加味苓桂術甘顆粒提取工藝研究*

田莉婷， 劉雪萍，呂 媛， 傅琪琳

陜西省中醫醫院 (西安 710003)

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加味苓桂術甘顆粒提取工藝研究*

田莉婷， 劉雪萍，呂 媛， 傅琪琳△

陜西省中醫醫院 (西安 710003)

目的:研究加味苓桂術甘顆粒的制備工藝。方法：采用正交實驗，選用三因素、三水平即 L9(34)試驗表安排實驗，以芍藥苷含量和干浸膏得率為指標，確定了最佳提取工藝，對干顆粒的吸濕性、流動性研究，確定了成型工藝。結論：對提取工藝和成型工藝進行相應的實驗研究，為大生產提供了科學依據。

加味苓桂術甘顆粒由茯苓、桂枝、炒白術、生麻黃、白芍、炙甘草六味藥材組成，具有溫陽化飲，宣肺利水的功效，用于肝硬化失代償期并肝性胸水患者，癥見胸脅脹滿，胸悶氣短，活動受限。是名老中醫支軍宏主任醫師專治肝性胸水的經驗方，臨床以湯劑應用，一日一劑，應用中未見不良反應及毒副作用，效果顯著，安全可靠。我們對加味苓桂術甘顆粒工藝制備進行實驗研究，現報告如下。

儀器與試藥

1 儀 器 日本島津LC-2010液相色譜儀，色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱C18。

2 試 藥 水為純凈水，所用化學試劑均為分析純。對照品鹽酸麻黃堿(171241-201007，供含量測定用)、甘草次酸(110703-200612)、芍藥苷(110736-200934)均購自中國藥品生物制品檢定所。所用中藥材經檢驗，均符合2010年版《中華人民共和國藥典藥品質量標準》[1]。

方法與結果

1 提取正交實驗設計[2]正交實驗因素為提取次數、提取時間及加水量，每因素選三個水平[3]。見表1。

表1 煎煮工藝條件正交試驗因素水平表

2 供試品的處理 按處方比例稱取茯苓、桂枝、炒白術等六味藥材，共9份，隨機編成①～⑨號，按L9(34)正交表安排試驗，提取液濾過，定容。

3 干浸膏制備 精密量取上述各提取液100 ml，分別置于已恒重的蒸發皿中，在水浴上濃縮至干，于105℃下干燥3 h，取出，置干燥器中放置30 min，迅速精密稱定重量，計算出膏率，結果見表2。

4 芍藥苷含量測定[4]

4.1 儀器：島津LC-2010液相色譜儀，色譜柱：十八烷基鍵合硅膠C18條件：柱溫 30℃，λ=230nm，流速 1.000ml/min,流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)。

4.2 供試品制備：取正交實驗①—⑨各濾液一定量(約相當于0.1 g白芍藥材)，水浴蒸干，加稀乙醇溶解轉移至25 ml容量瓶中，超聲處理30 min，放冷，加稀乙醇定容至25 ml，搖勻，過濾，取續濾液，作為供試品。

4.3 對照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷對照品適量(m=4.54 μmg),加甲醇制成每1 ml含45.4 μg的溶液，即得。測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl,注入液相色譜儀，測定，即得,結果見表2～4。

表2 L9(34)水煎正交試驗安排及數據分析表

表3 干浸膏得率方差分析

注： F0.05(2,2)=19 F0.01(2,2)=99

表4 芍藥苷含量方差分析

注：F0.1(2，2)=9 F0.05(2,2)=19 F0.01(2,2)=99

5 驗證試驗 根據上述確定條件(藥材飲片加水10倍量，煎煮3次，每次1.5 h)，取藥材3份，進行驗證實驗，見表5。

表5 驗證試驗結果

從上述結果可知，芍藥苷含量及浸膏率均高于正交表中最優值，說明選擇提取條件合理，工藝基本穩定。

從表3～5可知： 以干浸膏得率為指標：直觀分析結果，各因素順序為C(次數)>A(倍數)>B(時間)；方差分析：從表2可知，C因素影響顯著，A、B因素影響不顯著，最佳工藝為A3B3C3.以芍藥苷含量為指標：直觀分析結果，各因素順序為C(次數)>A(倍數)>B(時間)，方差分析：C因素影響顯著，A因素與其接近，B因素影響不顯著。綜上，最佳工藝為A3B2C3。

