L-茶氨酸對大鼠內臟組織抗氧化能力及相關基因表達的影響

李成艦，童海鷗，顏瓊嫻?，韓雪峰，肖文軍?，譚支良

（1.湖南農業大學園藝園林學院，湖南農業大學茶學教育部重點實驗室，湖南省植物功能成分利用協同創新中心，湖南 長沙 410128；2.中國科學院亞熱帶農業生態研究所，亞熱帶農業生態過程重點實驗室，湖南省畜禽健康養殖工程技術中心，農業部中南動物營養與飼料科學觀測試驗站，湖南 長沙 410125；3.永州職業技術學院藥學系，湖南 永州 425100）

L-茶氨酸對大鼠內臟組織抗氧化能力及相關基因表達的影響

李成艦1,2,3，童海鷗1,2，顏瓊嫻2,?，韓雪峰1,2，肖文軍1,?，譚支良2

（1.湖南農業大學園藝園林學院，湖南農業大學茶學教育部重點實驗室，湖南省植物功能成分利用協同創新中心，湖南 長沙 410128；2.中國科學院亞熱帶農業生態研究所，亞熱帶農業生態過程重點實驗室，湖南省畜禽健康養殖工程技術中心，農業部中南動物營養與飼料科學觀測試驗站，湖南 長沙 410125；3.永州職業技術學院藥學系，湖南 永州 425100）

目的：通過對大鼠灌胃L-茶氨酸溶液，觀察大鼠心臟、肝臟、脾臟和腎臟中抗氧化指標的變化，探究L-茶氨酸對大鼠心、肝、脾和腎抗氧化能力及其相關酶mRNA表達量的影響。方法：64 只SD大鼠隨機分為對照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組4 組（每組16 只，雌雄各半），分別灌胃0、50、200、400 mg/（kg·d）L-茶氨酸。連續灌胃14 d后采集內臟組織，采用試劑盒檢測樣品中丙二醛（malondialdehyde，MDA）與一氧化氮（nitric oxide，NO）的含量，以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GPX）、過氧化氫酶（catalase，CAT）和一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）的活性，并采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）法測定相應抗氧化酶的mRNA表達量。結果：L-茶氨酸灌胃影響大鼠心臟組織的NO含量，以及SOD、CAT與NOS活力，其中高劑量組大鼠心臟組織中NO含量最低，SOD與CAT活力最大；同時影響大鼠腎臟中NO的含量，高劑量組最低；但對除上述指標外的肝、脾、腎、心的MDA與NO含量，以及SOD、CAT、GPX與NOS活力無顯著影響。低劑量L-茶氨酸灌胃顯著抑制肝臟中SOD1 mRNA的表達和脾臟中SOD1、SOD3、GPX1 mRNA的表達；高劑量L-茶氨酸則上調脾臟SOD2 mRNA的表達；同時各劑量組心臟組織中的SOD1、SOD2、SOD3、GPX1 mRNA的表達量都顯著增加。結論：L-茶氨酸灌胃增強了心臟的抗氧化能力，其機制可能是通過上調了大鼠心臟中SOD2基因的mRNA的表達，從而增加心臟中SOD的活性，起到抗氧化的保護作用。同時，L-茶氨酸灌胃對大鼠內臟抗氧化功能的影響存在性別差異。

