不規(guī)則抗體篩查及陽性抗體分布情況調(diào)查分析

熊榮　許廣芳　洪偉晉

【摘要】 目的：了解文山市醫(yī)院住院患者中不規(guī)則抗體檢出率及陽性抗體分布情況，探討與臨床安全輸血的關(guān)系。方法：采用鹽水法、凝聚胺法和微柱凝膠抗球蛋白法對住院患者血樣進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選。結(jié)果：使用鹽水法和凝聚胺方法檢測13148例普通住院患者血型不規(guī)則抗體，陽性4例，陽性率0.03%（4/13 148）。使用微柱凝膠抗球蛋白法檢測6233例擬輸血或手術(shù)備血患者血型不規(guī)則抗體，陽性20例，陽性率0.32%（20/6233）。24例不規(guī)則抗體陽性患者中，女性較多，占66.67%（16/24），男性僅占33.33%（8/24）；血型系統(tǒng)以RH系統(tǒng)最多，占70.83%（17/24）；抗體以抗-E多見，占41.67%（10/24）；民族以漢族居多，占58.33%（14/24），壯族次之，占20.83%（5/24）；24例中 20例有輸血史或妊娠史或兩者兼有，占83.33%（20/24），4例患者無輸血史或妊娠史，占16.67%（4/24）。結(jié)論：醫(yī)療單位做好不規(guī)則抗體篩查與特異性鑒定，了解陽性抗體的分布情況，對擬輸血者很有幫助，特別是對多次輸血或妊娠的患者可以提前預(yù)警，有利于尋找到合適的血液，對保障安全有效的輸血至關(guān)為重要。

【關(guān)鍵詞】 紅細(xì)胞血型； 不規(guī)則抗體； 抗體篩查； 安全輸血

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.4.027 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）04-0051-03

【Abstract】 Objective：To understand the irregular antibody detection rate and the distribution of positive antibody of patients in Wenshan City Hospital，to explore the relationship and clinical safety of blood transfusion.Method： By the methods of brine，condensed amine and micro column gel antiglobulin method were uesd for screening hospitalized patients blood samples on irregular antibody screening.Result：The methods of brine and condensed amine was used to detect 13148 cases of hospitalized patients with normal blood type irregular antibodies，4 cases were positive，positive rate was 0.03% （4/13 148）.Micro column gel antiglobulin method was used to detect 6233 cases to blood transfusion or surgery for patients with irregular antibody，blood type of 20 patients with positive rate of 0.32% （20/6233）.In 24 patients with irregular antibody positive，more women，66.67% （16/24），men accounted for 33.33%（8/24）.Most system with RH blood type，accounting for 70.83% （17/24）.The antibody was anti-E，accounting for 41.67%（10/24）.Ethnic majority with the han nationality，accounted for 58.33% （14/24），and then was zhuang nationality，accounted for 20.83% （5/24）.24 cases in the history of 20 patients with a history of blood transfusion or pregnancy， or both， accounted for 83.33% （20/24），4 cases of patients with no history of blood transfusion or pregnancy，16.67% （4/24）.Conclusion：Completing the irregular antibody screening and specificity identification，understanding the distribution of positive antibody，is very helpful to a transfusion，especially in patients with multiple blood transfusion or pregnancy can early warning， to find the suitable blood，is very important for ensuring safe and effective transfusion.

【Key words】 Blood type of red blood cells； Irregular antibody； Antibody screening； Safety of blood transfusion

