國產馬波沙星注射液在母豬體內的藥代動力學

岳永波，吳好庭，范小平，楊芳，劉波，李天云

(1．保定冀中藥業有限公司河北省中獸藥工程技術研究中心，河北保定071500;2．中國獸醫藥品監察所，北京海淀100081;3．海南省獸藥飼料監察所，海南?？?70203)

國產馬波沙星注射液在母豬體內的藥代動力學

岳永波1，吳好庭2，范小平3，楊芳1，劉波1，李天云1

(1．保定冀中藥業有限公司河北省中獸藥工程技術研究中心，河北保定071500;2．中國獸醫藥品監察所，北京海淀100081;3．海南省獸藥飼料監察所，海南?？?70203)

為了考察國產馬波沙星注射液在母豬體內的藥動學數據，給臨床用藥提供依據。選用18頭健康長白、大白母豬(體重222．0±31．9 kg)，隨機分為2組，分別以每千克體重2．0 mg的劑量靜脈注射或肌肉注射馬波沙星注射液。在給藥前后按設計時間點從母豬前腔靜脈采集血液，離心后取上清液，用反相高效液相色譜法(HPLC)測定血漿中藥物的濃度，采用美國Pharsight公司藥動學軟件Winnonlin5．2．1的非房室模型來處理血漿藥物濃度－時間數據。結果:主要藥動學參數分別為:(1)肌肉注射馬波沙星注射液:MRT(20．20±3．71)h;t1/2"(21．09±5．18)h;AUC(32．94±4．41)μg/h·mL;tmax(1．72±0．97)h;Cmax(1．90±0．69)μg/mL，生物利用度(F)為80．2%;(2)馬波沙星注射液靜注:MRT(18．94±4．10)h;t1/2"(17．70±4．59)h;AUC(41．07±13．02)μg/h·mL;Vd(1．23±0．33)L/kg。表明:在健康母豬體內，馬波沙星肌肉注射給藥的主要藥動學特征為:吸收迅速完全，消除緩慢，生物利用度高。

馬波沙星注射液;藥動學;母豬;HPLC法

馬波沙星(marbofloxacin MBF)屬第3代喹諾酮類抗菌藥物，具有抗菌譜廣、消除半衰期長、生物利用度高的特點，以馬波沙星為主成分的注射液已在歐盟、新西蘭、日本等國家被批準用于獸醫臨床，主要用于治療母豬的乳房炎－子宮炎－無乳綜合征(MMA)以及牛細菌性呼吸道感染的治療［1-2］。

馬波沙星在豬、羊、雞、犬體內的藥動學特征研究［3-6］表明，該藥內服及非腸道給藥吸收迅速且完全，分布廣泛，血漿及組織中的濃度高，消除半衰期長，生物利用度高。這些優良的特性決定了馬波沙星在防治畜禽感染方面具有巨大潛力。目前，國內還未見有關馬波沙星在母豬體內的藥動學研究報道。本試驗探討了健康母豬肌肉注射、靜脈注射馬波沙星的藥物動力學過程及藥動學特征，旨在為獸醫臨床制定合理的給藥方案提供理論依據。

1 材料與方法

1．1 動物健康長白、大白母豬18頭，試驗前按常規飼養，自由飲水和采食，飼料為全價日糧(不含抗菌藥物)，觀察兩周，確認健康后，隨機分為2組，A組9頭，B組9頭。

1．2 藥品與試劑自制10%馬波沙星注射液;馬波沙星對照品:含量99．0%，德國Dr．Ehrenstorfer GmbH公司產;甲酸、三乙胺等均為國產分析純試劑;甲醇、乙腈，色譜純級，美國Fisher Scientific公司。

1．3 儀器高效液相色譜儀:ACQUITY UPLC型，美國WATERS公司;色譜柱:Gemini C18(4．6mm× 250mm，5μm)，不銹鋼柱，廣州菲羅門科學儀器有限公司;臺式高速離心機:Centrifuge5804，德國EPPENDORF公司;旋渦混合器:XW－80A，上海青浦滬西儀器廠。