L-茶氨酸；抗氧化能力；內臟組織；基因表達；大鼠

L-茶氨酸是茶葉中特有的一種非蛋白氨基酸，是茶葉的重要活性成分，具有多種生理功能，包括抗氧化應激[1-2]、提高機體免疫功能[3-4]、抗腫瘤[5-6]、抗熱應激與抗衰老[7]等。目前，關于L-茶氨酸的抗氧化應激功能的研究主要集中在兩個方面，第一個方面是提高肝臟的抗氧化能力，抗氧化性肝損傷和肝細胞凋亡。汪麗偉等[8]研究發現，日糧中添加200 mg/kg的L-茶氨酸可以顯著增強1 日齡仔雞肝臟的過氧化氫酶（catalase，CAT）活性，降低丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；在熱應激條件下，飼喂含200 mg/kg的L-茶氨酸和200 mg/kg的茶多酚的飼料，對仔雞肝臟的抗氧化效果最佳。研究表明，腹腔注射L-茶氨酸（10 mg/（kg·d）（以體質量計，下同））能使酒精性肝損傷小鼠肝臟中的還原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）增加從而增強其抗氧化能力[9-10]。進一步的研究表明，在喂服酒精（乙醇體積分數50%，劑量3 g/kg）1 h后，頸靜脈注射L-茶氨酸（100 mg/kg），小鼠血液中的酒精濃度顯著降低，肝臟中的乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的活性增加；服用酒精3 h后，肝臟中的脂質過氧化產物濃度增加；但是同時服用L-茶氨酸后，能夠抑制脂質過氧化產物的上升直至恢復到正常水平[10]。研究表明，口服L-茶氨酸能夠抑制乙醇導致的雄性ICR小鼠（6～7 周齡，18～22 g）肝臟中丙氨酸轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸轉氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、甘油三酸酯（triglyceride，TG）和MDA的升高，同時也可以抑制肝臟抗氧化能力的降低[11]。這一結果表明L-茶氨酸能通過提高抗氧化能力預防乙醇導致的肝細胞損傷。據報道，預先給小鼠喂服L-茶氨酸能抑制CCl4導致的肝臟氧化應激損傷[12]。進一步研究表明，L-茶氨酸還能抑制氧化應激介導的炎癥反應，包含血清中腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α和白細胞介素（interleukin，IL）-1β的增加，以及肝臟中環氧合酶（cyclooxygenase，COX）-2和誘導型一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）的表達，從而減少肝細胞的凋亡。第二個方面是保護內臟組織，減輕心臟和肝臟氧化應激作用，并協助增強其他藥物的抗氧化效果。研究表明，L-茶氨酸能夠減輕小鼠體內阿霉素氧化應激造成的不良反應[13-14]。其機制是L-茶氨酸增加了心臟與肝臟中谷氨酸的濃度，抑制了阿霉素引起的GSH減少[5]。研究表明，L-茶氨酸單獨處理小鼠巨噬細胞（RAW264.7）并沒有顯示出明顯抗氧化作用；而L-茶氨酸和表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）聯合使用可協同降低胞內ROS和MDA含量，增強谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GPX）的活性，表明L-茶氨酸和EGCG對提高細胞抗氧化能力具有協同增效作用[15]。

盡管L-茶氨酸的抗氧化功效已毋庸置疑，但是具體的分子調節機制尚不完全明確，L-茶氨酸對大鼠內臟組織是否同樣具有抗氧化調節作用，目前缺乏相關研究報道。鑒于幼鼠處于快速生長發育階段，且雌雄大鼠4周內體質量變異度不是很大[16]。同時，研究表明，不同日齡斷奶均使仔豬在斷奶1 周內遭受嚴重的應激反應，SOD和GPX的活力明顯下降[17]。我們推測3 周齡幼鼠存在一定的心理應激和機體抗氧化功能失調的狀況。因此，本實驗以3 周齡大鼠為實驗對象，灌胃L-茶氨酸2 周，測定內臟組織MDA和NO含量以及SOD、CAT、GPX和NOS活力，同時測定相關抗氧化酶基因（SOD1、SOD2、SOD3和GPX1）的mRNA表達量，旨在探討L-茶氨酸對大鼠內臟組織抗氧化能力的調節作用及其機理。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

3 周齡清潔級SD大鼠，體質量范圍為74～92 g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司。S D大鼠的生產許可證號為SCXK（湘）2013-0004；合格證號為43004700008040；使用許可證號為KYNEAAM-2013-0009。

L-茶氨酸（99.2%） 雅星生物科技有限公司；CAT活性檢測酶聯免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒 武漢華美生物工程有限公司；NO、MDA含量檢測試劑盒、SOD、NOS與GPX活性檢測試劑盒 南京建成生物工程研究所；Trizol試劑盒 美國Invitrogen公司；聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）擴增試劑盒 日本Takara公司；RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis 試劑盒 美國Thermo Fisher 公司。

1.2 儀器與設備

PowerGen125高速勻漿機 賽默飛世爾科技公司；CR22GII高速冷凍離心機 日本日立公司；Allegra x-22r臺式離心機 美國Beckman Coulter公司；ABI7900HT熒光定量PCR儀 美國應用生物系統公司；M2104電子天平 梅特勒-托利多國際股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 實驗設計

3 周齡的64 只大鼠，單籠喂養，自由進食顆粒飼料和飲用純凈水，控制實驗條件為溫度（25±3）℃、相對濕度（70±5）%和12 h的光暗循環，適應性喂養3 d后隨機分為4 組：對照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組，每組16 只，雌雄各半。灌胃前先記錄大鼠體質量，然后各組按體質量分別灌胃0、50、200、400 mg/（kg·d）L-茶氨酸溶液（L-茶氨酸溶解于生理鹽水），根據大鼠體質量和灌胃用藥劑量配制相應的藥物濃度。每天灌胃1 次（15～17時），每只每次灌胃量約為體質量的1%（0.8～2.0 mL）。連續灌胃14 d。

