聚酰胺純化刺玫果總黃酮的工藝研究

王曉林， 金龍哲， 鐘方麗*， 楊文楷

(1.吉林化工學(xué)院 化學(xué)與制藥工程學(xué)院， 吉林 吉林 132022； 2.延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 吉林 延吉 133001)

聚酰胺純化刺玫果總黃酮的工藝研究

王曉林1， 金龍哲2， 鐘方麗1*， 楊文楷1

(1.吉林化工學(xué)院 化學(xué)與制藥工程學(xué)院， 吉林 吉林 132022； 2.延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 吉林 延吉 133001)

探索聚酰胺動(dòng)態(tài)吸附-解吸純化刺玫果總黃酮的工藝條件.以總黃酮的比吸附量、吸附率及比解吸量、解吸率為考察指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)刺玫果總黃酮的純化工藝進(jìn)行優(yōu)化.結(jié)果表明聚酰胺純化刺玫果總黃酮的最佳工藝條件：上樣液總黃酮的質(zhì)量濃度為0.9 mg/mL、上樣量為19.5 mL/g(上樣液體積/聚酰胺質(zhì)量)、上樣液的pH值為2～4、吸附流速為1.5～2.0 mL/min、解吸液為70%乙醇水溶液、解吸流速為1.0～1.5 mL/min、解吸液的pH值為8～9、解吸液用量為12 mL/g(解吸液體積/聚酰胺質(zhì)量).在上述純化條件下，聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的比吸附量平均為11.16 mg/g、比解吸量平均為10.20 mg/g、解吸率平均為91.40%，干浸膏中總黃酮含量由26.32%提高到75%以上.研究結(jié)果為刺玫果的深入開發(fā)提供了依據(jù).

刺玫果； 總黃酮； 聚酰胺； 純化工藝

刺玫果系薔薇科薔薇屬植物山刺玫(RosadavuricaPall.)的成熟果實(shí)，是一種可在保健食品中使用的中藥材，屬于營養(yǎng)成分豐富、用途廣、經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高的野生果類[1-2]，其富含多種人體必需的氨基酸、微量元素、維生素及具有生理活性的黃酮、皂苷類化合物等[3-4]，廣泛分布在吉林省等地區(qū)山坡灌木和雜木林中.刺玫果總黃酮具有防治高血脂、降低血液黏度、除血栓等心腦血管疾病的生理活性[5-6]，另外刺玫果還可用于治療消化不良、食欲不振等[7].現(xiàn)有資料表明黃酮類化合物具有清除自由基、提高機(jī)體免疫力、抗衰老等多種生理活性，在藥品、食品領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[8-10].聚酰胺樹脂法是新發(fā)展起來的一種分離純化黃酮類物質(zhì)較好的方法，它主要通過氫鍵和范德華力對(duì)黃酮類化合物進(jìn)行吸附，具有方法簡單、成本低、穩(wěn)定性高和容易再生等特點(diǎn)，現(xiàn)已廣泛用于黃酮類物質(zhì)的純化[11-12].筆者未見國內(nèi)用聚酰胺吸附純化刺玫果總黃酮的報(bào)道.本研究采用聚酰胺分離純化刺玫果總黃酮，通過考察不同條件下聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附與解吸特性，優(yōu)化了聚酰胺純化刺玫果總黃酮的工藝條件，為刺玫果的深入開發(fā)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1材料與方法

1.1材料與設(shè)備

1.1.1材料與試劑 刺玫果(采自吉林市豐滿區(qū)白山鄉(xiāng))；蘆丁對(duì)照品(中國食品藥品檢定研究院)；DPPH·(上海如吉生物科技有限公司)；鄰二氮菲(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；聚酰胺(14～30目，臺(tái)州市路橋四甲生化塑料廠)；水為重蒸餾水；硝酸鋁、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、無水乙醇等均為國產(chǎn)分析純試劑.

1.1.2儀器與設(shè)備 TU-1810型紫外-可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；RE-52C型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；SHA-B型水浴恒溫振蕩器(金壇市科析儀器有限公司)；FA2004N型電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；XMTD-8222型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司).