6 成型工藝 無糖顆粒：選糊精和乳糖作輔料，從浸膏吸濕性來看，吸濕不是很顯著，糊精與乳糖相比，廉價，但抗濕性不如后者。

6.1 糊精：制得干浸膏共105.7 g，按1∶1的比例加糊精105.7 g，抗濕效果較差。

6.2 乳糖：為使制得顆粒有更好的抗濕性，按膏粉∶糊精∶乳糖=1∶1∶0.5的比例加乳糖52 g，拌勻，干燥。將上述混合均勻的細粉于105℃干燥，稱得重量為245 g，取80%乙醇作粘合劑，與藥粉拌勻，使之成為“握之成團，觸之即散”的團塊狀，迅速過篩，干燥。發現80%乙醇作粘合劑時，效果不理想，稍硬，故成品率低(60%)。將藥粉干燥，粉碎，用95%乙醇作粘合劑，方法同上，所制團塊稍軟。成品率合格，但總體顆粒偏小。 綜合考慮，用90%乙醇作潤濕劑效果最佳。

6.3 干顆粒吸濕性試驗：取制備干顆粒，置溫度25 ℃，相對濕度70%～75%的環境下，每間隔一定時間進行水分測定(照中國藥典2010年版一部附錄ⅨH水分測定法第一法烘干法)以觀察干顆粒的水分變化情況，放置時間 0、 6、12、24、48、 96、168h時，水分吸濕率分別是4.2%、4.4%、4.6%、4.8%、 4.8%、 5.0%、5.0%、 5.4%。試驗結果表明干顆粒在25 ℃，相對濕度70～75%的環境下裸放1周，其水分基本保持一致，變化不明顯。

干顆粒流動性的測定 :顆粒流動性大小會直接影響顆粒分裝時裝量差異的大小，相對而言。流動性大時裝量差異小，反之則大。顆粒流動性可用休止角來表示。休止角越大流動性越差。休止角的測定采用漏斗法，以堆高與堆面半徑的函數值來表示，見表6。

表6 干顆粒休止角測定結果(n=3)

經測定其平均休止角為34.57度，表明干顆粒流動性尚好。

綜合考慮顆粒吸濕性和流動性，成型工藝為∶按膏粉∶糊精∶乳糖=1∶1∶0.5混合，用90%乙醇作潤濕劑效果最佳。顆粒粒度及吸濕性、流動性均達到要求。

討 論

肝性胸水屬急癥范疇[5-6]，加味苓桂術甘顆粒作為醫院制劑研究應選擇溶出吸收快，載藥量大，與原臨床應用湯劑一致的劑型，通過本文設計的提取工藝，以芍藥苷含量和水提出膏率兩個指標作為正交實驗評價指標，客觀、全面的篩選出最佳工藝。通過驗證試驗及成型工藝吸濕性、流動性研究，證明該提取工藝的試驗性實驗，顆粒劑最為合適，其制備工藝簡單，質量可控，且藥品性質基本穩定，攜帶和服用方便，為臨床大生產用提供理論依據，但加味苓桂術甘顆粒治療肝性胸水機理需要進一步研究。

[1] 國家藥典委員會．中國藥典[S]．北京：人民衛生出版社，2010：291．

[2] 王 凌，白吉慶，李 芳，等．正交試驗法優選養心開郁片的水提取工藝[J]．陜西中醫，2013，33(1)：1666-1667.

[3] 李 馨，王 金 宏．HPLC法測定龍膽中龍膽苦苷的含量[J]．黑龍江醫藥，2010,(23)：319-320．

[4] 張治軍，覃 曉，周文杰.HPLC測定肝補腎顆粒中芍藥苷的含量[J]．中國醫院用藥評價與分析.2016,(1)：29-31．

[5] 田莉婷,傅琪琳,李興國,等. 麻芪桂術湯配合西藥治療陽虛水停型肝性胸水臨床觀察[J]. 陜西中醫， 2016，37(7)：860-861.

[6] 李煜國， 田莉婷.宣肺發汗法治療肝性胸水83例[J]. 陜西中醫， 2009，30(1)：10-11.

(收稿：2016-08-26)

*陜西省中醫藥管理局課題(13-LC121)

@加味苓桂術甘顆粒 提取工藝 成型工藝

R94

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.060

△通訊作者