1.3.2 樣品采集

大鼠被L-茶氨酸灌胃14 d后，禁食不禁水24 h，裝入預置乙醚的密封標本缸內麻醉4 min左右至深度昏迷，噴灑醫用酒精消毒，斷頭處死。按照解剖學的方法，在無菌操作臺內迅速采集肝臟、脾臟、腎臟和心臟，預冷生理鹽水沖洗，剪碎后錫箔紙包裹，液氮速凍，－80 ℃冰箱凍存備用。

1.3.3 樣品分析

1.3.3.1 抗氧化指標

樣品解凍后，每500 mg樣品中加入1 mL 0.01 mol/L鹽酸，制成勻漿，在4 ℃以3 500 r/min離心10 min，收集上清液，進行進一步的檢測。CAT活性參照武漢華美ELISA試劑盒說明書測定；NO和MDA含量，SOD、NOS和GPX活性均按照南京建成的試劑盒說明書進行測定。

1.3.3.2 RNA提取與實時熒光定量PCR

參照周笑犁等[18]的方法進行RNA提取和qPCR定量。采用Trizol法提取肝臟、脾臟和心臟的總RNA，經紫外分光光度計測得A260nm與A280nm比值在1.8～2.0之間，瓊脂糖凝膠電泳法評價RNA的質量。參照Fermentas反轉錄試劑盒說明書分別將各樣品的總RNA進行逆轉錄合成cDNA，并以此為模板采用實時熒光定量PCR方法測定SOD1、SOD2、SOD3和GPX1的mRNA表達量。引物采用Primer 5.0軟件設計，由上海生工生物有限公司合成，序列見表1。以β-肌動蛋白（β-actin）為內參，進行PCR反應，反應體系為10 μL，其中包括：5 μL 2×SYBRPremix Ex TaqTM，0.2 μL 10 μmol/L PCR正向引物，0.2 μL 10 μmol/L PCR反向引物，0.2 μL 50×ROX參考染料，1.0 μL cDNA和3.4 μL 滅菌的ddH2O。反應采用兩步法，其條件為：95 ℃預變性30 s，95 ℃變性5 s，60 ℃退火30 s，熒光檢測15 s，共40 個循環。每個反應體系設置2 個重復，每次循環的最后一步收集SYBR Green熒光，循環結束時從60 ℃開始繪制熔解曲線。根據目的基因和β-actin的閾值循環（Ct），采用2-ΔΔCt法[19]，計算樣品中各抗氧化基因mRNA的相對表達量。

表1 熒光定量引物信息Table1 Information about the primers used for real-time quantitative PCR

1.4 數據統計分析

采用SAS 8.2軟件對實驗數據進行分析。以L-茶氨酸為主要因素，性別為次要因素，不同L-茶氨酸劑量的差異采用Tukey選項進行多重比較。采用系統分組設計，采用正交對比L-茶氨酸的劑量效應，以每組雌、雄性大鼠檢測之和做各組之間兩兩比較，進行一次和二次效應分析。統計結果以±s表示，P＜0.05和P＜0.01分別表示差異顯著和差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 L-茶氨酸灌胃對大鼠內臟組織抗氧化指標的影響

由表2可知，在肝臟組織中，L-茶氨酸灌胃對MDA含量，以及SOD、CAT、GPX、NOS活力均沒有顯著影響。高劑量組雌性大鼠的CAT活力低于雄性（P=0.032）；對照組雌性大鼠的GPX活力高于雄性（P=0.017）；中劑量組雌性大鼠的NOS活力高于雄性（P=0.047）。

由表3可知，在脾臟組織中，L-茶氨酸灌胃對MDA、 NO含量，以及SOD、CAT、GPX和NOS活性均沒有顯著影響。對照組（P=0.009 5）與低劑量組（P=0.046）雌性大鼠的MDA含量低于雄性。

