肺結核患者淋巴細胞亞群檢測結果與臨床特征的相關性探討

石文卉 陳維 荊瑋 聶文娟 周文強 初乃恵

·論著·

肺結核患者淋巴細胞亞群檢測結果與臨床特征的相關性探討

石文卉 陳維 荊瑋 聶文娟 周文強 初乃恵

目的 分析肺結核患者淋巴細胞亞群測定的結果，探討其異常情況與患者臨床特征的關系。方法 選取2015年5月至2016年5月于首都醫科大學附屬北京胸科醫院結核科住院的200例肺結核患者作為研究對象，收集其基本信息、入院期間的疾病狀態，以及淋巴細胞亞群檢測結果。分析研究對象淋巴細胞亞群變化情況與其臨床特征的相關性。結果 200例患者中CD4+T細胞百分比正常者164例(82.0%)、升高者5例(2.5%)、降低者31例(15.5%)；對藥物敏感患者中CD4+T細胞百分比降低者的構成比[25%(19/76)]高于耐藥結核病患者[9.7% (12/124)](χ2=8.12，P=0.004)。CD8+T細胞百分比正常者171例(85.5%)、升高者23例(11.5%)、降低者6例(3%)；年齡≥60歲的患者和無空洞的患者中CD8+T細胞百分比升高者的構成比[21.4%(12/56)、22.2%(12/54)]分別高于年齡<60歲者和并發空洞者[7.6%(11/144)、7.5%(11/146)](χ2值分別為8.12和8.56，P值分別為0.004和0.003)。自然殺傷細胞(natural killer cell，NK細胞)百分比正常者170例(85%)、升高者15例(7.5%)、降低者15例(7.5%)；對藥物敏感患者中NK細胞百分比升高者的構成比[14.5%(11/76)]高于耐藥結核病患者[3.2%(4/124)] (χ2=9.06，P=0.003)。B細胞百分比正常者159例(79.5%)、升高者8例(4%)、降低者33例(16.5%)；女性患者中B細胞百分比升高者的構成比[10.5%(6/57)]高于男性患者[1.4%(2/143)](χ2=6.99，P=0.008)；男性患者中B細胞百分比降低者的構成比[32.1%(18/56)]高于女性患者[10.4%(15/144)](χ2=6.24，P=0.013)；無空洞患者B細胞百分比升高者的構成比[11.1%(6/54)]高于并發空洞者[1.4%(2/146)](χ2=11.55，P=0.001)；年齡≥60歲患者中B細胞百分比降低者的構成比[32.1%(18/56)]高于年齡<60歲者[10.4%(15/144)](χ2=13.76，P=0.001)。結論 肺結核患者對藥物敏感可能與NK細胞和CD4+T細胞百分比的升高或降低有關；患者無空洞可能與CD8+T細胞和B細胞百分比的升高有關。

結核，肺； T淋巴細胞亞群； B淋巴細胞亞群； 數據說明, 統計； 評價研究

結核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)感染率高，但發病率卻較低，表明結核病發生、發展和轉歸不僅與機體感染的細菌量及其毒力等因素相關，同時也與患者的免疫功能存在直接的關系[1]。結核病的免疫機制較為復雜，機體在受到MTB的入侵之后，會產生一系列的細胞免疫和體液免疫反應[2-3]。外周血淋巴細胞亞群是檢測機體細胞免疫和體液免疫功能的重要指標，但這些指標是否能反映患者的免疫狀況，值得進一步研究。因此，筆者回顧分析了200例肺結核患者的臨床資料，收集其淋巴細胞亞群中CD3+T細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、自然殺傷細胞(natural killer cell，NK細胞)和B細胞的檢測結果，分析淋巴細胞異常與其疾病狀態的相關性，現報道如下。

對象和方法

1.研究對象：選取2015年5月至2016年5月于首都醫科大學附屬北京胸科醫院結核科住院的200例肺結核患者作為研究對象。所有患者的確診標準參考《臨床診療指南：結核病分冊》[4]。

