嗜沫聚生桿菌致顱內感染1例

張 薇，梁 慧，王玉飛，劉 佳，胡紅焱

嗜沫聚生桿菌致顱內感染1例

張 薇，梁 慧，王玉飛，劉 佳，胡紅焱

嗜沫聚生桿菌；顱內感染；鑒定

嗜血桿菌屬細菌主要在人和動物的咽喉和口腔黏膜寄居，少數寄居于生殖道，引起原發性化膿性感染及嚴重的繼發感染[1-3]。嗜沫聚生桿菌(Aggregatibacter aphrophilus)是最近從嗜血桿菌屬中分出的一個新種，引起的顱內感染在國內外鮮有報道[4,5]；分離時需要特殊培養基，生化反應不典型，鑒定比較困難。本院2014-08檢出1例嗜沫聚生桿菌顱內感染病例，微生物特征及耐藥譜值得重視。

1 病例報告

1.1 一般資料 患者，男，50歲，突發左側頭痛10 d、右側肢體活動不利進行性加重7 d入院。無眩暈、嘔吐、視物模糊、抽搐等伴隨癥狀。體檢神志清醒、回答切題，不能自立。雙側瞳孔等大等圓、對光反射靈敏，計算力、理解力、定向力、記憶力正常。MRI檢查提示左側頂葉長圓形占位(考慮膿腫)，4.1 cm×3.1 cm×3.6 cm，左側側腦室受壓。腦脊液檢查潘氏實驗陽性，白細胞數1245 M/L，多核細胞占85%。將無菌抽取的膿性腦脊液進行細菌分離與鑒定。

1.2 細菌分離與鑒定

1.2.1 主要試劑 巧克力平板、羊血瓊脂平板平板購自英國Oxoid 公司，藥敏紙片、Ⅴ因子、Ⅹ因子、Ⅴ+Ⅹ因子、 β- 內酰胺酶檢測試劑等均為英國Oxoid 公司產品。

1.2.2 鑒定 無菌抽取的膿性腦脊液分別進行肉湯培養基增菌培養和直接劃線接種血平板、哥倫比亞巧克力平板，放入5%～10% CO2培養箱，37 ℃培養18～24 h后挑取可疑菌落進行分離鑒定; 將分純后的菌株使用生物梅里埃Vitek 2-Compact全自動細菌鑒定儀和嗜血桿菌配套鑒定卡進行鑒定; 采用藥物紙片擴散法(K-B法) 進行抗生素敏感試驗，質控菌株為流感嗜血桿菌ATCC 49247。菌株β-內酰胺酶的測定采用頭孢硝噻吩紙片法，將菌落涂布于浸濕頭孢硝噻吩的紙片上，10 min 內觀察結果，紙片變為紅色，即判斷為β-內酰胺酶陽性菌株，否則為陰性。之后進行16 s rRNA 序列測定。

1.3 實驗結果

1.3.1 菌落形態 35 ℃培養24 h后觀察菌落，血平板出現針尖樣菌落，繼續培養48 h，菌落增至0.5 mm左右，灰白色、無溶血。置于5% CO2孵育箱的巧克力平板培養24 h 后，菌落呈現為黃色不透明、表面出現粗大凸起。肉湯培養基中形成顆粒沉淀，管壁形成的黏性菌膜不易剝落。生理鹽水涂片，染色鏡檢可見短小規則的桿菌。

1.3.2 藥敏試驗 紙片法測定β- 內酰胺酶為陰性，對四環素、復方新諾明耐藥, β- 內酰胺類如氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢噻肟、頭孢呋辛、氨曲南、美羅培南、亞胺培南均為敏感，對阿奇霉素、左氧氟沙星、氯霉素也敏感。

1.3.3 16 s RNA序列測定 經過GenBank和核糖體工程數據庫的16 s RNA序列的比對，與嗜沫聚生桿菌同源性為99.8%，最終確定為嗜沫聚生桿菌完善檢查、預防性抗感染治療后全麻下行左頂葉開顱膿腫清除術+去骨襻減壓術，手術順利，術后美羅培南抗感染治療。手術后1周復查腦脊液常規正常，3周后復查CT、磁共振見膿腫消失，痊愈出院。

2 討 論

聚生桿菌屬(Aggregatibacter)細菌為革蘭陰性桿菌短小桿菌，因培養時容易聚集生長而得名。2006年Norskov 根據16s RNA序列和全基因組測序的結果，重新規劃了聚生桿菌屬[6]，包括伴放線聚生桿菌，嗜沫嗜血桿菌, 副嗜沫嗜血桿菌, 惰性嗜血菌；后來發現副嗜泡沫嗜血桿菌其實是嗜泡沫嗜血桿菌的一個變種，現在統稱嗜沫聚生桿菌。

嗜沫聚生桿菌最早是1940年引起感染性心內膜炎報道[7]，1962年就發現伴放線聚生桿菌和嗜沫聚生桿菌的相似性，后來發現副嗜沫嗜血桿菌與嗜沫嗜血桿菌的區別是生長需要V因子，其原因是副嗜沫嗜血桿菌尼克酰胺-核糖轉移酶的基因的缺失。嗜沫聚生桿菌與伴放線聚生桿菌的區別是觸酶實驗和ONPG水解實驗。

嗜沫聚生桿菌廣泛寄居于人類口腔和上呼吸道，引起呼吸道的急性感染、心內膜炎、腦膿腫等[8]，近年國外偶有尿液、生殖道分泌物等標本中檢出嗜沫嗜血桿菌，有重要的臨床意義。筆者認為，國內臨床與實驗室對這類需要在培養基中添加特殊營養成分的致病菌，未引起足夠重視。臨床工作中需要注意，嗜沫聚生桿菌需要富含Ⅴ因子和Ⅹ因子的嗜血桿菌專用巧克力平板和5%CO2環境下才能生長，這類細菌的非呼吸道感染應引起微生物工作者和臨床醫師的高度重視。

治療嗜沫聚生桿菌感染通常首選青霉素類，對其耐藥監測通常只需檢測β-內酰胺酶，以及進行氯霉素的耐藥性檢測，而不需要檢測對其他抗生素敏感性。在絕大多數情況下，β-內酰胺酶試驗可以成為檢測細菌對氨芐西林與阿莫西林耐藥性的快速方法。β-內酰胺酶陽性提示對青霉素、氨芐西林和阿莫西林均耐藥。

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(2016-11-08收稿 2017-02-10修回)

(責任編輯 尤偉杰)

張 薇，本科學歷，主管技師。

100039 北京，武警總醫院檢驗科

胡紅焱，E-mail：huhongyanwj@163.com

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