由表4可知，在腎臟組織中，L-茶氨酸灌胃影響NO含量（二次效應，P＜0.0001），中劑量組增加，高劑量組下降；對其他指標無顯著影響。

由表5可知，在心臟組織中，NO含量隨著L-茶氨酸灌胃劑量的增加而下降（一次效應，P=0.005）；L-茶氨酸劑量對SOD活力（一次效應，P=0.004；二次效應，P=0.044）、CAT活力（二次效應，P=0.000 7）和NOS活力（二次效應，P=0.028）均有影響，高劑量組三者活力最高，中劑量組活力最低；對MDA含量和GPX活力無顯著影響（P＞0.05）。低劑量組雌性大鼠的MDA含量顯著低于雄性（P＜0.000 1）；對照組雌性大鼠的CAT活性顯著低于雄性（P=0.015）；高劑量組雌性大鼠的CAT活性顯著高于雄性（P=0.000 1）；對照組雌性大鼠的GPX（P=0.044）與NOS（P=0.039）的活性顯著低于雄性。

表2 L-茶氨酸給藥對大鼠肝臟組織抗氧化的影響Table2 Effect o f L-theanine administration on antioxidant indexes in the rat liver

表3 L-茶氨酸給藥對大鼠脾臟組織抗氧化的影響Table3 Effect of L-theanine administration on antioxidant indexes in the rat spleen

表4 L-茶氨酸給藥對大鼠腎臟組織抗氧化指標的影響Table4 Effect of -theanine administration on antioxidant indexes in the rat kidney

表5 L-茶氨酸給藥對大鼠心臟組織抗氧化的影響Table5 Effect o f L-theanine administration on antioxidant indexes in the rat heart

表6 L-茶氨酸給藥對大鼠肝臟抗氧化基因表達量的影響Table6 Effect of L-theanine administration on the mRNA expression of antioxidant genes in the rat liver

表7 L-茶氨酸給藥對大鼠脾臟抗氧化基因表達量的影響Table7 Effect of -theanine administration on the mRNA expression of antioxidant genes in the rat spleen

表8 L-茶氨酸給藥對大鼠心臟抗氧化基因表達量的影響Table8 Effect of -theanine administration on the mRNA expression of antioxidant genes in the rat heart

2.2 L-茶氨酸灌胃對大鼠內臟組織抗氧化基因表達的影響

由表6可知，在肝臟組織中，L-茶氨酸灌胃劑量顯著影響SOD1（一次效應，P=0.036；二次效應，P=0.002）的mRNA表達，低劑量抑制SOD1表達，高劑量則上調其表達量；但L-茶氨酸劑量對SOD2、SOD3和GPX1的mRNA表達沒有顯著影響。各處理組雌性大鼠的SOD1（分別是P=0.003、P＜0.000 1、P＜0.000 1）和SOD2（分別是P =0.001 3、P=0.000 1、P＜0.000 1）以及高劑量組雌性大鼠的GPX1（P＜0.000 1）的mRNA表達量顯著低于雄性。

在脾臟組織中（表7），L-茶氨酸灌胃顯著下調SOD1的mRNA的表達（一次效應，P＜0.000 1；二次效應，P =0.000 2）；L-茶氨酸劑量也顯著影響SOD2的mRNA表達（一次效應，P=0.015），中劑量抑制SOD2表達，高劑量時則顯著上調其表達（P＜0.05）；對SOD3的mRNA表達的影響則與SOD2正好相反（一次效應，P =0.001）。GPX1的mRNA的表達量隨L-茶氨酸的劑量先降低后升高（一次效應，P＜0.000 1；二次效應，P =0.01）。高劑量L-茶氨酸灌胃組雌性大鼠的SOD1（P=0.009 2）和SOD2（P =0.000 3）以及低劑量灌胃組雌性大鼠的SOD2（P =0.005 5）、SOD3（P=0.002）和GPX1（P＜0.000 1）的mRNA表達都顯著低于雄性。

由表8可知，在心臟組織中，L-茶氨酸灌胃劑量對SOD1（一次效應，P=0.002；二次效應P=0.002）、SOD2（一次效應，P=0.012）、SOD3（二次效應P=0.001）和GPX1（一次效應，P=0.001；二次效應，P=0.000 3）的mRNA表達有顯著影響，低劑量L-茶氨酸上調了SOD1和SOD3的mRNA表達量，中劑量L-茶氨酸上調GPX1的mRNA表達量，高劑量L-茶氨酸上調了SOD2的mRNA表達量。中劑量L-茶氨酸灌胃組雌性大鼠的SOD1（P=0.031）、SOD3（P=0.015）和高劑量L-茶氨酸給藥組雌性大鼠的GPX1（P=0.023）的mRNA表達量低于雄性；而高劑量L-茶氨酸灌胃組雌性大鼠的SOD1（P=0.003）和SOD2（P=0.003）的mRNA表達量顯著高于雄性。