1.2數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)，取平均值，數(shù)據(jù)分析采用Origin6.0軟件.

2結(jié)果與分析

2.1樣品總黃酮含量的測定

精密稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品9.17 mg，置50 mL的容量瓶中，加入60%乙醇水溶液，超聲使其溶解，配制成質(zhì)量濃度為0.1834 mg/mL的蘆丁對(duì)照品溶液.精密吸取上述蘆丁對(duì)照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，分別置于25 mL容量瓶中，加入5%亞硝酸鈉溶液1.0 mL，搖勻，放置6 min，加入10%硝酸鋁溶液1.0 mL，搖勻，放置6 min，加入4%氫氧化鈉溶液10.0 mL，60%乙醇水溶液定容，搖勻，放置15 min，以相應(yīng)試劑為空白，按分光光度法于505 nm波長處測定吸光度[13].以蘆丁對(duì)照品溶液的吸光度值為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程：A=13.378C+0.05642，R2=0.9996.結(jié)果表明:蘆丁在0.003 668～0.044 02 mg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系.吸取刺玫果提取液、聚酰胺吸附后的溶液和解吸液各適量，按上述方法進(jìn)行顯色，測定其吸光度，計(jì)算聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的比吸附量、比解吸量和干浸膏中總黃酮的含量[14].

比吸附量(mg/g)=(C0×V0-C1×V1)/m0；

比解吸量(mg/g)=(V2×C2)/m0；

解吸率(%)={(V2×C2)/[(C0×V0-C1×V1)]}×100%；

干浸膏總黃酮含量(%)=(m2/m1)×100%，

式中，C0(mg/mL):刺玫果提取液總黃酮質(zhì)量濃度；C1(mg/mL):聚酰胺吸附后溶液總黃酮質(zhì)量濃度；C2(mg/mL):解吸液中刺玫果總黃酮質(zhì)量濃度；V0(mL):刺玫果提取液體積；V1(mL):吸附后溶液體積；V2(mL):解吸液體積；m0(g):樹脂的稱樣量；m1(mg):解吸液干燥后固體的稱樣量；m2(mg):解吸液中總黃酮的測定量.

2.2聚酰胺的預(yù)處理

稱取聚酰胺適量，置于燒杯中，加入95%乙醇浸泡48 h，水洗至無醇味，用1% NaOH溶液浸泡24 h，水洗至中性，10%醋酸溶液浸泡24 h，水洗至中性，過濾，密封備用[15].

2.3刺玫果提取液的制備

稱取干燥的刺玫果適量，按料液比1∶5(g∶mL)加入70%乙醇水溶液，水浴回流提取3次，每次2 h，合并濾液，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.25(60℃)的稠膏，加蒸餾水定容至250 mL容量瓶中，備用.

2.4工藝條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)

2.4.1聚酰胺的靜態(tài)平衡吸附特征實(shí)驗(yàn) 稱取4 g聚酰胺10份，分別置于10個(gè)100 mL錐形瓶中，各加入40 mL總黃酮質(zhì)量濃度為2.252 mg/mL的刺玫果提取液，在水浴恒溫振蕩器中室溫振蕩，分別在10、20、30、60、90、120、180、240、300、360 min取樣測定上清液的總黃酮質(zhì)量濃度，計(jì)算聚酰胺的比吸附量及吸附率.然后將吸附360 min的聚酰胺過濾，將過濾后的聚酰胺置于100 mL錐形瓶中，加入40 mL的70%乙醇水溶液，在水浴恒溫振蕩器中室溫振蕩0.5、1、2、3、4、6、7、8 h，分別吸取解吸液適量，測定解吸液的總黃酮質(zhì)量濃度，計(jì)算樹脂的比解吸量[16].分別以聚酰胺的比吸附量、比解吸量為縱坐標(biāo)，以吸附時(shí)間、解吸時(shí)間為橫坐標(biāo)繪制靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)曲線，結(jié)果見圖1、圖2.