First-authors address：The Peoples Hospital of Wenshan City，Wenshan 663000，China

血型不規(guī)則抗體是指ABO血型以外的其他血型系統(tǒng)抗體，如RH、MNS、Leis等血型系統(tǒng)的抗體。這些血型抗體嚴(yán)重威脅著輸血安全，并且多數(shù)與多次輸血和妊娠有關(guān)，故對于準(zhǔn)備輸血的患者，尤其有輸血史或妊娠史的患者，在輸血前應(yīng)常規(guī)進(jìn)行抗體篩查，陽性者應(yīng)進(jìn)一步做抗體特異性鑒定[1]。由于血型分布的地區(qū)多態(tài)性，導(dǎo)致不規(guī)則抗體發(fā)生頻率同樣具有地區(qū)多態(tài)性。文山壯族苗族自治州文山市，居住著漢、壯、苗、彝等12種民族，少數(shù)民族人口占總?cè)丝跀?shù)的51.77%。因此，掌握本市血型不規(guī)則抗體分布特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體，對血液病、腫瘤等患者，多次輸血史或多次妊娠的患者可以提前預(yù)警，避免溶血性輸血不良反應(yīng)和紅細(xì)胞輸注無效的發(fā)生、提高輸血療效、及時(shí)為患者提供配合性的血液、確保臨床輸血安全具有重要的意義[2]。現(xiàn)將筆者所在醫(yī)院輸血科2013年以來開展不規(guī)則抗體篩查的情況總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集文山市醫(yī)院2013年1月-2015年12月住院的有輸血需求的患者血液標(biāo)本6233例及2015年5-11月普通（隨機(jī)）住院患者血液標(biāo)本13 148例。

1.2 試劑

抗球蛋白檢測卡（含IgG+C3d）（長春博訊）、篩選細(xì)胞（長春博訊）、譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）、抗球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）、凝聚胺試劑（珠海貝索）均批檢合格并在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器

TD-3A型血型血清學(xué)專用離心機(jī)及FYQ型免疫微柱孵育箱（長春博研）、KA-2200型血型血清學(xué)專用離心機(jī)（日本久保田）、試管、顯微鏡等。

1.4 方法

參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定的方法進(jìn)行，使用篩選細(xì)胞對患者標(biāo)本分別采用鹽水法、凝聚胺法及微柱凝膠抗球蛋白法進(jìn)行血型不規(guī)則抗體篩選[3]。陽性者送文山州中心血站實(shí)驗(yàn)室用鹽水試管法和微柱凝膠抗球蛋白法進(jìn)行抗體鑒定，對照譜細(xì)胞格局確定抗體特異性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

使用凝聚胺方法檢測13 148例患者血型不規(guī)則抗體，陽性4例，陽性率為0.03%（4/13148）；使用微柱凝膠抗球蛋白法檢測6233例擬輸血或手術(shù)備血患者的血型不規(guī)則抗體，陽性20例，陽性率為0.32%（20/6233）；24例不規(guī)則抗體陽性患者中，20例陽性患者有輸血史或妊娠史或兩者兼有，占83.33%（20/24），4例患者無輸血史或妊娠史，占16.67%（4/24）；24例中有18例需要輸血的患者通過從配血相合的血液中選擇特異性抗體對應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞輸注，輸血后未發(fā)現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，評估輸血有效。

24例血型不規(guī)則抗體陽性患者中消化道出血4例，占16.67%（4/24）；肝硬化、白血病、腎性貧血各3例，分別占12.50%（3/24）；癌性貧血和產(chǎn)婦各2例，分別占8.33%（2/24）；再生障礙性分貧血、地中海性貧血、子宮肌瘤、功血能性子宮出血、外傷、膽結(jié)石、膀胱結(jié)石各1例，各占4.17%（1/24）。

24例陽性抗體以抗-E多見，占41.67%（10/24），抗-M次之，占16.67%（4/24），各種不規(guī)則抗體所占百分比見表1；血型系統(tǒng)以RH系統(tǒng)最多，占70.83%（17/24），血型系統(tǒng)中陽性抗體分布情況見表2；陽性抗體女性較多，占66.67%（16/24），男性僅占33.33%（8/24）；民族以漢族居多，占58.33%（14/24），壯族次之，占16.67%（5/24），不同性別、不同民族中的分布情況見表3。

3 討論

隨著更多的血型系統(tǒng)被發(fā)現(xiàn)，人類的血型抗體除了抗A、抗B外，還有其他的血型抗體，如RH血型系統(tǒng)中的抗D、抗E抗體等，這些抗體的產(chǎn)生、存在沒有規(guī)律性，常常稱其為不規(guī)則抗體。這類抗體大多數(shù)為IgG抗體，主要經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生[4]，是引起免疫性溶血反應(yīng)、新生兒溶血病、血型鑒定困難以及交叉配血困難的重要因素之一[5]，對其進(jìn)行篩查，可以減少輸血反應(yīng)的發(fā)生，提高輸血療效，為確保臨床輸血安全以及對新生兒溶血病的預(yù)防提供有力保障[6]。我國衛(wèi)生部頒布的《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》第四章第十七條規(guī)定：凡遇有下列情況必須按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》有關(guān)規(guī)定做抗體篩選試驗(yàn)：交叉配血不合時(shí)；對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者[7]。

