用UGT1A1基因檢測對1例Gilbert綜合征患者的病情進行診斷的價值分析

趙訓智

（石首市第三人民醫院，湖北 石首 434400）

用UGT1A1基因檢測對1例Gilbert綜合征患者的病情進行診斷的價值分析

趙訓智

（石首市第三人民醫院，湖北 石首 434400）

Gilbert綜合征又叫體質性肝功能不良性黃疸，是一種常見的遺傳性非結合高膽紅素血癥。該病患者的臨床表現主要是出現長期間歇性的輕、中度黃疸，部分患者還可出現乏力、消化不良、肝區不適等臨床表現。在本研究中，筆者主要探討用UGT1A1基因檢測對1例Gilbert綜合征患者的病情進行診斷的臨床價值。

UGT1A1基因檢測；Gilbert綜合征；血清膽紅素

Gilbert綜合征是一種先天性的血清膽紅素增高癥。該病患者的病理改變主要是血清總膽紅素（主要為非結合膽紅素）的水平出現輕、中度的上升。該病具有一定的遺傳性。目前，臨床上認為，Gilbert綜合征的發病機制主要是肝細胞內質網內的膽紅素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉移酶（UGT）的活性下降，致使非結合膽紅素葡萄糖醛酸化的過程出現障礙，導致非結合膽紅素的水平異常升高，進而使患者出現黃疸等臨床表現[1]。Gilbert綜合征患者的臨床表現無特異性，因此其病情容易被漏診或誤診。近年來，臨床上用UGT1A1基因檢測診斷Gilbert綜合征顯現出良好的效果。本文就用UGT1A1基因檢測對1例Gilbert綜合征患者的病情進行診斷的價值進行分析。

1 病歷資料

鄧某，女，22歲，家住在山區，職業為文員。該患者因“發現肝功能異常1月余”入院，入院時無特殊不適。既往其身體健康，無飲酒史。對該患者進行查體的結果顯示：其雙側鞏膜出現輕度黃染，未見肝掌及蜘蛛痣，其肝區無叩擊痛，其肝脾肋下未觸及。該患者在當地縣醫院進行肝功能檢查的結果顯示，其總膽紅素的水平為56.3 μmol/L，非結合膽紅素的水平為48.0 μmol/L，其余的肝功能指標皆正常。入院后，對該患者進行甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎抗體檢查及Coombs試驗、PNH試驗、HCV-RNA、非嗜肝病毒全套、肝病相關抗體、血清鐵加總鐵結合力、銅藍蛋白、α1-抗胰蛋白酶抗體、溶貧全套等檢查均未見異常。入院后對其進行肝功能檢查的結果顯示，其總膽紅素的水平為60.3 μmol/L，非結合膽紅素的水平為47.2 μmol/L，其余的肝功能指標皆正常。對其進行肝臟影像學檢查未見異常。對該患者進行UGT1A1﹡6（G211A）、UGT1A1﹡28（[TA]n）基因檢測的結果顯示，其UGT1A1﹡28突變雜合子。對該患者進行2 d的饑餓試驗（每天讓其攝入的總能量約為1400 KJ）。在進行饑餓試驗的第1 d，對其進行肝功能檢查的結果顯示，其膽紅素的水平為72.6 μmol/L，非結合膽紅素的水平為62.9 μmol/L，其余的肝功能指標皆正常。在進行饑餓試驗的第2 d，對其進行肝功能檢查的結果顯示，其總膽紅素的水平為84.6 μmol/L，非結合膽紅素的水平為68.0 μmol/L，其余的肝功能指標皆正常。第3 d讓該患者正常進食，囑其勿食用油膩的食物，注意休息，然后對其進行肝功能檢查。檢查的結果顯示，其總膽紅素的水平為58.6 μmol/L，非結合膽紅素的水平為41.7 μmol/L，其余的肝功能指標皆正常。綜合基因檢測、生化檢查及饑餓試驗的結果，診斷該患者患有Gilbert綜合征。