2.納入與排除標準：(1)肺結核診斷均符合《臨床診療指南：結核病分冊》中的標準；(2)排除合并甲狀腺疾病、類風濕關節炎、系統性紅斑狼瘡者；(3)排除入院3個月前使用免疫調節劑者；(4)排除孕婦或者哺乳期婦女。

3.資料收集：查詢并綜合統計研究對象的基本信息(包括年齡、性別等)，入院期間的疾病狀態(包括臨床癥狀、診斷結果、初治或復治、耐藥與否、是否并發空洞、涂片及培養結果、是否并發糖尿病等)，以及相關指標檢查結果[包括CD3+T細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、NK細胞、B細胞的百分比]。對異常的檢查結果結合其疾病情況綜合分析兩者間的相關性。

4.統計學分析：應用SPSS 12.0統計學軟件進行數據處理。對調查對象臨床信息進行描述性分析，采用χ2檢驗比較研究對象各類淋巴細胞亞群百分比正常、升高及降低在年齡、性別、臨床特征等方面分布的差異，以P<0.05為差異有統計學意義；對分布差異有統計學意義的因素進一步進行組內兩兩比較，檢驗水準α校正為0.025。

結 果

1.基本情況：200例患者中，男143例(71.5%)，女57例(28.5%)；年齡范圍為11～88歲，平均(42.35±10.24)歲；≥60歲者56例(28.0%)，<60歲者144例(72.0%)。研究對象中，146例(73.0%)患者肺內有空洞，54例(27.0%)無空洞；124例(62.0%)患者存在耐藥，76例(38.0%)無耐藥；52例(26.0%)并發糖尿病。初治98例(49.0%)，復治102例(51.0%)。

2.淋巴細胞亞群變化與臨床特征的關系：200例患者中，CD3+T細胞百分比正常者166例(83.0%)、升高者23例(11.5%)、降低者11例(5.5%)，其分布情況與患者臨床特征未見相關性。CD4+T細胞百分比正常者164例(82.0%)、升高者5例(2.5%)、降低者31例(15.5%)，患者耐藥與否對CD4+T細胞百分比的變化有影響，進一步比較發現藥物敏感患者中CD4+T細胞百分比降低者的構成比更高(χ2=8.12，P=0.004)。CD8+T細胞百分比正常者171例(85.5%)、升高者23例(11.5%)、降低者6例(3.0%)，患者年齡和并發空洞與否對CD8+T細胞百分比的變化有影響，進一步分析發現年齡≥60歲的患者(χ2=8.12，P=0.004)和無空洞的患者(χ2=8.56，P=0.003)中CD8+T細胞百分比升高者的構成比更高。NK細胞百分比正常者170例(85.0%)、升高者15例(7.5%)、降低者15例(7.5%)，患者年齡和耐藥與否對NK細胞百分比變化有影響，進一步分析發現藥物敏感患者中NK細胞百分比升高者構成比更高(χ2=9.06，P=0.003)。B細胞百分比正常者159例(79.5%)、升高者8例(4.0%)、降低者33例(16.5%)，患者性別、年齡和并發空洞與否對B細胞百分比變化有影響，進一步分析發現女性患者中B細胞百分比升高者的構成比更高(χ2=6.99，P=0.008)；男性患者中B細胞百分比降低者的構成比更高(χ2=6.24，P=0.013)；無空洞患者B細胞百分比升高者的構成比更高(χ2=11.55，P=0.001)；年齡≥60歲患者中B細胞百分比降低者的構成比更高(χ2=13.76，P=0.001)(表1)。

表1 肺結核患者淋巴細胞亞群變化與臨床特征的關系[例(構成比，%)]