3 討 論

本研究發現，L-茶氨酸給藥除了影響大鼠腎臟中NO的含量外，對其他組織的MDA與NO含量，以及SOD、CAT、GPX與NOS活力無影響，但是對心臟組織的抗氧化指標都有一定程度的影響。尤其是高劑量L-茶氨酸給藥后，心臟NO含量降至最低，SOD活力、CAT活力升至最大，表明L-茶氨酸對大鼠心臟組織具有顯著的抗氧化保護作用，同時SOD與CAT在大鼠心臟中具有協同作用，這與前人的研究結果顯示SOD、GPX、CAT三者之間具有協同作用基本一致[20]。本實驗結果并未發現L-茶氨酸具有對肝臟的抗氧化保護作用，這與以往的研究結果并不一致，推測其原因可能是因為實驗動物（仔雞和小鼠）[8,11]、用藥方式（腹腔注射）[5,10]、處理方式（乙醇與四氯化碳應激模型）[11-12]以及體內外的效應差異（LO2細胞干預處理）[11]不同而導致的。

本研究發現，低劑量L-茶氨酸給藥顯著抑制肝臟中SOD1與脾臟中SOD1、SOD3、GPX1的mRNA表達，高劑量L-茶氨酸則上調脾臟SOD2的mRNA表達，同時，各劑量組心臟中的SOD1、SOD2、SOD3、GPX1的mRNA表達量都顯著增加。而心臟中SOD活力增大，這一結果與SOD2的mRNA表達量增加是一致的，說明心臟中的SOD活力可能是由于SOD2基因的mRNA表達起到主要調控作用。SOD1和SOD3在心臟中的mRNA表達與SOD活性不一致，且SOD亞型基因在不同的內臟組織中表達都存在一定的差異，可能由多種因素導致。一是二者半衰期不同有關。Hollander等[21]認為mRNA的半衰期要比酶蛋白的半衰期短得多，導致mRNA表達量與酶活性不一致[22]。二是由于基因從表達到成功翻譯受到許多因子調控[23]，在蛋白質水平上存在鈍化蛋白[24]、相關降解酶對酶活性進行調控而產生差異。在肝臟和脾臟組織中，L-茶氨酸給藥上調或下調了SOD的mRNA表達量，但對SOD活力并無影響，說明L-茶氨酸僅在轉錄水平上調控肝臟和脾臟SOD各亞型基因的表達，SOD活力還可能受其他因子調控，有待進一步的研究以闡明SOD基因的轉錄后調控機制。中劑量L-茶氨酸給藥上調了大鼠心臟中GPX1的mRNA表達量，且脾臟中GPX1的mRNA表達量隨L-茶氨酸的劑量先降低后升高，但是GPX活性不變，說明心臟和脾臟中GPX活性不受GPX1基因的調節。研究表明，GPX基因在大鼠的不同組織中廣泛表達，體內硒元素的缺乏會導致GPX基因表達的顯著減少[25]。本實驗結果與之前的結果不一致，可能是由于GPX的數量與活性由GPX基因的其他亞型的調節引起[26]；或者是體內合成GPX的硒元素不夠[25]。

本研究還發現，低劑量組雌性大鼠脾臟和心臟的MDA含量低于雄性，高劑量組雌性大鼠心臟的CAT活性、SOD1和SOD2的mRNA表達量高于雄性，說明低劑量和高劑量L-茶氨酸在雌性大鼠的抗氧化效果優于雄性。低劑量灌胃組雌性大鼠脾臟的SOD3、GPX1的mRNA表達都顯著低于雄性，中劑量組雌性大鼠肝臟NOS活性高于雄性，心臟SOD1和SOD3的mRNA表達量低于雄性，高劑量組雌性大鼠肝臟的CAT活力、心臟GPX1的mRNA表達量低于雄性，且各處理組雌性大鼠肝臟和脾臟的SOD1和SOD2的mRNA表達量低于雄性。由此說明中劑量L-茶氨酸對雄性大鼠內臟的抗氧化效果強于雌性。相對而言，L-茶氨酸灌胃后對大鼠的內臟組織抗氧化保護作用具有性別特異性，其原因可能是由于抗氧化基因表達的性別差異性造成，具體機制需要進一步的研究探索。