本次檢查出的24例不規(guī)則抗體陽性患者中，20例患者有輸血史或妊娠史或者兩者兼有，占83.33%，4例患者無輸血史或妊娠史，僅占16.67%，也足以說明血型不規(guī)則抗體篩查對有輸血史或妊娠史的意義和價(jià)值。因此，對于有可能輸血的患者，尤其是有輸血史和妊娠史的患者，提前做不規(guī)則抗體篩選，了解其是否存在有臨床意義的血型不規(guī)則抗體，及時(shí)為患者選擇配合性的血液，以保證臨床輸血安全尤為重要。如果等到需要用血時(shí)才做交叉配血或抗體篩選，存在不規(guī)則抗體的患者就可能無法及時(shí)獲得配合的血液，其原因一是某些抗體的特異性鑒定非常耗時(shí)，二是可能沒有足夠的時(shí)間準(zhǔn)備抗原陰性的血液。

本次調(diào)查24例不規(guī)則抗體陽性患者以內(nèi)科系統(tǒng)基多，其中以消化道出血、肝硬化、白血病、再生障礙性貧血、地中海性貧血、腎性貧血、癌性貧血等患者為主，此類患者尤其是癌性貧血及血液病患者因經(jīng)濟(jì)條件有限，無法到上級醫(yī)院進(jìn)行治療，只能定期到我院進(jìn)行輸血治療以維持生命，多次輸血是產(chǎn)生不規(guī)則抗體主要原因之一。故輸血前了解患者的既往輸血史、妊娠史及現(xiàn)病史就顯得尤其重要。

本組24例不規(guī)則抗體陽性患者中，男8例，占33.33%，女16例，占66.67%，提示女性產(chǎn)生不規(guī)則抗體的概率比男性高，與文獻(xiàn)[8]報(bào)道相似，這與女性由于妊娠因素使得機(jī)體受到免疫刺激的機(jī)會(huì)高于男性有關(guān)，即女性同時(shí)存在著輸血和妊娠雙重免疫機(jī)會(huì)。

不規(guī)則抗體產(chǎn)生多為Rh系統(tǒng)，本次篩查出的血型不規(guī)則抗體也是以Rh系統(tǒng)抗體多見，占70.8%，較文獻(xiàn)[9-10]報(bào)告的66.67%、58.77% 高。大多數(shù)Rh抗體為免疫性IgG抗體，且多具有臨床意義，該類抗體可結(jié)合患者體內(nèi)具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞，產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，從而導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)。故應(yīng)引起高度重視Rh抗體的檢測。

本次結(jié)果Rh系統(tǒng)抗體以抗-E為主，占41.67%，抗-Ec、抗-e、抗-C、抗-Ce、抗-c、抗-M、抗-Lea、抗-Leb、抗-Fya都有檢出。這可能是因?yàn)镋抗原在我國漢族人群的分布頻率為47%，抗原陽性與陰性的百分率越接近，產(chǎn)生抗體的機(jī)會(huì)也越多。而且由于臨床輸血中，未對獻(xiàn)血員及患者進(jìn)行E抗原常規(guī)檢測，E抗原陰性的患者只是隨機(jī)輸血，使得產(chǎn)生抗-E的機(jī)會(huì)明顯增加。本次統(tǒng)計(jì)的10例抗-E陽性的患者中有6例系反復(fù)輸血所致。因此是否需要對輸血患者進(jìn)行常規(guī)E抗原檢測，尤其是對E抗原陰性而且需要輸血的患者是否給以E抗原陰性的血液等問題值得我們及進(jìn)一步探討。本次未有檢測出抗-D，這與目前我國將D抗原檢測納入輸血相容性檢測的常規(guī)試驗(yàn)中，對RhD陰性患者給予RhD陰性的血液輸注有關(guān)，同時(shí)由于D抗原在我國漢族人群分布頻率高達(dá)99.6%，這就使得D抗體產(chǎn)生的機(jī)會(huì)較少。

