高效液相色譜法測定金樸消積顆粒清潔殘留物

李 靜，顧 林，何 娟，馮小雪

（揚子江藥業集團南京海陵藥業有限公司，江蘇 南京 210049）

高效液相色譜法測定金樸消積顆粒清潔殘留物

李 靜，顧 林，何 娟，馮小雪*

（揚子江藥業集團南京海陵藥業有限公司，江蘇 南京 210049）

目的 建立高效液相色譜法（HPLC）測定金樸消積顆粒清潔殘留物。方法 采用Agilent SB C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-醋酸-水（35:4:61）為流動相，流速為1.0 ml/min，檢測波長283 nm，柱溫30℃，進樣10 μL。結果 在0.700932 μg/ml～2.803726 μg/ml濃度范圍內與峰面積呈良好的線性關系，回歸方程為y=10.784x+0.4351（r=0.9974，n=6），重復性RSD為1.5%。結論 該方法簡便、經濟、快速、專屬性好、重復性好，可用于金樸消積顆粒清潔殘留物測定。

高效液相色譜法（HPLC）；外標法金樸消積顆粒；殘留物

金樸消積顆粒主要成分為厚樸、枳實、陳皮等，主要功能為運脾除濕，導滯和中，用于小兒厭食之脾失健運證，癥見食欲不振，食量減少，大便干或粘滯不爽，噯氣，惡心，干嘔等。國家食品藥品監督管理總局標準中記載用薄層掃描法測定金樸消積顆粒含量（以橙皮苷計），其中橙皮苷（C28H34O15）含量主要來自枳實及陳皮，目前還沒有關于采用高效液相色譜法檢測其殘留物的報道，本文參照《中國藥典》[1]2015年版一部陳皮項下的色譜條件首次采用高效液相色譜法對金樸消積顆粒的清潔殘留物進行測定，并且也有研究報道[2-4]，采用高效液相色譜法測定不同產地、不同藥材中橙皮苷的含量，方法較為簡便、快速、準確。

1 儀器設備與試藥

1.1 儀器設備

高效液相色譜儀（UHPLC1290美國Agilent）、電子天平（梅特勒-托利多）。

1.2 試劑與試藥

橙皮苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號110721-201316，純度95.3%），醋酸為分析純，甲醇為色譜純。

2 方法與結果

2.1 供試品溶液的制備

取本品，照高效液相色譜法測定（《中國藥典》2015年版[1]二部通則0512），取每一棉簽上的擦拭物，精密加甲醇5ml，振搖使溶解，濾過，作為供試品溶液。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取橙皮苷對照品適量，加甲醇適量溶解并稀釋成每1ml中約含1.4 μg/ml的溶液，搖勻，即得對照品溶液。

2.3 色譜條件

采用Agilent SB C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱，以甲醇-醋酸-水（35:4:61）為流動相，流速1.0 mL·min-1，檢測波長283 nm，柱溫：30℃，進樣量：10 μL。

2.4 測定方法

按照2.3項下的色譜條件，精密量取對照品及供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.5 溶液穩定性

按2.3項下所述操作，制備對照品溶液，室溫避光放置，分別于0小時、2小時、4小時、6小時、8小時、10小時、12小時、16小時、20小時、24小時、28小時、32小時、36小時、40小時、44小時及48小時，精密量取10 μL注入高效液相色譜儀，以其峰面積計算相對標準偏差RSD（%），各時間點的RSD（除28小時外）均大于1.0%，為保證結果的可靠性，該溶液應臨用新配。

2.6 精密度

按2.2項下對照品溶液的配制方法配對照品溶液，精密量取10 μL注入液相色譜儀，連續進樣6次，連續重復進樣6次，結果6次峰面積的RSD為1.5%，小于5.0%，表明該方法精密度良好。

2.7 線性關系考察

取橙皮苷對照品加甲醇分別配制成濃度每1 ml中含橙皮苷為0.700932 μg、1.051397 μg、1.401863 μg、1.752329 μg、2.102795 μg和2.803726 μg的溶液，在283 nm波長下測定的峰面積為8.01188、11.62282、15.23375、20.14048、22.85687、30.56622。以橙皮苷濃度（μg/ml）為X軸，吸光度為Y軸，進行線性回歸，求得回歸方程為：y=10.784x+0.4351（r=0.9974，n=6）。結果表明橙皮苷在0.700932 μg/ml～2.803726 μg/ml濃度范圍內線性關系良好。

2.8 檢測限

取橙皮苷對照品14.71 mg，置200 ml量瓶中，加甲醇適量，超聲使橙皮苷溶解，再加甲醇稀釋至刻度，精密量取上述溶液1.0 ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，再精密量取2.5 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，此時溶液濃度為0.175233 μg/ml，精密量取10 μL注入液相色譜儀，連續進樣2次，其信噪比分別為3.5和3.7，符合規定，即該方法的檢測限濃度為0.175233 μg/ml。

2.9 定量限

取橙皮苷對照品14.71 mg，置200 ml量瓶中，加甲醇適量，超聲使橙皮苷溶解，再加甲醇稀釋至刻度，精密量取上述溶液1.0 ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，此時溶液濃度為0.700932 μg/ml，精密量取10 μL注入液相色譜儀，連續進樣2次，其信噪比分別為12.0和10.7，符合規定，即該方法的定量限濃度為0.700932 μg/ml。

3 討 論

首次以高效液相色譜法測定金樸消積顆粒清潔殘留物，相對于薄層色譜法而言，準確度高，精密度高，且線性、回收率、穩定性等結果均符合要求。

[1] 《中國藥典》2015年版一部.

[2] 禤雪梅.HPLC法測定不同產地藥材陳皮中橙皮苷的含量[J].北方藥學,2015,12(2).

[3] 蔡 萍,張水寒,肖 娟,劉新義,蔡光先,等.HPLC測定湖南道地藥材陳皮中橙皮苷的研究[J].中國醫藥導報,2006(4):65-67.

[4] 袁金斌,周志炎.HPLC測定陳皮提取物及其制劑中橙皮苷的含量,中成藥,2006(3):455-456.

本文編輯：吳 衛

Determination of clean residues of gold and vegetable particles by HPLC

LI Jing,GU Lin,HE Juan,FENG Xiao-xue*

(Yangtze River Pharmaceutical Group Nanjing Hailing Pharmaceutical Co.,Ltd., Jiangsu Nanjing 210049,China)

Objective To establish a method for the determination of the residue of JinPuXiaoJi particles.Methods The determination was performed on Agilent SB C18 column,with moboile phase methanol:acetic acid:water(35:4:61),The flow rate is 1 ml/min,The detection wavelength was set at 283 nm and the injection volum was 10μL.Results The liner range was 0.700932μg·mL-1～f2.803726μg·mL-1(R2=0.9974),the rsd of repeatability is 1.5 pecent.Conclusion The method is simple and accurate,and suitable for quality control of he residue of JinPuXiaoJi particles.

High Performance Liquid Chromatography;JinPuXiaoJi particles;Residue

R927.2

A

ISSN.2095-8242.2017.24.4712.02

馮小雪（1991-），女，研究員，從事藥物分析及質量標準研究工作