2 進行UGT1 A1 基因檢測的方法

抽取該患者清晨空腹的外周靜脈血，用Sanger雙脫氧鏈終止法對其進行UGT1A1基因檢測。以其外周血的DNA為模板，進行聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)試驗。將純化的PCR產物直接進行測序反應，反應的體積為10 μL，反應的溫度為96℃，反應的時間為2 min。將進行測序反應所得到的產物用異丙醇進行沉淀，然后用ABIprism3100測序儀（AppliedBiosystems）進行UGT1A1基因檢測。

3 討論

Gilbert綜合征是一種常見的遺傳性非結合高膽紅素血癥。該病屬于一種常染色體隱性遺傳疾病。該病的發生與膽紅素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉移酶（UGT）的活性下降密切相關。臨床研究表明，控制Gilbert綜合征發病的UGT1A1基因在人類染色體2q37上。正常情況下，UGT1A1基因編碼的蛋白能夠促使膽紅素與葡萄糖醛酸結合，使非結合膽紅素轉化為結合膽紅素。當UGT1A1基因發生遺傳變異時，其基因的表達水平明顯下降，從而可導致非結合膽紅素葡萄糖醛酸化的過程出現障礙，最終引發Gilbert綜合征[2]。在UGT1A1基因中，控制Gilbert綜合征發病的是TA盒，該因子位于啟動子上游距離啟動子25～35個bp處。TATA盒序列正常的野生型純合子為-A(TA)6TAAA(TA)6TAA-(TA6/TA6)，突變純合子為-A(TA)7TAAA(TA)7TAA-(TA7/TA7)，突變雜合子為 -A(TA)6TAAA(TA)7TAA-（TA6/TA7， 也 叫 UGT1A1﹡28）。由于有TA的插入，使TATA盒序列延長，導致TATA盒序列與轉錄因子的結合減少，使UGT1合成受限，進而可使UGT的活性下降。在Gilbert綜合征患者的基因序列中，較為常見的外顯子突變位點有UGT1A1﹡6、UGT1A1﹡ 7、UGT1A1﹡27和UGT1A1﹡ 62[3]。UGT1A1基因發生遺傳變異的類型譜包括UGT1A1啟動子TATA盒TA插入突變、c-3279T＞G和外顯子突變。Gilbert綜合征兼有染色體隱性遺傳和顯性遺傳的特點，隱性遺傳由啟動子遺傳變異起主導作用，顯性遺傳由外顯子編碼區突變起主導作用。目前，臨床上主要采用UGT1A1基因檢測診斷Gilbert綜合征，而輔助診斷該病的方法有饑餓試驗（即低熱量飲食試驗）、苯巴比妥試驗、煙酸激發試驗、利福平試驗和肝臟穿刺術等[4]。在本文中，1例Gilbert綜合征患經基因檢測、饑餓試驗及生化檢查，其病情得到確診。后對該患者進行隨訪，發現其孿生妹妹亦出現相同的癥狀。對該患者的妹妹進行UGT1A1基因檢測，也診斷其患有Gilbert綜合征。這說明Gilbert綜合征具有一定的遺傳性。大多數Gilbert綜合征患者不需要進行特殊的治療，其在注意休息、嚴格戒酒及攝入足夠的熱量后，黃疸可自然消退。對于部分黃疸癥狀嚴重的患者，可用苯巴比妥、格魯米特、氯貝丁酯等藥物進行治療。

[1] 宋華,司徒愛明,宋力,等.一個Gilbert綜合征家系UGT1A1基因突變報告[J].臨床兒科雜志,2010,28(12):1141-1144.

[2] Drenth J P,Peters W H,Jansen J B.From gene to disease; uncon jugated hyperbilirubinemia:Gilbert’s syndrome and Crigler-Najjar types I and II[J].Nederlands Tijdschrift Voor Geneeskun de,2002,146(32):1488-1490.

[3] 車芳,駱子義.UGT1A1基因在Gilbert綜合征及Crigler-Najjar綜合征發病機制中研究進展[J].中華實用診斷與治療雜志,2015,29（3）:219-222.

[4] 朱俊樂,施斌.Gilbert綜合征的研究現狀[J].臨床肝膽病雜志,2011,27(1):110-112.

R446

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2095-7629-（2017）20-0169-02

趙訓智，男，1974年9月出生，漢族，湖北石首人，本科學歷，主任醫師，研究方向：中西醫結合治療肝膽病