抗-M、抗-Lea、抗-Leb是臨床相對常見的抗體，多為IgM類抗體，也有抗-Lea為IgG性質(zhì)的報(bào)道[11-12]，通常情況下，這些類抗體在37℃沒有活性，在室溫鹽水介質(zhì)中發(fā)生凝集，在4℃反應(yīng)最佳，在我們檢測出的這類抗體中有1例患者在室溫鹽水介質(zhì)和37℃情況下仍具有活性，屬于IgG/IgM類型，同時(shí)還影響了血型正反定型，具有臨床意義，在給予了相配合的血液輸注后，患者未出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，病情得到緩解，達(dá)到了治療效果。

本次檢出的24例不規(guī)則抗體患者，漢族14例，占58.3%，壯族5例，占20.8%，苗族2例，占8.33%，彝族2例，占8.33%，回族1例，占4.17%。檢出陽性的各民族患者中，未發(fā)現(xiàn)低頻率的抗原抗體，其中壯族患者的陽性檢出率高于其他少數(shù)民族。文山系壯族苗族自治州，其中文山市壯族人口占本市總?cè)丝诘?9.82%，對其繼續(xù)進(jìn)行血型不規(guī)則抗體監(jiān)測，了解本地區(qū)民族血型不規(guī)則抗體分布特點(diǎn)，建立不規(guī)則抗體陽性患者的檔案資料信息庫，并將結(jié)果告知患者及其家屬，為患者再次輸血時(shí)選擇相應(yīng)抗原陰性的血液贏得時(shí)間。對反復(fù)輸血的患者，要求超過24 h輸血需要重新抽血進(jìn)行交叉配血，有學(xué)者建議連續(xù)輸血的患者應(yīng)該3 d做1次不規(guī)則抗體篩查，以避免輸血刺激引起的記憶反應(yīng)[13]。

本組資料使用鹽水法和凝聚胺法檢測13 148例患者血型不規(guī)則抗體，陽性4例，陽性率0.03%（4/13148）。使用微柱凝膠抗球蛋白法檢測6233例擬輸血或手術(shù)備血患者的血型不規(guī)則抗體，陽性20例，陽性率0.32%（20/6233）。較文獻(xiàn)[14]報(bào)告的無償獻(xiàn)血者采用凝聚胺法測得的0.24%為高。這些數(shù)據(jù)也可從一個(gè)側(cè)面反應(yīng)出鹽水法雖然操作簡單，成本低廉，但方法靈敏度低，檢出率低，一些弱凝集或稀有的抗體不能被檢測到；凝聚胺法可以檢測出抗-P以外的大部分IgG抗體，但I(xiàn)gM類抗體及部分IgG類弱抗體會(huì)被漏檢；微柱凝膠抗球蛋白法是凝膠過濾技術(shù)和免疫抗原抗體反應(yīng)技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物，能及時(shí)檢出血型抗原抗體引起的特異性凝集反應(yīng)和非血型因素引起的非特異性假凝集反應(yīng)[15]，對不規(guī)則抗體的檢測較為敏感，且操作簡便快捷、靈敏度高、結(jié)果穩(wěn)定，可進(jìn)行大批量檢測[16]。建議有條件的單位盡可能采取微柱凝膠抗球蛋白法進(jìn)行檢測。

當(dāng)然，本組微柱凝膠法檢測的是擬輸血或手術(shù)備血的患者，可能產(chǎn)生不規(guī)則抗體的頻率比普通患者或無償獻(xiàn)血者高得多。鹽水法、凝聚胺法和微柱凝膠法兩者檢測的病例不同，缺乏可比性，但仍然值得進(jìn)一步研究和探索。

綜上所述，對擬輸血者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，及時(shí)了解陽性抗體分布情況，對臨床安全輸血具有重要的意義。許多發(fā)達(dá)國家已將不規(guī)則抗體篩查列入常規(guī)檢測項(xiàng)目[17]，在本地區(qū)將不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)列為輸血前常規(guī)檢查項(xiàng)目也是十分必要的，能為篩選結(jié)果陽性的患者提供及時(shí)、有效及安全的血液，可避免溶血性輸血不良反應(yīng)和紅細(xì)胞輸注無效的發(fā)生，保證了輸血的安全性。

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（收稿日期：2016-10-30）