由圖1 可知，吸附時(shí)間在10～20 min范圍內(nèi)，聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的比吸附量迅速增加，之后吸附時(shí)間在20～120 min范圍內(nèi)，隨著吸附時(shí)間的延長，比吸附量逐漸提高至13.94 mg/g，繼續(xù)延長吸附時(shí)間，比吸附量提高緩慢，當(dāng)吸附時(shí)間為360 min時(shí)比吸附量為14.65 mg/g，由此可見聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的吸附屬于快速平衡型.由圖2可知，在0～4 h 內(nèi)，聚酰胺隨著解吸時(shí)間的延長，比解吸量迅速增加，4 h的比解吸量為13.65 mg/g、解吸率高達(dá)93.17%，繼續(xù)延長解吸時(shí)間，比解吸量緩慢增加，解吸8 h的比解吸量為14.12 mg/g、解吸率為96.37%.由上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的純化具有快速吸附、快速解吸的優(yōu)點(diǎn).

2.4.2聚酰胺的吸附等溫線 稱取16份聚酰胺，各4 g，分別置于100 mL錐形瓶中，加入40 mL不同總黃酮質(zhì)量濃度的刺玫果提取液，在水浴恒溫振蕩器中室溫振蕩12 h，吸取上清液適量，測定其總黃酮質(zhì)量濃度，計(jì)算樹脂的比吸附量、吸附率[16].以聚酰胺的比吸附量及吸附率為縱坐標(biāo)，刺玫果提取液中的總黃酮質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制吸附等溫線，結(jié)果見圖3.由圖3可知，在總黃酮質(zhì)量濃度為0.1～0.9 mg/mL范圍內(nèi)，隨著總黃酮的質(zhì)量濃度的增加，比吸附量及吸附率均逐漸增加，當(dāng)總黃酮的質(zhì)量濃度達(dá)到0.9 mg/mL時(shí)，比吸附量達(dá)到8.07 mg/g、吸附率為89.71%，繼續(xù)提高總黃酮的質(zhì)量濃度，比吸附量增加趨勢緩慢，而且吸附率出現(xiàn)逐漸下降的趨勢.所以將刺玫果提取液總黃酮的上樣濃度確定為0.9 mg/mL.

2.4.3聚酰胺純化刺玫果總黃酮的泄漏曲線 稱取聚酰胺10 g，濕法裝柱，加入300 mL總黃酮質(zhì)量濃度為0.904 5 mg/mL的刺玫果提取液，以2.0 mL/min的流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附，收集流出液，每15 mL為一個(gè)流份，共20個(gè)，測定每個(gè)流份的總黃酮質(zhì)量濃度.以流份體積為橫坐標(biāo)，總黃酮質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo)繪制泄漏曲線[17].結(jié)果見圖4.由圖4可知，隨著刺玫果提取液上樣體積的增加，流出液中的總黃酮質(zhì)量濃度也緩慢增加，當(dāng)流出液收集到第9個(gè)流份(135 mL)的時(shí)候，流出液中的總黃酮質(zhì)量濃度已超過刺玫果提取液總黃酮質(zhì)量濃度的10%，結(jié)果表明此時(shí)已達(dá)到泄漏點(diǎn)，當(dāng)流出液收集到第13個(gè)流份(195 mL)以后，流出液中的總黃酮質(zhì)量濃度變化幅度相對(duì)較小，為了提高聚酰胺的利用率，建議本實(shí)驗(yàn)中刺玫果提取液的上樣體積與聚酰胺質(zhì)量之比(mL∶mg)為19.5∶1.

