薄層色譜法鑒別金菊五花茶顆粒中的射干苷

崔志海，張 輝

（廊坊市藥品檢驗所，河北 廊坊 065000）

金菊五花茶顆粒是由金銀花、木棉花、葛花、野菊花、槐花、甘草等6種藥味經提取制成的顆粒劑，具有清熱利濕、涼血解毒、清肝明目的功效，用于大腸濕熱所致的泄瀉、痢疾、便血、痔血以及肝熱目赤，風熱咽痛，口舌潰爛等癥[1]。金菊五花茶顆?，F行標準為《衛生部藥品標準》中藥成方制劑第十冊，標準中僅規定了一項理化鑒別和蘆丁的薄層色譜法鑒別，缺少對葛花的專屬性鑒別。本研究針對葛花主要含射干苷等異黃酮成分[2][3]的特性，參考有關文獻資料，采用薄層色譜法對金菊五花茶顆粒中的射干苷進行鑒別，并進行了相關方法學驗證，為提高金菊五花茶顆粒的質量標準提供了方法參考，有利于保證該藥品的質量。

1 資料與方法

1.1 儀器

CAMAG TLC Visualizer薄層色譜存檔系統；WD-9403C紫外分析儀；科導SK7210超聲儀；賽多利斯CPA224S電子天平（感量0.1 mg）。

1.2 材料

射干苷（批號：111632-200602），購自中國食品藥品檢定研究院。薄層板為硅膠GF254手鋪板及預制板；硅膠GF254產地：青島海洋化工廠；預制板產地：（1）煙臺市化工研究所（批號：20150320），（2）德國默克公司（批號：HX54736129）。試劑試藥均為分析純，水為超純水。

1.3 樣品

金菊五花茶顆粒樣品3批：⑴廣州萊泰制藥有限公司（批號：160617）；⑵廣東嘉應制藥股份有限公司（批號：20150501）；⑶廣西方略集團龍州制藥有限公司（批號：1505001）。葛花樣品11批，購自北京同仁堂（亳州）飲片有限責任公司、河北漢草堂藥業有限公司等藥企及安國、亳州中藥材市場，來源覆蓋了葛花主要產區。樣品經河北省藥品檢驗研究院段吉平主任藥師鑒定為正品。

2 結 果

2.1 試驗方法

取金菊五花茶顆粒10 g，研細，加甲醇30 mL，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5 mL，作為供試品溶液。取射干苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。

2.2 專屬性考察

按金菊五花茶顆粒的處方比例，取葛花以外的其余5種藥味，粉碎后照“2.1”項下供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。取3批金菊五花茶顆粒樣品，分別按“2.1”項下方法制成供試品溶液。吸取供試品溶液、對照品溶液與陰性對照溶液各5μl，按“2.1”項下方法進行試驗。結果供試品色譜中，在與對照品色譜相對應的位置上，均顯相同顏色的斑點；在供試品和對照品色譜所顯斑點相對應的位置上，陰性對照溶液無斑點。結果表明陰性對照溶液無干擾。（見圖1）

圖1 金菊五花茶顆粒薄層鑒別色譜圖硅膠GF254預制板（德國默克公司）

2.3 耐用性考察

吸取供試品溶液、對照品溶液各5 μL，按照“2.1”項下方法，分別使用不同來源的薄層板，在不同溫度、相對濕度下進行試驗。結果表明，在不同溫度濕度下，色譜的分離效果均較好，說明溫濕度對本法的影響較?。ㄒ妶D2）；使用進口預制板、國產預制板、手鋪板，供試品色譜與對照品色譜的斑點均較清晰，說明不同來源的薄層板對本法無明顯影響。（見圖3）

圖2 不同溫濕度條件下的金菊五花茶顆粒薄層鑒別色譜圖

圖3 不同來源薄層板的金菊五花茶顆粒薄層鑒別色譜圖

3 討 論

3.1 供試品的提取

考察了加熱回流與超聲提取兩種方法。取同一供試品，分別采用加熱回流30分鐘和超聲30分鐘進行提取，按同法試驗，結果表明超聲法提取的供試品色譜所顯斑點更佳。因此采用超聲提取方式。

3.2 有的文獻中將葛花所含的射干苷描述為鳶尾苷，兩者應為同一物質

射干苷對照品標簽的英文名稱為“Belamcandin（Tectoridin）”。

3.3 將11批葛花樣品粉碎后

分別取0.5 g，照“2.1”項下供試品溶液制備方法提取后同法進行薄層色譜分析。結果11批葛花樣品色譜均顯與射干苷對照品相對應的的斑點。

3.4 如以葛花作為對照

因所顯斑點較多，陰性對照溶液在與葛花藥材色譜中1～2處相應的位置處也顯有斑點，存在干擾；同時葛花對照藥材目前沒有商品供應，因此選擇以射干苷作為對照進行鑒別。

[1]衛生部藥典委員會.衛生部藥品標準[S].中藥成方制劑.第十冊,1992:90.

[2]國家中醫藥管理局.中華本草[M].第十一卷.上海：上?？茖W技術出版社,1999:619-620.

[3]張國峰,吳 瑕,等.HPLC法同時測定野葛花中4種異黃酮成分的含量[J].沈陽藥科大學學報,2009,26(01):40-44.