討 論

機體免疫系統中各淋巴細胞的亞群數量及功能出現異常，理論上會造成機體免疫功能紊亂，導致發病[5-6]。但在臨床中經常可以看到，重癥及耐藥的結核病患者T淋巴細胞檢測顯示正常，而輕癥患者可能顯示異常，由此提示結核病的發生和發展過程中可能存在更復雜的機體免疫反應。

CD3+T細胞不直接參與抗結核免疫中的抗原識別，但可通過信號轉導作用激活T淋巴細胞，啟動細胞免疫[7]。筆者發現，肺結核患者CD3+T細胞百分比的升高或降低與患者性別、年齡、初復治、耐藥情況、有無空洞和是否并發糖尿病均無相關性，與既往研究一致[8-9]。有研究表明，耐藥與否與CD3+T細胞百分比升高或降低無明顯相關性[10]，但也有研究顯示，耐藥患者的CD3+T細胞百分比會降低[11]；此研究差異存在的原因可能是沒有對耐藥進行獨立分析，或研究對象數量較少。另外也有研究表明，糖尿病并發結核病患者CD3+T細胞百分比降低[12]。由此推測，CD3+T淋巴細胞百分比的升高或降低可能難以反映機體的免疫狀況。

機體感染結核分枝桿菌后，一方面CD4+T細胞通過分泌細胞因子，如γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)，誘導巨噬細胞活化，從而抑制胞內細菌的生長，這對機體有效防御結核分枝桿菌至關重要[13-14]；另一方面，CD4+T細胞能積極影響非淋巴組織中的CD8+T細胞(例如肺)，促進CD8+T細胞分泌IFN-γ[15]，從而促進疾病的治愈。理論上，輕癥及藥物敏感患者CD4+T淋巴細胞百分比應該增高，但在本研究中CD4+T細胞百分比降低在對藥物敏感患者中更明顯，與相關研究不一致[11]。究其原因，可能由于本研究中CD4+T細胞百分比下降的19例對藥物敏感患者中有7例并發糖尿病，而12例耐藥結核病患者無并發糖尿病。CD4+T細胞百分比異常與患者年齡、性別、初復治等其他因素均未見相關性。

CD8+T淋巴細胞能夠識別結核分枝桿菌胞質抗原進而攻擊靶細胞，或通過細胞凋亡破壞結核分枝桿菌生長環境，從而發揮其獨特的抗結核作用。筆者研究發現，≥60歲患者CD8+T淋巴細胞百分比升高較明顯，與周曉映等[16]的研究一致。無空洞的患者升高也較明顯，與張少俊和肖和平[17]的研究結果有差別，可能與本研究中CD8+T淋巴細胞百分比升高的11例有空洞的患者中有7例為復治患者有關，因有研究表明，復治患者CD8+T淋巴細胞百分比升高較明顯[18]。

NK細胞是機體免疫系統中參與排斥反應的細胞，具有變形殺傷和防止病原體感染的作用。NK細胞中含有顆粒溶素，在穿孔素的作用下，能夠到達細胞核部位，起到殺傷結核分枝桿菌的作用。故NK細胞在機體針對結核分枝桿菌感染產生的免疫反應中也發揮關鍵作用[19-20]。本研究中對藥物敏感的患者NK細胞百分比升高較明顯，可能與本研究中NK細胞百分比異常患者例數較少有關，仍需進一步探討。NK細胞百分比異常與患者年齡、性別、初復治等因素均未見相關。

目前，關于B淋巴細胞抗結核作用的研究較少。因此，筆者對B淋巴細胞百分比異常與結核病患者臨床特征的相關性進行了探討。研究發現，年齡≥60歲的患者B淋巴細胞百分比下降較明顯；無空洞患者B淋巴細胞百分比異常的比例較高。但本研究中B淋巴細胞百分比異?；颊呃龜递^少，所得結論還需進一步驗證。

