干細胞標志物CD133、PSCA和Oct-4在胃癌組織中表達及其臨床意義

沈可欣 王亞東 王 蕓 張佳宇 諶 通 李永超

(吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春 130033)

干細胞標志物CD133、PSCA和Oct-4在胃癌組織中表達及其臨床意義

沈可欣 王亞東 王 蕓1張佳宇 諶 通 李永超

(吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春 130033)

目的 探討胃癌組織中腫瘤干細胞標志物CD133、前列腺干細胞抗原(PSCA)和Oct-4的表達情況及其在胃癌中的診斷意義。方法 胃癌根治手術后病例60例，留取胃癌、癌旁組織及正常組織標本，免疫組化法檢測組織中CD133、PSCA和Oct-4的表達情況。結果 與正常胃組織相比，癌旁組織組中CD133和Oct-4蛋白的表達水平略有提高(P<0.05)，胃癌組織中CD133和Oct-4蛋白的表達水平顯著增高(P<0.01)；正常胃癌組織中PSCA蛋白有明顯表達，癌旁組織中僅有少量表達，但是在胃癌組織中沒有PSCA蛋白表達。結論 腫瘤干細胞標志物CD133、PSCA和Oct-4聯合分析可以作為胃癌的臨床診斷的分子標記。

胃癌；CD133；PSCA；Oct-4

癌干細胞是惡性腫瘤發生的啟動細胞，其表達數量與腫瘤發生、發展、治療耐受及疾病預后密切相關。所以，探討胃癌中腫瘤干細胞的表達情況，有利于了解胃癌的發生、發展程度和提高診斷疾病和判定預后的作用。CD133抗原是鑒定和分離干細胞和祖細胞的重要分子標記〔1〕，同時也有研究認為其可以作為癌癥的預后指標〔2〕。前列腺干細胞抗原(PSCA)可在特殊癌癥細胞中起到一定的抗癌作用，但是在前列腺癌以及上皮惡性腫瘤中其與腫瘤的進展呈正相關，在其他組織中還沒有更好的定位〔3〕。Oct-4在胚胎干細胞和生殖細胞中高表達，也在惡性腫瘤，如精原細胞瘤、中樞系統生殖細胞腫瘤、卵巢無性細胞瘤和胚胎性癌中高表達〔4〕。本研究擬分析胃癌手術患者組織標本中CD133、PSCA和Oct-4的表達及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 藥品及主要試劑 CD133蛋白抗體(美國 Abcam公司)，PSCA蛋白抗體(美國 Abcam公司)，Oct-4蛋白抗體(美國 Abcam 公司)，SP免疫組化試劑盒(Broad Spectrum，博奧森)。

1.2 標本收集 術前和患者充分溝通，簽署知情同意書。收集中日聯誼醫院胃腸外科胃癌根治手術的臨床病例60例，留取胃癌、癌旁組織及正常組織標本并分為三組：正常對照組、癌旁組和胃癌組。入選標準：患者術前沒有任何基礎疾病；沒有任何放射性以及重金屬工作史；術前沒有化療及放療史。

1.3 檢測方法 通過免疫組化(SP法)檢查胃癌組織中CD133、PSCA和OCT-4蛋白表達。每張切片在400×鏡下隨機選擇5個視野，用Motic Image Advanced 3.2圖形分析系統對每張免疫組化切片所有陽性細胞進行總的灰度分析。

2 結 果

與正常胃組織相比，胃癌癌旁組中CD133和Oct-4蛋白的表達水平略有提高(P<0.05)，胃癌組織中CD133和Oct-4蛋白的表達水平顯著增高(P<0.01)，見圖1和圖2。正常胃癌組織中PSCA蛋白有明顯表達，胃癌癌旁組織中僅有少量表達，在胃癌組織中沒有PSCA蛋白表達，見圖3。

圖2 三組Oct-4蛋白的表達(DAB，×400)

