癜風患者IL-6和TGF-β表達水平的影響[J]. 中藥藥理與臨床,2015,31(4):207-211.

[12] 葉 蓉，馬 剛，胡小平，等．散發型白癜風患者外周血CD4+/CD8+細胞比值及CD4+CD25+T細胞的檢測[J]．中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2012，11(5):281-283.

[13] 史永儉,劉園園,劉 瑛，等. NB-UVB照射對白癜風皮損區IL-6、IL-18、TNF-α以及slCAM-1水平的影響[J]. 中國麻風皮膚病雜志,2014,30(12):724-726.

(收稿：2016-07-26)

?廣西自然科學基金資助項目(桂科基結字[2016]608號)

白癜風/中西醫結合療法 退白顆粒

R758.41

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.045