本次研究中包含52例肺結核并發糖尿病的患者，經研究發現，患者并發糖尿病與否對淋巴細胞亞群的變化未見影響。本次回顧性分析尚存在一定局限性，如研究只能呈現出一定的現象，難以考究其內在的本質；研究對象數量較少，還應擴大，以便獲得更可靠的數據；患者進行的檢測均只進行1次，可能會存在誤差；沒有對檢測指標進行治療前后的比較，以及沒能與健康人群進行對比分析。綜上所述，肺結核患者CD3+T細胞百分比的改變可能與臨床特征無關；患者藥物敏感可能與NK細胞和CD4+T細胞百分比的升高或降低有關；患者無空洞可能與CD8+T細胞和B細胞百分比的升高有關。

[1] 楊越明, 孫小軍, 許文芳. 輔助性T細胞17及調節性T細胞調節初治肺結核患者免疫功能的作用. 國際流行病學傳染病學雜志, 2014, 41(6): 378-381.

[2] 聶尚丹, 黃炳成.肺結核患者T淋巴細胞凋亡研究進展.濟寧醫學院學報, 2013, 36(2): 147-149.

[3] Ahmad S.Pathogenesis, immunology,and diagnosis of latentMycobacteriumtuberculosisinfection.ClinDevImmunol,2011, 2011:814943.

[4] 中華醫學會.臨床診療指南：結核病分冊.北京: 人民衛生出版社, 2005.

[5] 郝曉暉, 姚嵐, 唐神結, 等.初治耐多藥肺結核臨床療效及其轉歸隊列分析.中華傳染病雜志, 2012, 30(3): 157-161.

[6] 陳廷, 聶尚丹, 趙建磊, 等. 肺結核患者免疫功能狀態的研究. 中華疾病控制雜志, 2011, 15(5): 381-383.

[7] 于春寶, 左云, 王俊玲, 等. 肺結核病人細胞免疫功能的研究. 臨床肺科雜志, 2008, 13(2): 138-139.

[8] 丁愛華, 王尚武. 淋巴結核患者外周血中T淋巴細胞亞群的檢測及其意義. 國際檢驗醫學雜志, 2012, 33(20): 2547-2549.

[9] 王慶楓, 韓喜琴, 陳玉玲, 等. 肺結核患者T淋巴細胞亞群的檢測及臨床意義. 北京醫學, 2013, 35(12)：993-995.

[10] 何綱, 丁佩佩, 甄沛林, 等. 非耐藥與耐多藥肺結核患者外周血T淋巴細胞亞群及細胞因子的變化. 中國感染控制雜志, 2013, 12(5): 326-329.

[11] 雷鳴. 普通肺結核與耐多藥肺結核T淋巴細胞亞群的臨床特征. 中國實用醫刊, 2016, 43(18): 80-81.

[12] 唐宗青. 2型糖尿病合并肺結核患者免疫學指標的檢測及臨床意義. 檢驗醫學與臨床, 2014, 11(7)：934-935.

[13] 張賢蘭, 呂江青, 林兆原, 等. 肺結核患者CD4+T淋巴細胞凋亡及相關細胞因子水平變化. 廣東醫學, 2008, 29(10): 1664-1666.

[14] 繆昌東. 34例耐多藥肺結核治療情況分析. 臨床肺科雜志, 2011, 16(10): 1622-1623.

[15] Bold TD, Ernst JD. CD4+T cell-dependent IFN-γ production by CD8+effector T cells inMycobacteriumtuberculosisinfection. J Immunol, 2012, 189(5): 2530-2536.

[16] 周曉映, 于紅艷, 原淑鴻, 等. 老年肺結核患者外周血中T淋巴細胞亞群和NK細胞的改變及臨床意義. 河北醫藥, 2009, 31(2): 169.

[17] 張少俊, 肖和平. 復治肺結核與初治結核病患者外周血T細胞亞群等的變化及其意義. 中華結核和呼吸雜志, 2011, 34(12): 884-887.

