不同產地珠子參中氨基酸成分分析*

張 欣，王 潔，許苗苗，宋小妹?

1. 陜西中醫藥大學(咸陽 712046)，2陜西中醫藥大學第一附屬醫院藥劑科(咸陽712000)

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·方藥縱橫·

不同產地珠子參中氨基酸成分分析*

張 欣1，王 潔2，許苗苗1，宋小妹1?

1. 陜西中醫藥大學(咸陽 712046)，2陜西中醫藥大學第一附屬醫院藥劑科(咸陽712000)

目的：建立珠子參氨基酸的測定方法，并比較不同產地的珠子參中氨基酸的含量差異。方法：采用氨基酸分析儀測定不同產地珠子參中氨基酸含量，并利用SAS軟件進行聚類和主成分分析。結果：不同產地珠子參均含有17種氨基酸，其中必需氨基酸有7種占總氨基酸28.5%，藥用氨基酸有8種占總氨基酸45.6%；聚類和主成分分析結果為陜西和四川產地分為一類，云南一類。結論：不同產地珠子參中氨基酸含量具有一定差異，該結果為珠子參的開發、利用及珠子參的質量品質評定提供科學依據。

珠子參為五加科人參屬植物珠子參 Panax japonicus C.A.Mey.var. major( Burk.)C.Y.Wu et K.M.Feng或羽葉三七 Panax japonicus C.A.Mey.var.bipinnatifidus( Seem.)C.Y.Wu et K.M.Feng的干燥根莖。具有補肺, 養陰, 活絡, 止血之功[1]，在我國陜西、四川、云南、貴州等地均有分布。文獻報道，珠子參含有多種皂苷類成分[2-5]、多糖[4]和氨基酸類成分[5]。目前對珠子參的化學成分報道較多，但對珠子參中氨基酸的研究報道少見。氨基酸不僅是人體的必需營養成分，缺乏氨基酸時，人體正常的生長發育就會受到抑制或導致疾??；而且氨基酸還可參與人參皂苷的轉化，研究報道精氨酸可促進齊墩果酸型人參皂苷Ro轉化為姜狀三七皂苷R1[6]。因此，中藥中的氨基酸往往是治病的主要有效成分或輔助成分。本研究利用氨基酸自動分析儀對不同產地珠子參根中氨基酸組成及含量進行測定，并進行分析評價，旨在探索不同產地珠子參中氨基酸的差異及藥用價值。

材料與方法

1 儀 器 L-8900型全自動氨基酸分析儀(日本日立公司)；R200D電子分析天平(德國Satorius公司)；超聲清洗機(寧波新芝生物科技股份有限公司，型號SB-3200D，180W，40KHz)。

2 試藥與材料

2.1 試藥: 氨基酸標準品(美國Sigma公司)；其余試劑(分析純，天津科密歐化學試劑有限公司)。

2.2 材料: 珠子參分別購自陜西中醫、藥大學四川、云南等地，采集到的所有植株均由陜西中醫學院藥學院生藥教研室王繼濤高級實驗師鑒定為五加科人參屬植物珠子參Panax japonicus C.A.Mey.var.major (Burk.) C.Y.Wu et K.M.Feng或五加科人參屬植物羽葉三七Panax japonicus C.A.Mey.var.bipinnatifidus(Seem.)C.Y.Wu et K.M.Feng，見表1。

3 研究方法

3.1 測試條件：離子交換柱：柱長：4.6 mm×60 mm；樹脂：2622；反應柱柱溫：135 ℃；分離柱柱溫：57 ℃；緩沖液流速：0.4 ml·min-1；柱壓7.000-7.300 MPa；茚三酮流速：0.350 ml/min；柱壓：0.700-0.800 MPa。

表1 珠子參來源及品種

3.2 供試品溶液的制備:稱取表1中各樣品粉末約1.0 g，精密稱定，置安瓿底部，加 6 mol/L鹽酸10 ml，冷凍，抽真空封口，于110 ℃隔氧水解24 h，取出放冷至室溫，打開安瓿，過濾，水解液蒸干后，用0.02 mol·L鹽酸溶解，定容至200 ml量瓶中，備用。

3.3 對照品溶液的制備:取美國Sigma公司氨基酸對照品適量，精密稱取，用0.02 mol/L鹽酸溶液定容至250 ml量瓶中，混勻，作為氨基酸混合標準儲備液，吸取2.00 ml氨基酸混合標準儲備液，置于50 ml量瓶中，以0.02 mol/L鹽酸溶液定容、混勻，使氨基酸組份濃度C(氨基酸)=0.1 mol/L。

3.4 樣品含量的測定:按L-8900型全自動氨基酸分析儀操作規程，調節好儀器操作參數后，對樣品進行氨基酸含量測定。結果見表2。

聚類和主成分分析:利用SAS軟件對珠子參氨基酸進行聚類和主成分分析，由結果可知，主要分為兩類，1,2,3,4,7，9,5,6一類；8一類。即珠子參氨基酸

陜西和四川歸為一類沒有差異，而云南分為兩類可能由于采收時期不同或當地環境差異，導致初生代謝產物累積的高低，但總體來說陜西、云南、四川絕大多數珠子參中氨基酸差異不大(圖1)。主成分分析結果與聚類相符(圖2)。再結合2.4項下測定結果可知，陜西漢中市寧強縣舒家壩鎮珠觀村和麗江市玉龍納西族自治縣魯甸鎮拉美榮山腳種植基地的珠子參總氨基酸含量較高。聚類、主成分分析結果如下：