2.4.4刺玫果提取液pH值對(duì)吸附的影響 吸取7份總黃酮質(zhì)量濃度為0.913 6 mg/mL的刺玫果提取液各195 mL，用5%鹽酸或4%氫氧化鈉溶液分別調(diào)pH為2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0，然后加入到7根裝有10 g聚酰胺的玻璃柱中，以2.0 mL/min的流速進(jìn)行吸附，分別收集流出液，記錄體積，計(jì)算比吸附量.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1.由表1數(shù)據(jù)可知刺玫果提取液pH值在2～4范圍內(nèi)比吸附量較高，而且變化相對(duì)較小.可能因?yàn)榇堂倒崛∫簆H值對(duì)聚酰胺吸附效果的影響主要取決于刺玫果中黃酮類化合物的酸堿度，黃酮類化合物具有多個(gè)酚羥基，呈弱酸性，所以當(dāng)刺玫果提取液pH值在2～4范圍內(nèi)吸附效果比較理想.

2.4.5上樣吸附流速對(duì)吸附的影響 吸取6份總黃酮質(zhì)量濃度為0.907 3 mg/mL的刺玫果提取液各195 mL，將其pH值調(diào)節(jié)在2～4范圍內(nèi)，分別加入到6根裝有10 g聚酰胺的玻璃柱中，分別以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL/min的流速進(jìn)行吸附，分別收集流出液，記錄體積，計(jì)算比吸附量.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2.結(jié)果表明上樣液的吸附流速越小，比吸附量越高，而上樣液的吸附流速越快，聚酰胺的比吸附量越低，當(dāng)上樣液的吸附速率在0.5～2.0 mL/min范圍內(nèi)時(shí)，比吸附量較高，而且變化幅度較小，由于吸附流速越慢耗費(fèi)的時(shí)間也就越長，上樣過程周期就越長，所以綜合考慮將上樣液吸附流速確定為1.5～2.0 mL/min，既保證了上樣速度，又能得到較好的比吸附量.

2.4.6解吸溶媒的選擇 吸取6份總黃酮質(zhì)量濃度為0.911 5 mg/mL的刺玫果提取液各195 mL，將其pH值調(diào)節(jié)在2～4范圍內(nèi)，分別加入到6根裝有10 g聚酰胺的玻璃柱中，控制吸附流速1.5～2.0 mL/min進(jìn)行吸附，分別收集流出液，記錄體積，計(jì)算比吸附量.然后分別用0%、10%、30%、50%、70%、90%乙醇水溶液50 mL進(jìn)行解吸，計(jì)算比解吸量、解吸率.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3.結(jié)果表明隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，總黃酮的比解吸量、解吸率呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)增加到70%時(shí)，比解吸量、解吸率達(dá)到最大值，繼續(xù)提高乙醇體積分?jǐn)?shù)，比解吸量、解吸率呈現(xiàn)下降的趨勢.所以選用70%乙醇水溶液作為解吸溶媒.

2.4.7解吸溶媒解吸流速對(duì)解吸的影響 吸取6份總黃酮質(zhì)量濃度為0.909 5 mg/mL的刺玫果提取液各195 mL，將其pH值調(diào)節(jié)在2～4范圍內(nèi)，分別加入到6根裝有10 g聚酰胺的玻璃柱中，按2.4.6節(jié)方法進(jìn)行吸附，計(jì)算比吸附量.然后用70%乙醇水溶液分別以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL/min的流速進(jìn)行解吸，計(jì)算比解吸量、解吸率.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明解吸流速越慢，解吸效果越好，但解吸流速過慢，解吸耗費(fèi)的時(shí)間就越長，則會(huì)使生產(chǎn)周期延長，增加生產(chǎn)成本.當(dāng)解吸流速在0.5～1.5 mL/min范圍內(nèi)時(shí)總黃酮的比解吸量、解吸率比較高，且變化不大，而當(dāng)解吸流速>1.5 mL/min時(shí)總黃酮的比解吸量、解吸率下降幅度相對(duì)較大.所以將解吸液解吸流速的范圍確定為1.0～1.5 mL/min，這樣既能使比解吸量、解吸率較高，又能縮短生產(chǎn)周期.

