過氧化物酶-1在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義

晏燕(信陽市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科 河南 信陽 464000)

過氧化物酶-1在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義

晏燕
(信陽市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科 河南 信陽 464000)

目的 分析過氧化物酶-1(Prx-1)在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義。方法 選取信陽市中心醫(yī)院2015年1～12月期間收治的98例肝癌患者，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法分析Prx-1在患者癌旁組織及肝癌組織中的表達(dá)，并對血清Prx-1水平采用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)進(jìn)行檢測。結(jié)果 患者肝癌組織Prx-1陽性率為75.5%，明顯高于癌旁組織的36.7%(P<0.05)；經(jīng)ELISA 結(jié)果顯示，肝癌患者血清Prx-1水平明顯高于正常患者，且患者肝癌分期越嚴(yán)重血清Prx-1水平越高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 Prx-1 表達(dá)水平在肝癌患者中明顯升高，與肝癌進(jìn)展以及腫瘤的生成存在密切聯(lián)系，可作為肝癌早期的診斷及預(yù)后的標(biāo)記物。

過氧化物酶-1；肝癌；表達(dá)

原發(fā)性肝癌是臨床最為常見的惡性腫瘤之一，其早期癥狀隱匿，難以及時診斷且易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，多數(shù)就診時已屬于中晚期[1]。因此，尋找肝癌臨床愈后及早期診斷的標(biāo)記物，對于患者的治療具有積極意義。有研究顯示[2]，Prx-1在肝癌中表達(dá)上調(diào)，但其對于肝癌的臨床意義尚不明確。對此，本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)法分析Prx-1在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義，以為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取信陽市中心醫(yī)院2015年1～12月期間收治的98例肝癌患者，男50例，女48例，年齡為30～64歲，平均(48.3±2.2)歲，其中年齡<60歲56例，≥60歲42例；腫塊直徑≥2 cm 42例，<2 cm 56例；TNM分期：有62例Ⅰ、Ⅱ期，36例Ⅲ、Ⅳ期；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移58例，無轉(zhuǎn)移40例。患者均經(jīng)病理確診，且術(shù)前未行化學(xué)藥物及放射治療。

1.2 治療方法 切取正常組織、癌旁組織、癌組織，采用免疫組織化學(xué)法對癌旁組織及肝癌中Prx-1進(jìn)行分析。將三種組織固定于福爾馬林中24 h，脫水包埋，后制成切片，逐級脫臘至水，PBS(磷酸鹽緩沖溶液)振洗3 min×3(下同)；為防止非特異性染色，以3%過氧化氫封閉30 min，振洗；為將抗體充分暴露，以尿素(3 mol/L)消化30 min，后以檸檬酸修復(fù)，振洗；濾紙擦干后置于濕盒，正常血清37 ℃封閉30 min，滴加一抗(3 μg/ml)，后將切片放入4 ℃冰箱過夜；次日37 ℃復(fù)溫30 min后振洗；后依次滴加二抗、ABC(親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物)，分別于濕盒內(nèi)37 ℃孵育30 min后振洗；以DAB(二氨基聯(lián)苯胺)顯色20 min，以清水沖洗切片，用蘇木素將切片淡染，后脫水、透明、封片。并對血清中Prx-1水平用ELISA進(jìn)行檢測，試劑盒為美國R&D公司生產(chǎn)，操作同說明書。

1.3 觀察指標(biāo) 對陽性結(jié)果采用雙盲法進(jìn)行觀察，每張切片均于光鏡下選取5個癌細(xì)胞較多的視野(200×)，各計(jì)數(shù)100個細(xì)胞。細(xì)胞核無著色或呈現(xiàn)棕黃至棕黑色細(xì)胞個數(shù)≤10%為陰性(-)，>10%為陽性(+)。

2 結(jié)果

2.1 肝癌組織中的Prx-1表達(dá) 患者肝癌組織Prx-1陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05)。見表1。

2.2 Prx-1在肝癌患者血清中的水平 Ⅰ、Ⅱ期肝癌患者血清Prx-1水平為(28.3±4.5)ng/ml，Ⅲ、Ⅳ期患者水平為(38.6±3.8)ng/ml，高于正常患者血清Prx-1水平[(13.2±11.9)ng/ml]，且患者肝癌分期越嚴(yán)重血清Prx-1水平越高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 不同組織中Prx-1的表達(dá)情況比較(n，%)

注：與癌旁組織比較，aP<0.05。

3 討論

Prx-1可參與多種生物功能的調(diào)節(jié)，其在胃癌、肺癌、宮頸癌及結(jié)腸癌等多種腫瘤中均異常高表達(dá)。肺癌及宮頸癌的研究證實(shí)，血清Prx-1水平在腫瘤診斷中具有明顯的診斷價值，且其與CA125合用有助于提高臨床診斷宮頸癌的效能[3]。

本研究顯示，與癌旁組織比較，Prx-1在肝癌組織中表達(dá)明顯偏高，且與正常患者血清Prx-1水平比較，肝癌患者血清過氧化物酶-1水平明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這與林新峰等[4]研究結(jié)果基本相一致，提示在肝癌的早期診斷中血清Prx-1可成為其有效的標(biāo)記物，具有一定的診斷價值。臨床研究顯示，Prx-1在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有十分重要的作用，而肝癌的迅速發(fā)展與加強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)降解的獨(dú)特腫瘤微環(huán)境因素存在著密切關(guān)系[5]。此外，不同成分的腫瘤微環(huán)境對于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化也提供了穩(wěn)定的條件，提示在肝癌進(jìn)展中Prx-1可能介導(dǎo)肝癌中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化表型轉(zhuǎn)化過程，可能是腫瘤微環(huán)境的重要成分之一。Prx-1參與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的調(diào)節(jié)機(jī)制，而對于腫瘤微環(huán)境中Prx-1的特異作用尚需進(jìn)行更加深入的研究。

綜上，在肝癌患者及肝癌組織血清中Prx-1表達(dá)升高，其與肝癌進(jìn)展以及腫瘤的生成存在密切聯(lián)系，對于肝癌的早期診斷和預(yù)后具有提示作用。

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10.3969/j.issn.1004-437X.2017.01.011

2016-05-10)