乙肝相關(guān)性肝癌中甲胎蛋白異質(zhì)體和異常凝血酶原的水平差異

林曉淵

361000福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬廈門市中醫(yī)院檢驗科

乙肝相關(guān)性肝癌中甲胎蛋白異質(zhì)體和異常凝血酶原的水平差異

林曉淵

361000福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬廈門市中醫(yī)院檢驗科

目的：探討乙肝相關(guān)性肝癌不同HBV-DNA載量組別中血清甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)和異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)的水平差異。方法：根據(jù)HBV-DNA病毒載量將患者分為低載量組和高載量組，測定PIVKA-Ⅱ及AFP-L3含量，比較組間差異。結(jié)果：高載量組中AFP-L3和PIVKA-Ⅱ明顯高于低載量組(P＜0.05)。結(jié)論：針對不同患者采取適當(dāng)抗病毒治療，降低病毒拷貝數(shù)，可能有助于改善患者生存期。

乙肝相關(guān)性肝癌；乙肝病毒載量；甲胎蛋白異質(zhì)體；異常凝血酶原

肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一，在我國發(fā)病率排在第3位，其中乙型肝炎病毒(HBV)感染與肝細(xì)胞癌(HCC)的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。肝癌的發(fā)生發(fā)展是由多種因素引起的，常見的誘發(fā)因素有乙肝病毒慢性感染、丙肝、黃曲霉素及遺傳因素等[1]。血清學(xué)中甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)和異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)是近年來用于肝癌早期診斷及判斷預(yù)后的重要指標(biāo)[2，3]。為此本文擬探討乙肝相關(guān)性肝癌患者不同HBV-DNA載量組別中AFP-L3和PIVKA-Ⅱ的差異，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

2012年1月-2016年6月收治乙型肝炎相關(guān)肝癌患者115例，其中男75例，女40例，平均年齡(51.7±12.9)歲。病例納入?yún)⒄?011年衛(wèi)生部《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》的標(biāo)準(zhǔn)[4]。根據(jù)HBV-DNA病毒載量將病例分為低載量組(＜104 IU/mL) 65例和高載量組(≥104 IU/mL)60例。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，有可比性。

檢測指標(biāo)及方法：空腹采集患者2 mL外周靜脈血，置于真空抗凝管中并分離血清，用于檢測血清AFP-L3和PIVKA-Ⅱ的水平，并按照RNA提取試劑盒提取DNA用于HBV-DNA病毒載量測定。PIVKA-Ⅱ采用日本富士G1200化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑，嚴(yán)格按照儀器和試劑說明書進(jìn)行檢測；親和吸附法：從血清中分離AFP-L3，用雅培i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其原裝配套試劑檢測AFP-L3含量。HBV-DNA病毒載量采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)，使用廈門安普利生物工程有限公司生產(chǎn)的乙肝肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒(熒光PCR法)。

統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用(±s)表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

HBV-DNA病毒高載量組中AFP-L3 和PIVKA-Ⅱ分別為(189.7±56.9)ng/mL 和(1 996.1±359.6)mAU/mL，明顯高于低載量組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜0.05)，見表1。

討論

我國是個乙肝感染的大國。乙肝患者由于血清中HBV病毒的復(fù)制，體內(nèi)HBV-DNA可被激活并以肝細(xì)胞內(nèi)cccDNA為模板進(jìn)行大量病毒復(fù)制，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷及肝功能異常，HBV-DNA病毒載量高低與乙肝相關(guān)性肝癌患者肝臟損傷程度具有一定的相關(guān)性[5，6]。