2.4.8解吸溶媒pH值對(duì)解吸的影響 吸取8份總黃酮質(zhì)量濃度為0.912 3 mg/mL的刺玫果提取液各195 mL，按2.4.7節(jié)方法進(jìn)行吸附，計(jì)算比吸附量.然后用70%乙醇水溶液以1.0～1.5 mL/min的流速進(jìn)行解吸，計(jì)算比解吸量、解吸率.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5.由表5數(shù)據(jù)可知隨著解吸溶媒pH值的增加，比解吸量、解吸率逐漸提高，當(dāng)解吸溶媒的pH>8以后，比解吸量、解吸率較高，而且變化相對(duì)較小.所以將解吸溶媒的pH值控制在8～9范圍內(nèi)比較理想.

2.4.9解吸終點(diǎn)的考察 吸取總黃酮質(zhì)量濃度為0.902 8 mg/mL的刺玫果提取液195 mL，按2.4.7節(jié)方法進(jìn)行吸附，計(jì)算比吸附量.然后用pH值為8～9的70%乙醇水溶液以1.0～1.5 mL/min的流速進(jìn)行解吸，每15 mL為一個(gè)流份，共收集12個(gè)流份，測定每份解吸液中總黃酮的質(zhì)量濃度，以解吸液中總黃酮質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo)，解吸液體積為橫坐標(biāo)作圖，確定解吸終點(diǎn).結(jié)果見圖5，由圖5可知當(dāng)解吸溶媒用量為120 mL時(shí)，比解吸量、解吸率分別為10.20 mg/g、91.46%，當(dāng)解吸溶媒用量增加到180 mL時(shí)，比解吸量、解吸率分別為10.65 mg/g、95.51%，由于解吸溶媒用量越大，生產(chǎn)成本越高，在本實(shí)驗(yàn)中解吸溶媒用量為120 mL時(shí)即可獲得高于90%的解吸率.所以建議本實(shí)驗(yàn)中解吸液體積與聚酰胺質(zhì)量之比(mL∶mg)為12∶1.

2.5工藝穩(wěn)定性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

稱取3 份已預(yù)處理的聚酰胺各10 g，濕法裝柱，分別加入總黃酮質(zhì)量濃度為0.9155 mg/mL的刺玫果提取液各195 mL，按2.4.7節(jié)方法進(jìn)行吸附，計(jì)算比吸附量.然后用120 mL的70%乙醇水溶液按2.4.8節(jié)方法進(jìn)行解吸附，計(jì)算比解吸量、解吸率.分別吸取刺玫果提取液、解吸液各適量，水浴濃縮，放入電熱鼓風(fēng)干燥箱中于60 ℃干燥至恒重，計(jì)算刺玫果干浸膏中總黃酮的質(zhì)量.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6.由表6可知，經(jīng)聚酰胺處理刺玫果提取液后，刺玫果總黃酮的比吸附量平均為11.16 mg/g，比解吸量平均為10.20 mg/g、解吸率平均為91.40%.干浸膏中總黃酮含量由26.32%提高到75.09%.

2.6刺玫果脫脂的對(duì)比實(shí)驗(yàn)

稱取刺玫果適量，按料液比(g∶mL)1∶5加入石油醚(60～90 ℃)，水浴回流脫脂2次，每次2 h，過濾，將脫脂后的刺玫果于60 ℃烘干.稱取脫脂后的干燥刺玫果，按2.3節(jié)方法制備刺玫果提取液，然后按2.5節(jié)方法實(shí)驗(yàn)，分別計(jì)算比吸附量、比解吸量、解吸率及刺玫果干浸膏中總黃酮的質(zhì)量.稱取刺玫果適量，按2.3節(jié)方法制備刺玫果提取液，水浴濃縮至50 mL，然后用50 mL石油醚對(duì)提取液進(jìn)行脫脂2次，每次1 h.然后按2.5節(jié)方法實(shí)驗(yàn)，分別計(jì)算比吸附量、比解吸量、解吸率及刺玫果干浸膏中總黃酮的質(zhì)量.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6.由表6可知，將刺玫果用石油醚脫脂后，聚酰胺對(duì)總黃酮的比吸附量、比解吸量、解吸率均略有提高，但不明顯.刺玫果提取液脫脂后，聚酰胺對(duì)總黃酮的比吸附量、比解吸量、解吸率的提高幅度高于刺玫果脫脂.無論哪種脫脂方法均可以提高刺玫果干浸膏中總黃酮含量.可能因?yàn)閼?yīng)用石油醚處理后，可以除去葉綠素等脂溶性物質(zhì)，從而使干浸膏中總黃酮含量有所提高.

