孕產(chǎn)婦胃幽門螺桿菌感染常見檢測(cè)方法的比較

王玥 李滿元 王明嫻 王倩

孕產(chǎn)婦胃幽門螺桿菌感染常見檢測(cè)方法的比較

王玥 李滿元 王明嫻 王倩

目的探討幾種不同檢測(cè)方法對(duì)胃幽門螺桿菌(Hp)感染診斷的價(jià)值,從而尋求最適合孕產(chǎn)婦的檢測(cè)方法。方法以13C尿素呼氣試驗(yàn)(13C UBT)作為“金標(biāo)準(zhǔn)”,對(duì)由于消化系統(tǒng)癥狀就診的309例孕產(chǎn)婦分別采用Hp免疫球蛋白G(IgG)抗體檢測(cè)、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡法(IBT)進(jìn)行檢測(cè),觀察各種檢測(cè)方法診斷Hp感染的效果。結(jié)果13C UBT與Hp IgG抗體檢測(cè)Hp檢出率比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.541,P＜0.05)、13C UBT與ELISA檢出率比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.870,P＜0.05),13C UBT與IBT檢出率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.428,P＞0.05)。準(zhǔn)確度方面,IgG抗體檢測(cè)為76.70%,ELISA為76.38%,IBT為85.11%。敏感度由高到低分別為Hp IgG抗體檢測(cè)、ELISA、IBT,特異度由高到低分別為IBT、ELISA、Hp IgG抗體檢測(cè)。Hp IgG抗體檢測(cè)Kappa值為0.424,ELISA為0.537,IBT為0.759。結(jié)論Hp IgG抗體檢測(cè)可以作為Hp感染大批量的流行病學(xué)調(diào)查,但不適合胃Hp的篩查。ELISA操作簡(jiǎn)單,近乎無放射性污染,敏感度也相對(duì)較高,經(jīng)常用于流行病學(xué)的調(diào)研及大批體檢患者的檢測(cè)。IBT診斷真實(shí)性中等,特異性相比較而言略高,檢測(cè)結(jié)果可以對(duì)胃Hp的感染分型,對(duì)進(jìn)一步深入了解病情變化做可靠的依據(jù),可作為輔助診斷。

胃幽門螺桿菌; 孕產(chǎn)婦;13C尿素呼氣試驗(yàn)

目前檢驗(yàn)胃Hp宏觀上分為侵襲類和非侵襲類兩種方法,具有侵襲類檢測(cè)法主要包括病理組織切片的送檢、快速尿素酶實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)等；其中非侵襲類檢測(cè)法有膠體金技術(shù)、血清學(xué)抗體檢查、糞便抗原檢測(cè)和碳呼氣試驗(yàn)等［1-4］。由于本次研究對(duì)象為孕產(chǎn)婦,鑒于其不適宜侵襲類檢查的特殊性,本項(xiàng)研究使用臨床多采用非侵襲類Hp檢測(cè)法進(jìn)行綜合的評(píng)定,為臨床工作中選擇合適Hp診斷提供可行的、有力的依據(jù),研究結(jié)論報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2015年7月～2016年7月錦州各醫(yī)院來就診的309例孕產(chǎn)婦為研究對(duì)象,納入標(biāo)準(zhǔn)［5］：無胃部、食管等消化器官手術(shù)史；在30 d內(nèi)沒有使用過鉍劑、治療消化性潰瘍藥物、抗酸藥或抗生素類等藥物；6個(gè)月內(nèi)沒有進(jìn)行口腔治療；爭(zhēng)得患者及患者家屬同意。孕產(chǎn)婦年齡22～35歲。

1.2 方法 孕產(chǎn)婦分別采用Hp IgG抗體檢測(cè)、ELISA、IBT、13C UBT方法進(jìn)行檢測(cè),并將13C UBT作為“金標(biāo)準(zhǔn)”,并進(jìn)行記錄分析。

1.2.1 Hp IgG抗體檢測(cè) 采用MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的Hp IgG抗體檢測(cè)試劑盒；采集患者血液離心,加入25 μl的血清或血漿樣本至加樣方孔,并按照試劑盒說明書正確操作后,于15 min后讀取結(jié)果。

1.2.2 ELISA 當(dāng)日就診的患者檢查糞便標(biāo)本,采用ELISA試驗(yàn)(雙抗體夾心法),對(duì)其Hp抗原進(jìn)行檢測(cè),所用試劑由艾康生物技術(shù)有限公司研發(fā)生產(chǎn)。

1.2.313C UBT 清晨,收集前來就診患者在空腹時(shí)向收集管緩慢的呼氣,收集后立刻密封； 讓患者服用1顆13C尿素膠囊,使其在30 min后按相同的方法再次收集； 然后采用13C UBT對(duì)收集到的氣體進(jìn)行檢驗(yàn)并分析其報(bào)告結(jié)果。判斷結(jié)論如下:A 值≥4.0為Hp陽(yáng)性,證明存在胃Hp感染；相反則無感染。