隨著現(xiàn)在臨床診療技術(shù)的不斷發(fā)展，目前用于肝癌診斷的標(biāo)志物主要有甲胎蛋白、AFP-L3、PIVK A-Ⅱ、HCC易感基因等。AFP對原發(fā)性肝癌的診斷具有較高的敏感性和特異性，但有35%～40%原發(fā)性肝癌患者血清AFP濃度升高變化不明顯，有時甚至正常，對于肝癌的早期臨床診斷效能比較低，已經(jīng)無法滿足臨床的需要。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，AFP-L3是AFP的一種亞型，根據(jù)與植物凝集素(LCA)的結(jié)合能力不同分為AFP-L1、 AFP-L2和 AFP-L3， 其 中AFP-L1、AFP-L2為LCA非結(jié)合型，而AFP-L3為LCA結(jié)合型。不同的甲胎蛋白異質(zhì)體，其組織來源不同，其中AFP-L1主要來源于慢性肝炎和肝硬化，AFP-L2以孕婦分泌為主，而AFP-L3為肝癌細(xì)胞分泌的主要因子。AFP-L3是肝癌組織細(xì)胞所特有的，是獨(dú)立于甲胎蛋白的肝癌診斷因子[7-10]，尤其對于小肝癌及AFP陰性的肝癌患者具有重要的診斷意義。近年來異常PIVKA-Ⅱ也是一種常用于肝癌診斷的標(biāo)志物，PIVKA-Ⅱ具有較高的特異性、敏感性，且能較好地反映腫瘤生長情況及病理生物學(xué)特征，同時也可用于臨床預(yù)后評估指標(biāo)，目前也廣泛應(yīng)用于肝癌臨床診療[11-13]。由于PIVKA-Ⅱ和AFP產(chǎn)生的途徑及機(jī)制的不同，因此兩者在血清中含量是相對獨(dú)立的，無相關(guān)性，聯(lián)合檢測有助于提高肝癌檢出的效能。

流行病學(xué)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，慢性HBV感染者中HCC的危險性比非HBV感染者高約200倍，HBV-DNA病毒載量可反映肝細(xì)胞的損傷程度，這可能由于HBV持續(xù)的復(fù)制導(dǎo)致HBV-DNA與肝細(xì)胞DNA整合可導(dǎo)致肝癌的發(fā)生發(fā)展，HBV-DNA病毒載量可用于評估圍手術(shù)期肝癌患者的肝功能。本研究中根據(jù)HBV-DNA病毒載量不同分組，數(shù)據(jù)結(jié)果顯示高載量組(≥104 IU/mL)中AFP-L3和PIVKA-Ⅱ分別為(189.7±56.9)ng/mL和(1 996.1± 359.6)mAU/mL，均高于低載量組(＜104 IU/mL)中 AFP-L3(75.3±23.6)ng/mL和PIVKA-Ⅱ(856.3±239.5)mAU/mL的水平，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=14.46，20.46，均 P＜0.05)。由于 AFP-L3和PIVKA-Ⅱ是肝癌診療預(yù)后的重要實(shí)驗室檢測指標(biāo)，二者的產(chǎn)生途徑，在血清中是相對獨(dú)立的，實(shí)驗數(shù)據(jù)顯示不同HBV-DNA病毒載量水平中AFP-L3和PIVKA-Ⅱ有差異，因此聯(lián)合HBV-DNA病毒載量有助于反映乙肝相關(guān)性肝癌患者肝功能、診療預(yù)后，可用于評估圍手術(shù)期患者的診療方案[14]。

HBV-DNA病毒載量水平對乙肝相關(guān)性肝癌的肝功能具有一定的影響。圍手術(shù)期可以針對患者的HBV-DNA病毒載量水平情況選擇適當(dāng)?shù)目共《局委煼桨福越档筒《究截悢?shù)，同時聯(lián)合AFP-L3和PIVKA-Ⅱ的檢測對患者病情綜合評估，以期改善患者的生活質(zhì)量及生存預(yù)期。

表1 不同HBV-DNA病毒載量中AFP-L3和PIVKA-II的比較(±s)

表1 不同HBV-DNA病毒載量中AFP-L3和PIVKA-II的比較(±s)

HBV-DNA病毒載量 例數(shù) AFP-L3(ng/mL) PIVKA-II(mAU/mL) ＜104 IU/mL 65 75.3±23.6 856.3±239.5 ≥104 IU/mL 60 189.7±56.9 1 996.1±359.6 t 14.46 20.26 P ＜0.05 ＜0.05

[1]王宏利,沙小瑩,郭雅玲,等.乙肝相關(guān)性肝癌組織中HBx和CEACM1的表達(dá)水平及意義[J].中國實(shí)驗診斷學(xué),2016,20(3): 384-385.