表2 不同來源及品種9份珠子參中

注：*必需氨基酸；#：藥用氨基酸；T：總氨基酸；E：必需氨基酸總量；M：藥用氨基酸；E/T：必需氨基酸總量占總氨基酸百分比；M/T：藥用氨基酸總量占總氨基酸百分比從表2可見，珠子參根中的氨基酸種類豐富，含有17種常見氨基酸，其中7種為必需氨基酸，8種為藥用氨基酸，而且西安市周至縣厚畛子和樂山市峨眉山市黃灣鄉差地村1組產的珠子參不含蛋氨酸。

不同產地珠子參含氨基酸總量、藥用氨基酸、必需氨基酸含量最高的是漢中市寧強縣舒家壩鎮珠觀村。

圖1 珠子參氨基酸聚類分析圖 圖2 珠子參氨基酸主成分分析圖

討 論

研究報道可知氨基酸可參與人參皂苷的轉化，其中精氨酸可促進齊墩果酸型人參皂苷Ro轉化為姜狀三七皂苷R1[6]。珠子參中主要有效成分為人參皂苷Ro、竹節參皂苷Ⅳa、姜狀三七苷R1、去葡萄糖竹節參皂苷Ⅳa，在前期研究中可知四川和陜西產地珠子參中人參皂苷Ro和竹節參皂苷Ⅳa含量高于姜狀三七苷R1、去葡萄糖竹節參皂苷Ⅳa，而云南產珠子參結果與之相反，姜狀三七苷R1和去葡萄糖竹節參皂苷Ⅳa含量較高[7]。本文測定的17種氨基酸中精氨酸的含量最高，占總氨基酸的21.57%，其中云南珠子參中的氨基酸含量明顯高于陜西和四川。不同產地及品種珠子參中氨基酸種類較多(色氨酸因水解幾乎全被破壞)，除西安市周至縣厚畛子和樂山市峨眉山市黃灣鄉差地村1組產的珠子參不含蛋氨酸外，不同產地的珠子參均含有16種氨基酸，含量較高的有天門冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸，不少氨基酸[8-9]有很強的藥理活性，其中天冬氨酸具有鎮咳去痰、降低血壓、保護心臟等作用，谷氨酸不僅屬于鮮味氨基酸，而且能在人體內與血氨結合形成對機體無害的谷氨酰胺，解除組織代謝過程中產生的氨毒害作用,并參與腦組織代謝，使腦功能活躍，因此，對珠子參中氨基酸的研究有重要意義。

[1] 國家藥典委員會. 中國藥典[M]. 北京: 中國醫藥科技出版社, 2010: 254-255.

[2] 楊崇仁, 周 俊, 馮寶樹, 等. 秦嶺產珠子參根莖的皂苷成分[J]. 植物學報, 1988, 30(4): 403-408.

[3] 鄒 坤, 朱 姝, 蔡少青, 等. 扣子七中人參皂苷的HPLC-MS-MS方法研究[J]. 藥學學報,2004,39(5): 385.

[4] 杜良威, 王世林, 李 英, 等. 珠子參抗真菌糖蛋白的研究[J]. 云南植物研究, 1992, 14(4): 430-436.

[5] 楊 芳, 楊萬林, 陳錦玉, 等. 珠子參地上部分氨基酸測定及營養評價[J]. 氨基酸和生物資源, 2013, 35(2): 1-4.

[6] 劉 敏. 纖維素、淀粉、氨基酸對人參皂苷轉化的影響[D].吉林:中國農業科學院, 2013.

[7] 劉 超. 秦巴山區人參屬中藥道地性及主導因子研究[D].咸陽:陜西中醫學院, 2013.

[8] 黃勇其, 陳龍珠. 貴州五種南沙參藥材中氨基酸含量比較[J]. 中國藥業, 2002, 11(4):62.

[9] 冀林立, 孟和畢力格. γ-氨基丁酸的生理功能和研究進展[J]. 農產品加工(學刊), 2007, (12): 11-14.

(收稿：2016-07-16)

Analysis of amino acids in Rhizoma panacis majoris from different producing area

Zhang Xin, Wang Jie, Xu Miaomiao, et al.

Shaanxi University of Chinese Medicine(Xianyang 712046)

Objective：To establish a method for the determination of Amino Acids in Rhizoma panacis majoris，and compare the difference of content from different producing areas. Methods ： Using amino acid analyzer to determine the content of amino acids of Rhizoma panacis majoris from different origin, then clutering and principal component analysis using SAS software. Results：The Rhizoma panacis majoris of different origin contained 17 kinds of amino acids,respectively, including 7 kinds of essential amino acids which accounted for 28.5% of total amino acidsand 8 kinds of medicinal amino acids which accounted for 45.6% of total amino acids; clustering and principal component analysis results for Shaanxi and Sichuan area is divided into a class, a class of Yunnan. Conclusion： The amino acid content of Rhizoma panacis majoris from different origin had some difference , and provide scientific basis for the results of Rhizoma panacis majoris quality development, utilization and evaluation of Rhizoma panacis majoris.

Rhizoma panacis majoris Amino Acids Cluster Analysis Principal Component Analysis

*國家自然科學基金資助項目(81102805/H2804)

珠子參 氨基酸 聚類分析 主成分分析

R962

A DOI 10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.058

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