1.2.4 IBT 抽取患者靜脈血3 ml,分離血清于-20 ℃保存待檢。將Hp抗原用SDS聚酰胺凝膠電泳法,依照分子量不同大小分離,并轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上；檢驗(yàn)在抗原的相應(yīng)位置出現(xiàn)顯色帶的血清中的抗體,依據(jù)試劑說明書判斷,判斷存在Hp陽(yáng)性類型,試劑由深圳市伯勞特生物制品有限公司生產(chǎn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)；一致性采用Kappa檢驗(yàn),其Kappa值增大,符合程度越完美,即診斷試驗(yàn)的穩(wěn)定性越強(qiáng)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

13C UBT與Hp IgG抗體檢測(cè)Hp檢出率比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.541,P＜0.05)、13C UBT與ELISA檢出率比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.870,P＜0.05),13C UBT與IBT檢出率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.428,P＞0.05)。見表1。以13C UBT為“金標(biāo)準(zhǔn)”,準(zhǔn)確度方面,IgG抗體檢測(cè)為76.70%,ELISA為76.38%,IBT為85.11%。敏感度由高到低分別為Hp IgG抗體檢測(cè)、ELISA、IBT,特異度由高到低分別為IBT、ELISA、Hp IgG抗體檢測(cè)。見表2。各檢測(cè)方法Kappa值比較 Hp IgG抗體檢測(cè)Kappa值0.424,ELISA為0.537,IBT為0.759。

表2 三種檢測(cè)方法特異度、敏感度及準(zhǔn)確度情況(%)

3 討論

Hp是全球最常見的病原體之一,感染率＞50%。Hp是定植于人類胃黏膜上的一種生長(zhǎng)緩慢的革蘭陰性微需氧菌,是引起慢性B型胃炎、胃潰瘍及胃黏膜相關(guān)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素［6］。由于胃炎、胃潰瘍有可產(chǎn)生胃絞痛、反酸、打嗝、餐后胃痛、惡心嘔吐等一系列癥狀,其中嘔吐又是早期妊娠反應(yīng)的主要癥狀,嚴(yán)重的妊娠嘔吐患者可伴有體重下降、電解質(zhì)紊亂等癥狀,對(duì)孕產(chǎn)婦健康危害極大。據(jù)研究顯示,早期妊娠嘔吐與Hp感染有關(guān)［7］,Hp感染可能加重早期妊娠嘔吐,同時(shí)由于妊娠時(shí)母體內(nèi)甾體激素水平增高,細(xì)胞內(nèi)、外液增加,胃腸道內(nèi)pH值會(huì)發(fā)生改變,同時(shí)也增大Hp感染的風(fēng)險(xiǎn)。Hp感染是一個(gè)公共健康問題［8］,主要通過糞-口、口-口等途徑傳播,同時(shí)與社會(huì)經(jīng)濟(jì)等各方面條件較差、飲用水污染、基本衛(wèi)生環(huán)境不達(dá)標(biāo)、不良飲食習(xí)慣有關(guān),且其感染存在家庭聚集性。近年來,越來越多的研究表明,Hp的危害不僅局限于胃內(nèi),已超越了消化系統(tǒng),如孕產(chǎn)婦營(yíng)養(yǎng)性缺鐵性貧血等,以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病如老年癡呆、帕金森綜合征、偏頭痛等［9］。有文獻(xiàn)報(bào)道［10］中國(guó)Hp 感染率高于歐洲和美國(guó),其發(fā)病率為42%～64%。

本研究對(duì)象為錦州市因消化道癥狀就診的孕產(chǎn)婦309例,由于研究對(duì)象的特殊性,排除侵襲性的試驗(yàn)方法,僅對(duì)非侵襲性的常見的三種檢查方法進(jìn)行研究,得出Hp血清IgG抗體檢測(cè)不可以作為Hp感染篩查的方法,但可以作為大批量的流行病學(xué)調(diào)查的結(jié)論,與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果相符合。