圖3 三組PSCA蛋白的表達(DAB，×400)

3 討 論

現階段的研究認為胃癌的發病機制與遺傳因素、吸煙、幽門螺桿菌感染及飲食相關，近些年提出了“腫瘤干細胞理論”對胃癌的研究進展提供了新的思路，其觀點認為在腫瘤中有一小部分具有干細胞特性的腫瘤細胞，其具有侵襲、轉移及抵抗化療的特征，其在適應的環境中可以無限制的進行增值和分化。經過查閱文獻，我們發現了現階段對干細胞的研究主要通過分子標記物對干細胞進行鑒別和分離。本研究在正常組織中，CD133蛋白沒有表達，在癌旁組織中其有少量表達，而在癌組織中大量表達，說明在胃癌組織中有胃癌干細胞的表達。陳軍〔5〕的研究通過免疫熒光方法也證明了在胃癌中CD133蛋白的高表達，其研究結果與本研究一致。PSCA作為前列腺癌診斷的金指標，近年研究發現其在正常的胃癌組織中有表達，本研究發現，在正常對照組中PSCA有表達，但是在胃癌組中其表達明顯降低，所以我們懷疑PSCA可能有抗癌作用。張文濤〔6〕對西北地區胃癌發病風險相關性研究中通過組織芯片技術發現在正常的胃組織中有PSCA的表達，在胃癌組織中表達下調，這同時也說明了PSCA可能對胃癌有抗癌的作用。本研究中我們發現了胃癌組織中Oct-4蛋白高表達，但其在正常組織中沒有表達，這說明了胃癌組織中有胃癌干細胞的存在。陳忠〔7〕的研究中也發現了Oct-4蛋白在胃癌組織中高表達，同時其也通過RT-PCR方法檢測到了胃癌組織中Oct-4基因的高表達在癌旁組織低表達，所以說Oct-4表達情況與胃癌發生情況相關。

綜上，我們發現胃癌組織中CD133、PSCA和Oct-4蛋白表達與胃癌發病情況相關，其可能與胃癌干細胞有關系，將其聯合分析可以作為胃癌檢測和診斷的分子標記。

1 黃 婧，何愛娜，姚 陽.CD133作為腫瘤干細胞標志物的研究進展〔J〕.癌癥進展，2012；9(10)：462-5.

2 Zhao P，Li Y，Lu Y.Aberrant expression of CD 133 protein correlates with Ki-67 expression and is a prognostic marker in gastric adenocarcinoma〔J〕.BMC Cancer,2010;10(1):1-6.

3 Tsang YH，Lamb A，Romero-Gallo J，etal.Helicobacter pylori CagA targets gastric tumor suppressor RUNX3 for proteasome-mediated degradation〔J〕.Oncogene，2010；29：5643-50.

4 Kotoula V，Papamiehos SI，LambroPoulos AF.Revisiting OCT4 expression in peripheral blood mono-nuclear cells〔J〕.Stem Cells，2008；26：290-1.

5 陳 軍.胃癌干細胞干性特征及化療藥物對其影響的初步研究〔D〕.重慶第三軍醫大學，2013.

6 張文濤.前列腺干細胞抗原基因(PSCA)單核苷酸多態性及基因表達與胃癌發病風險的相關性研究〔D〕.西安：第四軍醫大學，2014.

7 陳 忠.干細胞標記物Oct4、Nanog和ABCG2在胃癌中的檢測及診斷意義〔D〕.蘇州：江蘇大學，2009.

〔2016-06-03修回〕

(編輯 郭 菁)

吉林省衛生廳和財政廳聯合課題(3D5140503430)

李永超(1975-)，男，主治醫師，主要從事胃腸道腫瘤研究。

沈可欣(1983-)，男，主治醫師，主要從事胃腸道腫瘤研究。

R735.2

A

1005-9202(2017)01-0046-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.01.020

1 吉林省肝膽病醫院