孟魯司特鈉片的含量測定方法學研究

魏子龍+李文蘭

摘 要：目的：研究并驗證HPLC法檢查孟魯司特鈉片的含量測定方法。方法：采用苯基硅烷鍵合硅膠色譜柱；以0.15%三氟乙酸溶液-0.15%三氟乙酸乙腈溶液（45：55）為流動相；檢測波長為238nm。結果：方法的專屬性、準確度、精密度及耐用性良好；在孟魯司特鈉的進樣量為0.424μg～4.24μg范圍內，進樣濃度與色譜峰面積線性關系良好，平均回收率為99.53%，RSD為1.13%（n=9）。結論：本方法簡便、快速、靈敏，可有效檢測孟魯司特鈉片的含量。

關鍵詞：孟魯司特鈉；含量測定；HPLC

孟魯司特鈉，由默沙東公司研發、生產，并于1999年，獲得中國國家食品藥品監督管理局批準正式上市，是一種口服的白三烯受體拮抗劑，能特異性抑制氣道中的半胱氨酰白三烯（CysLT1）受體，從而達到改善氣道炎癥，有效控制哮喘癥狀，適用于成人和1歲以上兒童哮喘的預防和長期治療及過敏性鼻炎的治療，根據我國《支氣管哮喘防治指南》2008年版推薦可單獨應用的長期控制藥，可作為輕度哮喘的替代治療藥物和中重度哮喘的聯合治療用藥。

國家藥典委員會發布了孟魯司特鈉片的國家標準征求意見稿，標準中采用高效液相色譜法檢測孟魯司特鈉片中孟魯司特的含量，本研究將對該方法進行詳細的方法學研究，以判斷該方法是否適合于孟魯司特鈉片產品質量控制。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（安捷倫1200）；色譜柱：硅膠色譜柱；孟魯司特鈉片（批號：160101、160102、160103，實驗室自制）；孟魯司特二環己胺鹽對照品（含量為100%），購自中檢所。

甲醇、乙腈均為色譜級；其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

本品的含量檢查方法參照國家藥典委員發布的孟魯司特鈉片標準征求意見稿中色譜條件進行。

2.1 色譜條件

色譜柱：苯基硅烷鍵合硅膠色譜柱；以0.15%三氟乙酸溶液-0.15%三氟乙酸乙腈溶液（45：55）為流動相；檢測波長為238nm；流速：1.0ml/min；進樣量20μl。

2.2 供試品溶液的制備

取本品片20片，精密稱定， 研細，精密稱取適量（約相當于孟魯司特10mg），加入到100ml的量瓶中，加入90%甲醇溶液適量， 超聲約15分鐘使孟魯司特鈉溶解，用90%甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。

2.3 對照品溶液的制備

取孟魯司特二環己胺鹽對照品適量，精密稱定，加入適宜的量瓶內，用90%甲醇溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含孟魯司特0.1μg的溶液，振搖使混合均勻，作為對照品溶液。

2.4 專屬性實驗

按照處方量精密稱量本品中的輔料，按照供試品溶液的配制、稀釋方法配制輔料空白溶液，精密量取20μl注入色譜儀，記錄色譜圖。

結果：輔料和溶劑在孟魯司特出峰處無干擾。

2.7 溶液穩定性試驗

取供試品溶液分別于0、1、2、4、6小時進樣，考察各個時間點溶液中孟魯司特峰峰面積的RSD%，驗證孟魯司特供試品溶液的穩定性。

結果：孟魯司特峰面積6小時內RSD為0.8%，結果表明孟魯司特鈉含量測定溶液在6小時內穩定性良好。

2.8 線性試驗

精密稱取孟魯司特二環己胺鹽對照品適量，分別配制成每1ml分別含孟魯司特濃度約為20μg、75μg、100μg、150μg、200μg的對照品溶液，分別進樣20μl，記錄譜圖。以孟魯司特的峰面積為縱坐標，以孟魯司特二環己胺鹽對照品的進樣量為橫坐標，計算線性回歸方程及線性相關系數。

結果：孟魯司特線性方程為：y=4258708x-100257，r=0.9999；表明該方法孟魯司特進樣量在0.424μg～4.24μg范圍內均線性關系良好。

2.9 定量限試驗

取2.8項下的對照品溶液進一步稀釋，精密量取20μl注入高效液相色譜儀，以信噪比10：1時濃度計算進樣量為檢測限。

結果：將2.8項下濃度最低的對照品溶液稀釋適宜的倍數后，當其色譜峰信噪比即約為10：1時，由該溶液的濃度計算出孟魯司特鈉的檢測限為4.24ng。

2.10 回收率試驗

取本品輔料適量，按照處方配比稱量各輔料9份，分成3組，置100ml容量瓶內，分別精密加入孟魯司特二環己胺鹽對照品適量，按照供試品溶液稀釋方法配制，使每1ml溶液中含孟魯司特二環己胺鹽對照品的加入量分別為40μg、50μg、60μg，并按照規定的方法分別配制對照品溶液，量取以上各溶液20μl，按照以上檢測條件分別進樣檢測，記錄譜圖，計算回收率。

結果：平均回收率為99.53%，RSD為1.13%，說明本方法耐用性較好。

2.11 中間精密度試驗

取孟魯司特鈉片樣品，按照標準中規定的方法配制孟魯司特鈉對照品溶液和供試品溶液，分別由不同人員、不同儀器、不同日期按照規定的檢測條進樣檢測，記錄譜圖，計算RSD%。

結果：不同人員、不同儀器、不同日期分別檢測孟魯司特含量結果間RSD為1.70%，表明本方法中間精密度良好。

2.12 重復性試驗

取孟魯司特鈉片樣品，按照標準中規定的方法配制孟魯司特鈉對照品溶液和供試品溶液各6份，按照規定的檢測條進樣檢測，記錄譜圖，計算RSD%。

結果：孟魯司特鈉片6次含量測定結果間RSD為0.97%，表明本方法重復性良好。

2.13 耐用性試驗

取孟魯司特鈉片樣品，按照規定的方法配制孟魯司特鈉對照品溶液和供試品溶液，調整流動相比例分別為40：60，45：55，50：50；分別調整流動相的流速為1.0ml/min、0.8ml/min、1.2ml/min；檢測波長分別為238nm、236nm、240nm；分別精密量取以上各溶液20μl，按照以上檢測條件分別進樣檢測，記錄譜圖，考察耐用性。

結果：液相各檢測條件輕微改變后，孟魯司特鈉片含量測定結果無明顯差異，說明本方法耐用性較好。

2.14 孟魯司特鈉片含量測定

取三批樣品，檢查孟魯司特鈉片含量，結果三批含量結果分別為100.48%、100.11%、100.23%。

3 討論

本品的含量測定參照國家藥典委員會孟魯司特鈉片標準征求意見稿中方法進行檢查。方法學驗證結果表明，方法的專屬性、準確度、中間精密度、重復性、耐用性較好，檢測靈敏度較高。該方法簡便、快捷，可準確檢測孟魯司特鈉片的含量。

參考文獻：

[1] 國家藥典委員會，孟魯司特鈉片標準征求意見稿.