2.7乙酸乙酯萃取實(shí)驗(yàn)

將2.5節(jié)所得純化的刺玫果干浸膏混合，然后用已經(jīng)干燥過的濾紙包好，將濾紙包放在索氏抽提器內(nèi)，按料液比1∶40 (g∶mL)加入乙酸乙酯，回流萃取4 h，水浴濃縮回收乙酸乙酯，稠膏放入干燥箱中于60 ℃干燥至恒重.稱取干燥至恒重的刺玫果干浸膏0.16 g，精密稱定，加60%乙醇20 mL，超聲使溶解，過濾，濾液置于50 mL容量瓶中，加60%乙醇定容，作為供試品溶液，備用.吸取供試品溶液適量于25 mL容量瓶中，按2.1節(jié)含量測定方法測定干浸膏中總黃酮的質(zhì)量.由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，2.5節(jié)所得的刺玫果干浸膏的總黃酮含量為23.48%，經(jīng)乙酸乙酯萃取后干浸膏中的總黃酮含量提高到83.61%.

3結(jié)論與討論

本實(shí)驗(yàn)以總黃酮的比吸附量、比解吸量、解吸率為考察指標(biāo)，對(duì)聚酰胺純化刺玫果總黃酮的工藝條件進(jìn)行了探索，結(jié)果表明聚酰胺對(duì)刺玫果總黃酮的比吸附量平均為11.16 mg/g，比解吸量平均為10.20 mg/g、解吸率平均為91.40%.通過靜態(tài)、動(dòng)態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)，考察了刺玫果總黃酮在聚酰胺上的吸附特性，確定聚酰胺純化刺玫果總黃酮的工藝條件為：刺玫果提取液控制其總黃酮質(zhì)量濃度在0.9 mg/mL左右；將提取液的pH值調(diào)節(jié)在2～4范圍內(nèi)；提取液的上樣體積與樹脂質(zhì)量之比(mL∶mg)為19.5∶1；吸附流速控制在1.5～2.0 mL/min范圍內(nèi)；解吸溶媒為70%乙醇水溶液；解吸流速控制在1.0～1.5 mL/min范圍內(nèi)；解吸液的pH值調(diào)節(jié)在8～9范圍內(nèi)；解吸液體積與樹脂質(zhì)量之比(mL∶mg)為12∶1.在上述純化工藝條件下，刺玫果提取液經(jīng)聚酰胺純化后，干浸膏中總黃酮含量由26.32%提高到75.09%，總黃酮含量提高了2.85倍，刺玫果提取液采用石油醚脫脂后，干浸膏中總黃酮含量可以提高到79.12%，乙酸乙酯萃取后干浸膏中總黃酮含量由23.48%提高到83.61%.上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果為刺玫果的深入開發(fā)應(yīng)用提供了工作基礎(chǔ).

[1] 鐘方麗， 王曉林， 敬采月. 高效液相色譜法測定刺玫果中金絲桃苷的含量[J].食品科學(xué)， 2010， 31(24):281-284．

[2] 鐘方麗， 陳 帥， 關(guān)曉俠. 微波法提取刺玫果總黃酮工藝研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2010(6):449-451．

[3] 王光函， 張振秋， 張 穎， 等. HPLC法測定刺玫果中蘆丁和金絲桃苷的含量[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2010， 12(6):248-249．

[4] KUANG H X. Chemical constituents of pericarps ofRosadavuricaPall[J]. Chem Pharm Bull， 1989， 37(8): 2232-2234．

[5] 張 遠(yuǎn). 刺玫果提取物對(duì)心血管系統(tǒng)的作用[J].中草藥， 1985， 16(1):20-24．

[6] 韓慧民. 刺玫果總黃酮對(duì)心血管系統(tǒng)的藥理作用[J] .中草藥， 1987， 18(1):23-25．

[7] 程?hào)|巖， 王隸書， 范艷君， 等. 刺玫果總黃酮純化工藝研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥， 2011， 22(3):664-665．

[8] 俞作仁， 王文莉， 呂娟濤. 刺玫果化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥， 2002， 33(2):188-190.