金明哲［11］對(duì)13C UBT是一種非侵襲性檢測(cè)方法研究結(jié)果,該方法具快速、準(zhǔn)確、特異性和敏感性高的優(yōu)點(diǎn),在國(guó)外用于Hp感染檢測(cè)有10多年時(shí)間,目前成為Hp根除治療隨訪的主要觀察方法,是檢測(cè)Hp 感染的金標(biāo)準(zhǔn)［12］。該試驗(yàn)通過口服或靜脈給予將穩(wěn)定核素13C標(biāo)記的底物引入人體后,再利用同位素比值質(zhì)譜儀等設(shè)備檢測(cè)最終產(chǎn)物變化來進(jìn)行研究,主要針對(duì)機(jī)體代謝反應(yīng)和器官功能［13］。試驗(yàn)整個(gè)過程簡(jiǎn)單、試劑安全,適用于兒童、孕婦等高危險(xiǎn)人群的臨床診斷和研究的設(shè)計(jì)［14］。但是費(fèi)用較昂貴,不適宜大批量流行病學(xué)的檢查。血清抗體檢測(cè)法檢出率較高,目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用且適用大批量的流行病學(xué)調(diào)查［15,16］,此種檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便,快速,創(chuàng)傷小,但是其特異性和準(zhǔn)確度相對(duì)較低,Kappa值偏低,不適合作為胃Hp的篩查。ELISA的敏感度較高,特異度較低。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的條件很可能與假陽(yáng)性有關(guān);就診患者標(biāo)本糞便成分較為復(fù)雜,糞便中含有大量各種類型的細(xì)菌,抗原成分相當(dāng)多樣化,抗原抗體存在交叉反應(yīng),并造成假陰性數(shù)量的出現(xiàn)。單一用ELISA作為診斷胃Hp感染依據(jù)是不合適的,弱陽(yáng)性時(shí)缺乏明確診斷依據(jù)和指標(biāo)。IBT的Hp檢出率與13C UBT比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),研究發(fā)現(xiàn)IBT檢出率和檢測(cè)敏感度都相對(duì)較低,提示IBT可能會(huì)出現(xiàn)Hp感染的漏診率。優(yōu)點(diǎn)是特異性高,IBT診斷的真實(shí)性為中等,不可能作為單一檢驗(yàn)的根據(jù),但可以成為輔助診斷的方法之一,通過聯(lián)合檢驗(yàn)來提高對(duì)胃Hp感染的診斷率。有相關(guān)文獻(xiàn)表明［17］,病理組織切片檢查敏感度和可靠性都比較高,可以很好的反映出患者是否存在Hp 感染,但同期病理組織切片檢查給患者帶來痛苦,目前雖有無痛檢查的技術(shù)手段,但針對(duì)孕產(chǎn)婦在妊娠期間用藥非常局限,不當(dāng)?shù)乃幤凡粌H損害孕婦健康,更會(huì)對(duì)胎兒造成不利影響,故不適合體檢普查,本文不作過多贅述。隨著社會(huì)的進(jìn)步,醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的不斷發(fā)展和科技水平的不斷提高,將會(huì)有更多更便捷具有更高診斷價(jià)值的檢測(cè)方法可供臨床選擇,本文建議孕產(chǎn)婦患者孕前做好全面檢查,從而減少Hp感染對(duì)人類健康的危害,做到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù),尤其希望孕產(chǎn)婦都孕育健康的寶寶。

綜上所述,Hp IgG抗體檢測(cè)可以作為Hp感染大批量的流行病學(xué)調(diào)查,但不適合胃Hp的篩查方法。ELISA操作簡(jiǎn)單,近乎無放射性污染,敏感度也相對(duì)較高,經(jīng)常用于流行病學(xué)的調(diào)研及大批體檢患者的檢測(cè)。IBT診斷真實(shí)性中等,特異性相比較而言略高,檢測(cè)結(jié)果可以對(duì)胃Hp的感染分型,對(duì)進(jìn)一步深入了解病情變化做可靠的依據(jù),可作為輔助診斷。

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Comparison of common detection measures for helicobacter pylori infection in pregnant women

WANG Yue,LI Man-yuan,WANG Ming-xian,et al.Liaoning Jinzhou City Linghe District Maternal and Child Health Care Hospital,Jinzhou 121000,China

ObjectiveTo investigate diagnostic value of different detection measures for helicobacter pylori(Hp) infection,so as to select the most suitable method in detection.Methods13C urea breath test(13C UBT) was taken as gold standard for 309 pregnant women with gastrointestinal symptoms detected by Hp immune globulin G(IgG) antibody test,enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA) and immunoblotting(IBT).Observation was made on effects by various measures in diagnosis of Hp infection.ResultsThe difference of Hp detection rate had statistical significance between13C UBT and IgG antibody test(χ2=15.541,P＜0.05),and the difference of detection rate between13C UBT and ELISA also had statistical significance(χ2=8.870,P＜0.05).There was no statistically significant difference of detection rate between13C UBT and IBT(χ2=0.428,P＞0.05).IgG antibody test had accuracy as 76.70%,ELISA as 76.38% and IBT as 85.11%.Hp IgG antibody test,ELISA,and IBT respectively showed their sensitivity from high to low,while IBT,ELISA and Hp IgG antibody test showedspecificity from high to low.Hp IgG antibody test had Kappa value as 0.424,ELISA as 0.537,IBT as 0.759.ConclusionAs a common method for epidemiological investigation of massive Hp infection,Hp IgG antibody test is not suitable for Hp screening.Due to its easy operation,non radioactive pollution and high sensitivity,ELISA is usually applied in epidemiological research and massive detection.IBT shows moderate accuracy in diagnosis and slightly high specificity,and its test outcome can classify Hp infection.Due to its creditable reference for further disease changes,it can be taken as assistant diagnosis.

Helicobacter pylori; Pregnant women;13C urea breath test

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.01.015

2016-12-07］

121000 遼寧省錦州市凌河區(qū)婦幼保健院(王玥)；遼寧省錦州市婦嬰醫(yī)院(李滿元 王明嫻)；遼寧省錦州市中心醫(yī)院(王倩)