高鹽飲食對大鼠高血壓腎病進展的影響

龐磊+姚春穎+林玲

【關鍵詞】高鹽飲食；大鼠；高血壓腎病

【中圖分類號】R541 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2016.21.0.02

原發性高血壓（primary hypertension）是一種發病率很高的心血管疾病，主要以以體循環動脈壓升高為臨床表現，是最常見的慢性病，約占成人的10～20%，據調查我國成年人高血壓患病率高達18.8%，全國高血壓患者約有1.6億。高血壓與其他心血管疾病危險因素共存，對循環系統正常功能構成威脅，可以損傷心、腦、腎等重要臟器的結構和功能，最終導致這些器官的功能衰竭。高血壓腎病（Hypertensive nephropathy）是其主要并發癥及致死因素之一。高血壓持續5～10年后，腎小球囊內壓力明顯升高，腎小球纖維化、萎縮，腎臟動脈硬化，導致腎實質缺血和腎單位不斷減少，而腎單位是不可新生的，最終導致腎臟的不可逆損傷，慢性腎衰竭是長期高血壓的嚴重后果之一。高血壓病是多種因素共同作用的結果，包括遺傳因素、環境因素、飲食、生活習慣等因素，其中鹽的攝入在相關文獻中顯示對高血壓的影響作用明顯，鹽的攝入在高血壓的形成中起著關鍵的作用[1]。在低鈉鹽攝入人群中，平均血壓也較低，高血壓患病率也相對較低；相反的，在高鈉鹽攝入人群中，血壓值平均水平較高。本實驗的研究內容是觀察自發性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）在長期高鹽飲食條件下血壓（收縮壓SBP、舒張壓DBP）、尿微量白蛋白蛋白（m-ABL）及血肌酐（SCr）變化，推測高鹽飲食對大鼠高血壓腎病發展的影響及可能機制，為高血液腎病的防治提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取20周齡SHR大鼠30只作為研究對象，雄性，體重280～340 g，同周齡WKY大鼠15只，體重330～390 g（北京維通利華實驗動物技術有限公司，許可證號SCXK（京）2012-0001，合格證編號11400700021752），動物常規飼養，保持室溫20～25℃，12 h光照（8：00～20：00），12 h黑暗，交替進行，適當通風，確保室內空氣潔凈，適應性喂養1周后，稱量大鼠體重并記錄。動物分組：SHR大鼠隨機分為兩組，每組15只，H組：高鹽飲食組，給予8% NaCl 高鹽飼料；L組：低鹽飲食組，給予0.4% NaCl 普通低鹽飼料；C組：WKY大鼠為正常對照組，給予普通飼料。各組大鼠自由飲水。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器及試劑

動物血壓計（北京軟隆生物技術有限公司，BP-2010 Serise），低溫高速離心機（SIGMA 2-16K），全自動生化分析儀（貝克曼庫爾特AU5800），不同規格的飼料（0.4% NaCl 普通低鹽飼料，8% NaCl 高鹽飼料）購自北京科澳協力飼料有限公司。

1.2.2 大鼠尾動脈血壓測量

分組后，大鼠標號，測量大鼠體重及尾動脈血壓，利用動物血壓計無創測量大鼠尾動脈收縮壓（SBP）及舒張壓（DBP），預熱溫度37℃，預熱15 min，將加壓鼠套套入大鼠尾根部，靜置2 min，待大鼠脈搏穩定后測量血壓。測量進行1次/周，上午8：00開始測量，大鼠測量2次/只，取平均值，單位mmHg，連續測量10周，并記錄測量時間及結果。

1.2.3 大鼠尿微量蛋白

大鼠分別置入代謝籠，每鼠1籠，收集大鼠分組后正常飲食24 h尿液，記錄尿量，期間禁食不禁水，收集24 h尿液，低溫高速離心機離心后留取無殘渣尿液分裝，低溫保存送檢。大鼠24 h尿液收集1次/周，離心后送檢并記錄數據，連續10周。

1.2.4 大鼠血肌酐測量

大鼠分組后，各組大鼠分別采用眶后靜脈叢采血法采集血液，將大鼠乙醚麻醉后，分別用毛細玻璃管經眶后靜脈叢采集血液，低溫高速離心機離心后分裝血清，低溫保存送檢。大鼠血液采集1次/周，離心后送檢并記錄數據，連續10周。

1.3 統計學方法

應用SPSS 13.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 8% NaCl 高鹽飲食與0.4% NaCl 普通低鹽飲食對大鼠血壓的影響