[9] 杜佳林， 顧曉穎， 包玉龍， 等. 刺玫果不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠影響實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥， 2010， 32(11):1967-1969．

[10] 曹緯國， 劉志勤， 邵 云， 等. 黃酮類化合物藥理作用的研究進(jìn)展[J].西北植物學(xué)報(bào)， 2003， 23(12):2241-2247．

[11] 吳新榮， 劉志剛， 顏仁梁， 等. 聚酰胺顆粒分離純化土茯苓總黃酮研究[J].中藥材， 2009， 32(10):1606-1609．

[12] 陶 艷， 黃 松， 羅明琍， 等. 聚酰胺對(duì)獨(dú)腳金總黃酮的純化工藝研究[J].中藥新藥與臨床藥理， 2009， 20(4): 380-383．

[13] 鐘方麗， 楊 揚(yáng)， 王曉林， 等. 刺玫果提取物膠囊定性定量研究[J].華中師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)， 2015， 49(2): 228-232．

[14] 鐘方麗， 王曉林， 王志敏， 等. 大孔吸附樹脂法純化玉竹總黃酮工藝研究[J].食品與機(jī)械， 2013， 29(1): 131-134．

[15] 張 麗， 劉懷金， 閻建輝， 等. 聚酰胺樹脂精制姜黃中姜黃素類化合物的研究[J].精細(xì)化工中間體， 2009， 39(4): 25-27．

[16] 鄭紅巖， 于華忠， 劉建蘭， 等. 大孔吸附樹脂對(duì)藍(lán)莓花色苷的分離工藝[J].林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)， 2014， 34(4): 59-644.

[17] 易海燕， 何桂霞， 歐陽文， 等. 大孔吸附樹脂分離純化藤茶總黃酮的研究[J].中草藥， 2011， 42(1):74-77．

Purification technology of total flavonods inRosadavuricaPall. with polyamide resin methods

WANG Xiaolin1， JIN Longzhe2， ZHONG Fangli1， YANG Wenkai1

(1.School of Chemistry and Pharmaceutical Engineering， Jilin Institute of Chemical Technology， Jilin， Jilin 132022; 2.Yanbian Academy of Agricultural Sciences， Yanji， Jilin 133001)

The purification technology of total flavonoids (TFs) inRosadavuricaPall. with polyamide resin methods by dynamic adsorption-desorption were explored. The purification process of TFs was optimized by single factor and orthogonal test using absorbance， adsorption rate， desorption quantity and desorption rate as indexes for investigation. The results showed that the optimum purification conditions of TFs inRosadavuricaPall. were as follows: for sample solution， the mass concentration of totalflavonoids， loading quantity， pH value and adsorption velocity were 0.9 mg/mL， 19.5 mL/g， 2～4 and 1.5～2.0 mL/min， respectively; 70% (volume fraction) ethanol solution was used as the eluent， of which the desorption velocity， pH value and quantity were 1.0～1.5 mL/min， 8～9 and 12 mL/g， respectively. Under the above purification conditions， the average absorbance of polyamide resin to total flavonoids was 11.159 mg/g， while the average desorption quantity to total flavonoids was 10.204 mg/g. The average desorption rate was 94.44% and the purity of TFs inRosadavuricaPall. extracts elevated from 26.32% to above 75%. The results provided reference for further development and utilization ofRosadavuricaPall．

RosadavuricaPall.; total flavonoids; polyamide; purification

2016-12-10.

吉林省科技廳重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(20170204001YY).

1000-1190(2017)02-0189-06

R944

A

*通訊聯(lián)系人. E-mail: fanglizhong@sina.com.