L-茶氨酸灌胃主要增加了大鼠心臟SOD和CAT活性，減少了NO含量，從而提高了心臟的抗氧化能力，其機制可能是L-茶氨酸的灌胃上調了大鼠心臟中SOD2基因的mRNA表達，從而增加心臟中SOD的活性進而起到抗氧化的保護作用。同時L-茶氨酸的灌胃對大鼠內臟抗氧化能力的影響存在性別差異。

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Effect of L-Theanine on Antioxidant Capacity and Related Gene mRNA Expression in Rat Visceral Tissues

LI Chengjian1,2,3, TONG Haiou1,2, YAN Qiongxian2,?, HAN Xuefeng1,2, XIAO Wenjun1,?, TAN Zhiliang2
(1. Provincial Co-Innovation Center for Utilization of Botanical Function Ingredients, Key Laboratory of Tea Science , Ministry of Education, College of Horticultureand Landscape, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. Hunan Provincial Engineering Research Center for Healthy Livestock and Poultry Production, South-Central Experimental Station of Animal Nutrition and Feed Science in Ministry of Agriculture, Key Laboratory of Agro-Ecological Processes in Subtropical Region, Institute of Subtropical Agriculture, The Chinese Academy of Sciences, Changsha 410125, China; 3. Department of Pharmacy, Yongzhou Vocational Technical College, Yongzhou 425100, China)

Objective： This study aimed to explore the regulatory effect and mechanism of intragastric administration of L-theanine on antioxidant capacity and the mRNA expression of antioxidant enzymes in the heart, liver, spleen and kidney tissues of rats. Methods： Sixty-four Sprague Dawley rats were randomly divided into control group (CON), low-dose group (LT), middle-dose group (MT) and high-dose group (HT) (with 16 animals in each group, half male and half female), which were lavaged daily with L-theanine solution at doses of 0, 50, 200 and 400 mg/kg, respectively for 14 consecutive days. After the last administration, the contents of malondialdehyde (MDA) and nitric oxide (NO), the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathioneperoxidase (GPX), catalase (CAT) and nitric oxide synthase (NOS), and the mRNA expression of SOD1, SOD2, SOD3 and GPX genes were determined in rat visceral tissues. Results： L-Theanine administration influenced the content of NO and the activities of SOD, CAT and NOS in the rat heart. The HT group presented the lowest NO content in the heart tissue among the four groups tested, and increased the activities of SOD and CAT to the highest levels. The NO content in the rat kidney was also impacted by L-theanine administration, and it was the lowest in the HT group. However, no significant effects were observed on the contents of MDA and NO, or the activities of SOD, CAT, GPX and NOS in rat liver, spleen, kidney and heart tissues except the above parameters. The mRNA expression of SOD1 in the liver, and SOD1, SOD3 and GPX1 in the spleen were significantly inhibited in the LT group, the mRNA expression of SOD2 in the spleen was up-regulated in the HT group, and the mRNA expression of SOD1, SOD2, SOD3 and GPX1 in the heart were increased significantly at all doses of L-theanine. Conclusion： L-Theanine administration could enhance antioxidant capacity in the heart, via a mechanism associated with increased SOD activity due to up-regulated mRNA expression of SOD2. At the same time, the effect of L-theanine administration on antioxidant capacity in rat visceral tissues was gender-dependent.

L-theanine; antioxidant capacity; visceral tissues; gene expression; rats

10.7506/spkx1002-6630-201703031

TS202.3

A

1002-6630（2017）03-0188-07

2016-01-25

中央駐湘科研機構技術創新發展專項（2013TF3006）

李成艦（1974—），男，副主任藥師，博士，研究方向為藥用植物功能成分的開發利用和作用評價。E-mail：413874272@qq.com

?通信作者：顏瓊嫻（1984—），女，助理研究員，博士，研究方向為動物營養生態學。E-mail：yanqx14@isa.ac.cn肖文軍（1969—），男，教授，博士，研究方向為茶及植物功能成分利用。E-mail：xiaowenjun88@sina.com

李成艦, 童海鷗, 顏瓊嫻, 等. L-茶氨酸對大鼠內臟組織抗氧化能力及相關基因表達的影響[J]. 食品科學, 2017, 38(3)：188-194. DOI：10.7506/spkx1002-6630-201703031. http：//www.spkx.net.cn

LI Chengjian, TONG Haiou, YAN Qiongxian, et al. Effect of L-theanine on antioxidant capacity and related gene mRNA expression in rat visceral tissues[J]. Food Science, 2017, 38(3)： 188-194. (in Chinese with English abstract)

10.7506/ spkx1002-6630-201703031. http：//www.spkx.net.cn