運(yùn)城市主栽香菇菌株菌絲特性及親緣關(guān)系的研究

段超，李波，薛變麗，陳麗，楊杰，郭尚

（1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所，山西運(yùn)城044000；2.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031）

運(yùn)城市主栽香菇菌株菌絲特性及親緣關(guān)系的研究

段超1，李波1，薛變麗1，陳麗1，楊杰2，郭尚2

（1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所，山西運(yùn)城044000；2.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031）

以運(yùn)城市主栽的15個(gè)香菇菌株為試驗(yàn)材料，采用拮抗試驗(yàn)、感官評(píng)定和測(cè)量不同菌株在平板培養(yǎng)皿的生長情況，對(duì)試驗(yàn)菌株的親緣關(guān)系進(jìn)行判定。結(jié)果表明，高香1號(hào)、931和武香1號(hào)為同一品種，水頭808、向陽2號(hào)、808和靈仙為同一品種，其他為親緣不同的品種。

香菇；菌株；菌絲生長速度；拮抗試驗(yàn)

運(yùn)城市是山西省果樹主產(chǎn)區(qū)，每年的果枝修剪及果園改造間伐產(chǎn)生大量廢棄果枝，果枝富含蛋白質(zhì)和碳水化合物，是香菇等食用菌栽培的優(yōu)質(zhì)原料[1-3]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2015年運(yùn)城市香菇栽培合作社和企業(yè)達(dá)100多家，利用廢棄果枝栽培香菇的產(chǎn)量超過2萬t，占到該市食用菌產(chǎn)量的1/2。然而，當(dāng)?shù)氐南愎骄N市場(chǎng)混亂，菌種名稱繁雜，有的甚至隨意冠名，標(biāo)新立異，質(zhì)量參差不齊，這些混亂時(shí)常給香菇種植戶和種菇企業(yè)帶來重大經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)也侵犯了育種單位或育種者的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，嚴(yán)重阻礙了我國香菇事業(yè)的發(fā)展[4-5]。

鑒于此，山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所香菇高產(chǎn)栽培技術(shù)研究課題組對(duì)運(yùn)城市15個(gè)香菇菌株進(jìn)行了菌絲長勢(shì)特性研究，并對(duì)其親緣關(guān)系進(jìn)行鑒定，檢測(cè)是否存在“同名異種”、“同種異名”的現(xiàn)象，為菇農(nóng)選購香菇菌種以及后續(xù)的雜交育種等工作提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株15個(gè)香菇供試菌株在運(yùn)城市香菇種植戶和合作社收集和組織分離所得，具體來源和名稱列于表1。

1.1.2 供試培養(yǎng)基馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，KH2PO40.3%，MgSO4·7H2O 0.05%，瓊脂2%[6]。

1.2 試驗(yàn)方法

采用平板培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿直徑為9 cm，每個(gè)培養(yǎng)皿倒入25 mL的PDA培養(yǎng)基。切取直徑0.6 cm的9 d菌齡供試菌株斜面菌絲體，交叉配對(duì)（培養(yǎng)皿內(nèi)平均劃分3等分，挑取大米粒大小的3個(gè)不同菌株種塊分別接于3等分中間位置培養(yǎng)）接入PDA培養(yǎng)基上，放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，25℃避光培養(yǎng)8d[7-8]。觀察菌絲長勢(shì)及色澤，測(cè)定菌絲生長直徑。菌絲長滿后，觀察菌絲相接觸部分有無拮抗線[9]。

菌絲生長速度（mm/d）=菌絲直徑（mm）/生長天數(shù)（d）。

表1 供試菌株來源和名稱

2 結(jié)果與分析

2.1 不同菌株菌絲生長情況比較

從表2可以看出，在相同的培養(yǎng)條件下，不同菌株的菌絲生長勢(shì)和生長速度存在一定的差異。1號(hào)、5號(hào)菌株氣生菌絲長勢(shì)最強(qiáng)，1號(hào)、3號(hào)、6號(hào)、7號(hào)、8號(hào)、9號(hào)、10號(hào)、11號(hào)和14號(hào)菌株基內(nèi)菌絲長勢(shì)最強(qiáng)；2號(hào)菌株菌絲顏色淺白，生長速度最慢，為1.63 mm/d（圖1），7號(hào)菌株菌絲呈淡黃色，并且在拮抗線周圍菌絲顯橘黃色（圖2），12號(hào)和13號(hào)菌株生長速度較快，分別達(dá)到5.59，5.28 mm/d。