[2]趙惠柳,朱波,歐超.肝癌腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用研究現(xiàn)狀[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué),2015,33(5): 523-524.

[3]郭瑋.3種血清腫瘤標(biāo)志物檢測在原發(fā)性肝癌診斷中價值探討[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué), 2014,32(3):315-316.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.原發(fā)性肝癌診療規(guī)范[J].臨床肝膽病雜志,2011,16(10): 1141-1159.

[5]Nan XP,Zhang Y,Yu HT,et al.Inhibition of viral replication downregulates CD4(+)CD25 (high)regulatory T cells and programmed death-ligand 1 in chronic hepatitis B[J]. Viral Immunol,2012,25(1):21-28.

[6]Dinney CM,Zhao LD,Conrad CD,et al. Regulation of HBV specific CD8(+)T cell-mediated inflammation is diversified in differentclinicalpresentations ofHBV infection[J].J Microbiol,2015,53(10): 718-724.

[7]何蘭香,毛智趣,黃海深,等.AFP-L3對肝癌鑒別診斷的臨床價值[J].實(shí)驗與檢驗學(xué), 2013,31(3):258-259.

[8]章健,葉迎賓,黃秀香,等.高爾基體糖蛋白73與甲胎蛋白異質(zhì)體百分比及總膽汁酸在原發(fā)性肝癌的表達(dá)及其臨床應(yīng)用[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2015,22(2):116-118.

[9]陳俊,王利健,駱劍明,等.甲胎蛋白異質(zhì)體在良、惡性肝病中的鑒別和在早期肝癌中的診斷價值[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2015, 25(3):368-370.

[10]曹立,孫華寶,敖琴芳,等.ROC曲線評價甲胎蛋白異質(zhì)體對原發(fā)性肝癌的診斷價值[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(5):465-467.

[11]Inagaki Y,Tang W, Makuuchi M, et al. Clinical and molecular insights into the hepatocellularcarcinoma tumourmarker des-γ-carboxyprothrombin[J]. Liver Int, 2011,31(1):22-35.

[12]朱宇,王海,王宏潔,等.血清PIVKA-II在肝癌診斷中的應(yīng)用[J].臨床和實(shí)驗醫(yī)學(xué)雜志, 2014,13(7):513-516.

[13]Kang K,Kim JH,Kang SH,et al.The influence of alcoholic liver disease on serum PIVKA-Ⅱ levels in patients without hepatocellular carcinoma[J].Gut Liver,2015,9(2):224-230.

[14]Abd E,Gawad IA,Mossallam GI,et al.Comparing prothrombin induced by vitamin K absence-Ⅱ(PIVKA-Ⅱ)with the oncofetal proteins glypican-3,Alpha feto protein and carcinoembryonic antigen in diagnosing hepatocellular carcinoma among Egyptian patients[J].J Egypt Natl Canc Inst,2014,26(2): 79-85.

Differential levels of alpha fetal protein variant and abnormal prothrombin in HBV related hepatocellular carcinoma

Lin Xiaoyuan
Department of Laboratory,the Traditional Chinese Medicine Hospital of Xiamen City Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine 361000

Objective:To explore the differential levels of alpha fetal protein variant(AFP-L3)and abnormal prothrombin(PIVKA-Ⅱ)in HBV related hepatocellular carcinoma with different HBV-DNA load.Methods:According to HBV-DNA viral load,patients were divided into the low load group and the high load group.We measured the content of PIVKA-Ⅱand AFP-L3,and compared the differences between groups.Results:In the high load group,AFP-L3 and PIVKA-Ⅱwere significantly higher than those in the low load group(P＜0.05).Conclusion:For different patients,appropriate antiviral treatment to reduce the number of copies of the virus may help improve patient survival.

HBV related hepatocellular carcinoma;Hepatitis B virus load;Alpha fetal protein variant;Abnormal prothrombin

10.3969/j.issn.100614x.2017.2.80