[18] 黃麗靜, 陳焯彬, 韋永孜, 等. 肺結核患者病情嚴重程度與免疫功能受損程度的相關性研究.海南醫學, 2016, 27(9): 1424-1426.

[19] 段靜, 侯超, 毛源. 老年與青年肺結核患者免疫功能差異的探討. 實用老年醫學, 2014, 28(11): 937-940.

[20] 王心靜, 楊秉芬, 原艷明, 等. 初治菌陽肺結核患者外周血NK細胞比例顯著下降. 免疫學雜志, 2013, 29(8): 677-680.

(本文編輯：李敬文)

Correlation between lymphocyte subsets and disease status in patients with pulmonary tuberculosis

SHIWen-hui,CHENWei,JINGWei,NIEWen-juan,ZHOUWen-qiang,CHUNai-hui.

Departmentoftuberculosis,BeijingChestHospitalaffiliatedtoCapitalMedicalUniversity

CHUNai-hui,Email:dongchu1994@sina.com

Objective Analyzing the lymphocyte subsets of pulmonary tuberculosis (PTB) patients, so as to explore the relationship between its result and clinical characteristics. Methods A total of 200 PTB patients from May 2015 to May 2016 were chosen in Beijing Chest Hospital affiliated to Capital Medical University. Their clinical characteristics and lymphocyte subsets tests’ results were collected. The relationship between lymphocyte subsets and clinical characteristics was analyzed. Results Of all the 200 cases, 164 (82.0%) patients’ CD4+T cell proportion was normal, 5 (2.5%) higher, 31 (15.5%) lower. Drug-sensitive patients’ proportion (19/76, 25%) with low-level CD4+T cell was higher than drug-resistant patients (12/124, 9.7%) (χ2=8.12，P=0.004). 171 (85.5%) patients’ CD8+T cell proportion was normal, 23 (11.5%) higher, 6 (3%) lower. Patients ≥60 years old (21.4%, 12/56) and no-cavity patients’ (22.2%, 12/54) proportions with high-level CD8+T cell were higher than patients <60 years old (7.6%, 11/144) and cavity-positive patients (7.5%, 11/146) (χ2=8.12,P=0.004;χ2=8.56,P=0.003). 170 (85.0%) patients’ natural killer (NK) cell proportion was normal, 15 (7.5%) higher, 15 (7.5%) lower. Drug-sensitive patients’ proportion (14.5%, 11/76) with high-level NK cell was higher than drug-resistant patients (3.2%, 4/124) (χ2=9.06,P=0.003). 159 (79.5%) patients’ B cell proportion was normal, 8 (4.0%) higher, 33 (16.5%) lower. Female proportion (10.5%, 6/57) with high-level B cell was higher than male (1.4%, 2/143) (χ2=6.99,P=0.008). Male proportion (21.0%, 30/143) with low-level B cell was higher than female (5.3%, 3/57) (χ2=6.24,P=0.013). No-cavity patients’ (11.1%, 6/54) proportions with high-level B cell were higher than cavity-positive patients (1.4%, 2/146) (χ2=11.55,P=0.001). Patients ≥60 years old (32.1%, 18/56) proportions with low-level B cell were higher than patients <60 years old (10.4%, 15/144) (χ2=13.76,P=0.001). Conclusion Drug susceptibility may be of high relevance to CD4+T cell’s level. Patients with no-cavity may be of high relevance to high-level CD8+T cell and B cell.

Tuberculosis, pulmonary; T-lymphocyte subsets; B-lymphocyte subsets; Data interpretation, statistical; Evaluation studies

10.3969/j.issn.1000-6621.2017.02.007

“十二五”國家科技重大專項(2015ZX10003001-002)；北京市醫院管理局臨床醫學發展專項經費資助(ZYLX201304)

101149 首都醫科大學附屬北京胸科醫院結核科

初乃惠，Email: dongchu1994@sina.com

2016-11-11)