大鼠以SBP ≧150 mmHg和（或）DBP ≧100 mmHg為標準診斷為高血壓，對照組大鼠舒張壓無明顯變化，高鹽組大鼠血壓自實驗第二周開始增高且持續至實驗結束，高鹽組舒張壓較低鹽組增高明顯，差異有統計學意義（P<0.05）。見圖1。

對照組大鼠收縮壓無明顯變化，高鹽組大鼠血壓自實驗第二周開始增高且持續至實驗結束，高鹽組收縮壓較低鹽組增高明顯，差異有統計學意義（P<0.05）。見圖2。

2.2 8% NaCl 高鹽飲食與0.4% NaCl 普通低鹽飲食對大鼠尿微量白蛋白的影響

對照組尿微量白蛋白升高不明顯，高鹽組尿微量白蛋白較低鹽組升高顯著，差異有統計學意義（P<0.05）。見圖3。

2.3 8% NaCl 高鹽飲食與0.4% NaCl 普通低鹽飲食對大鼠血肌酐的影響

對照組血肌酐升高不明顯，高鹽組血肌酐較低鹽組升高顯著，差異有統計學意義（P<0.05）。見圖4。

3 討 論

腎臟是機體主要的排泄器官，利用尿的生成與排出講體內代謝產物及多余物質排出體外，從而調節機體酸堿平衡，維持內環境的穩態。腎臟還是參與機體血壓調控、參與循環系統功能調節的重要器官，同時腎臟也是高血壓損害的主要靶器官。據流行病學數據顯示[2]，鹽是高血壓病的進展中的重要影響因素，鹽的攝入量與高血壓發展呈正相關。鈉鹽攝入量相對較高的個體對高血壓病進展影響的誘因主要有兩個方面：一方面，腎臟水鈉儲留，引起血漿容量顯著增加，造成腎臟自身調節功能紊亂，引起血壓升高；另一方面，使強心甾類物質（又稱為洋地黃類物質）增加，使鈉鉀泵的活性收到抑制，從而細胞內鈉離子濃度增加，繼而激活鈉鈣交換體，使細胞內鈣離子濃度增加，從而刺激血管平滑肌或心肌使之收縮，最終引起高血壓[3]。有研究表明長期鈉鹽攝入過多[4]從以下方面影響腎臟的結構及功能：①腎小球前血管阻力的增加；②腎臟濾過率的降低；③腎小管鈉重吸收的增加。根據大量文獻記載，尿微量白蛋白、尿蛋白和血肌酐的值是腎損傷的早期敏感指標，這些重要指標反映了腎小球的濾過能力和腎小管的重吸收作用，能從尿微量白蛋白、尿蛋白和血肌酐等指標中直觀的了解腎臟的重吸收功能是否正常。有研究表明長期高鹽飲食大鼠的腎小球明顯萎縮，腎小囊腔增大，腎小管擴張，鏡下檢查，可以在腎髓質見到大量透明管型，這就表明長期持續的高鹽飲食對腎臟造成了一定程度的損傷作用，Habibi 研究發現鹽負荷會導致大鼠腎損傷甚至腎的纖維化[5]，有文獻記載，長期持續的高血壓[6]使腎小球囊內壓力顯著升高，尿蛋白增多，出現白蛋白尿，最終導致腎臟的不可逆損傷，出現慢性腎功能衰竭。本研究檢測高低鹽飲食對SHR大鼠收縮壓、舒張壓、尿微量白蛋白、血肌酐的影響，進一步驗證了長期高血壓且持續高鹽飲食對腎臟濾過功能嚴重影響[7]。結合實驗結果及文獻分析，高鹽飲食對高血壓病靶器官的損害嚴重，對高血壓病的發生發展也起到重要作用，因此對高血壓病人血壓及鹽的攝入量的控制對于防止腎臟損害等并發癥的發生與預防有非常重要的作用。

結合本實驗研究結果及相關文獻，得出結論，長期持續的高鹽飲食使尿微量白蛋白、尿蛋白、血肌酐等高血壓腎病相關指標顯著增高，證明了高鹽攝入對高血壓腎病的發展有一定的促進作用，所以對高血壓患者在控制血壓之余再限制鈉鹽的攝入量是必要的。

參考文獻

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[5] Daisuke Nakano，Hiroyuki Kobori，James L. Burford.Multiphoton Imaging of the Glomerular Permeability of Angiotensinogen. JOURNAL OF THE AMERICAN SOCIETY OF NEPHROLOGY.2012，5（4）：564.

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[7] 朱國獻，譚毅華，李 濤.HIF-1α及VEGF基因促進大鼠缺血組織血管新生的實驗研究[J].深圳中西醫結合雜志，2016，5（18）：545.