表2 不同菌株菌絲生長情況比較

2.2拮抗試驗(yàn)結(jié)果

從表3可以看出，1號(hào)、6號(hào)和9號(hào)兩兩之間沒有拮抗現(xiàn)象，初步認(rèn)定為同一菌株；10號(hào)、11號(hào)、14號(hào)和15號(hào)兩兩之間沒有拮抗現(xiàn)象，認(rèn)定為同一品種，其他菌株兩兩之間有拮抗現(xiàn)象，認(rèn)定為親緣不同的品種。

表315 個(gè)香菇菌株拮抗試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

拮抗反應(yīng)是香菇等食用菌識(shí)別異己保持群體遺傳多樣性的反應(yīng)，它是由基因組內(nèi)異核體不親和位點(diǎn)控制的，是生理水平上鑒定食用菌間遺傳差異的傳統(tǒng)方法[10]。本研究通過拮抗反應(yīng)對(duì)供試菌株進(jìn)行初步分類，結(jié)果表明，1號(hào)、6號(hào)和9號(hào)為同一品種，10號(hào)、11號(hào)、14號(hào)和15號(hào)為同一品種，其他為親緣不同的品種。說明香菇菌種市場(chǎng)混亂，存在“同名異種”、“同種異名”的現(xiàn)象，建議菇農(nóng)選擇菌種時(shí)注意區(qū)分選購。但不同菌株菌絲生長情況比較試驗(yàn)結(jié)果表明，15個(gè)菌株存在顯著差異，原因可能是拮抗試驗(yàn)只是生理水平上鑒定菌株間的親和性，有拮抗線說明待測(cè)菌株與其不是同一菌種，但是同源性較高的菌株間就不一定會(huì)形成拮抗線[11]，因此，親和性的精確鑒定還需進(jìn)一步檢驗(yàn)，如可溶性蛋白電泳、酯酶同工酶電泳、RAPD和AFLP[12]等技術(shù)試驗(yàn)。

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Study on the Mycelium Characteristics and Genetic Relationship of theLentinus edodes（Berk.）singStrains Widely Cultured in Yuncheng

DUANChao1，LI Bo1，XUE Bianli1，CHENLi1，YANGJie2，GUOShang2
（1.Institute ofCotton，Shanxi AcademyofAgricultural Sciences，Yuncheng044000，China；
2.Institute ofEdible Fungi，Shanxi AcademyofAgricultural Sciences，Taiyuan 030031，China）

The antagonistic test,the myceliumgrowth vigor and rate ofdifferent Lentinus edodes（Berk.）sing strains are studied on 15 Lentinus edodes（Berk.）sing strains widelycultured in Yuncheng.The results showed that Gaoxiang 1,931 and Wuxiang 1 were the same variety,Shuitou 808,Xiangyang 2,808 and Lingxian were the same variety,and the others were different breeds.This experiment identified Lentinus edodes（Berk.）sing strains widely cultured in Yuncheng the existence of"heterogenous subere"and"synonyms" phenomenon,and provided scientific basis for the purchase ofthe mushroomspawn.

Lentinus edodes（Berk.）sing;strain;growth speed ofhypha;antagonistic test

S646.1+2

A文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：1002-2481（2017）02-0197-03

10.3969/j.issn.1002-2481.2017.02.12

2016-09-20

山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目（YGG1634）；山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院2016年度種業(yè)項(xiàng)目（20165zyzx52）

段超（1985-），男，陜西西安人，研究實(shí)習(xí)員，主要從事食用菌栽培和育種研究工作。