1．4 給藥和血樣采集10%馬波沙星注射液，A組頸部肌肉注射、B組耳緣靜脈注射，以每千克體重2．0 mg劑量，單次給藥。給藥前采空白血樣，肌肉注射給藥后0．167、0．25、0．5、0．75、1、1．5、2、3、4、6、9、12、16、24、36、48、72、96 h分別采集血液樣品;靜脈注射給藥后0．083、0．167、0．25、0．5、0．75、1、1．5、2、3、4、6、9、12、16、24、36、48、72、96 h分別采集血樣;豬只站立式保定，頸靜脈采血，每次采血5 mL左右。采集靜脈血置于含0．5%肝素鈉的離心管中，混勻，3 000 r/min，離心10 min，分離血漿，置－20℃冰箱保存，待測。

1．5 血漿中馬波沙星濃度的測定血漿樣品前處理方法參照梅雪潔等［4］報道的山羊血漿前處理方法。從冰箱中取出血漿，室溫解凍，渦旋混勻。準確吸取0．5 mL于2 mL進口離心管中，加入1 mL色譜甲醇，旋渦混合器混勻，置軌道式搖床上震蕩10 min。以15 000 r/min(4℃)離心10 min，用1 mL一次性注射器吸取上清液，過0．2 μm有機相針式過濾器至2 mL棕色進樣瓶中，自動進樣器進樣20 μL，進行UPLC紫外檢測。色譜柱:Gemini C18(4．6 mm×250 mm，5 μm);流動相為甲酸溶液(pH值3．0)－乙腈(84:16，V/V);檢測波長: UV/295 nm;柱溫:30℃;流速:1．0 mL/min。在上述色譜工作條件下，馬波沙星與血漿中其他組分分離良好，豬血漿中馬波沙星的最低檢測限為0．02 μg/mL，定量限為0．05 μg/mL。標準曲線在0．05～5 μg/mL范圍內線性關系良好(R=0．9999～1．0000)，批內及批間變異系數均值分別為3．31%和6．32%。

1．6 數據分析處理采用美國Pharsight公司藥動學軟件Winnonlin5．2．1的非房室模型來處理藥動數據，計算出每頭試驗母豬的藥動學參數，然后計算平均值(珔X)及標準誤(S．E．)，同時以血藥濃度平均值對時間作藥－時曲線。

2 結果

健康母豬單劑量肌肉注射、靜脈注射馬波沙星注射液后，不同時間血藥濃度實測值見表1，采用美國Pharsight公司藥動學軟件Winnonlin5．2．1的非房室模型來處理藥動數據，藥物動力學參數見表2，藥物－時間曲線圖見圖1．

表1 健康母豬肌肉注射、靜脈注射馬波沙星注射液(2．0 mg/kg)的血藥濃度(珔x±s．E．n=9)單位:μg/mL

3 討論

3．1 肌肉注射給藥的藥動學特征觀察試驗母豬肌肉注射馬波沙星注射液(2．0 mg/kg)后的藥－時曲線(見圖1)發現，肌肉注射藥物后，吸收較為迅速，tmax=1．72 h，Cmax=1．90 μg/mL;t1/2β為20．09 h，消除緩慢，顯著長于恩諾沙星［7］、沙拉沙星［8］、達氟沙星［9］，與健康豬的17．99 h［3］基本一致，馬波沙星的生物利用度為80．2%，說明肌肉注射給藥吸收較為完全，低于健康豬的107．86%［3］。藥動學參數詳見表2。

3．2 靜脈注射給藥的藥動學特征健康母豬靜脈注射馬波沙星注射液(2．0 mg/kg)后，采用非房室模型分析靜脈注射給藥的藥動學數據，馬波沙星靜脈注射給藥后表觀分布容積Vd為1．23 L/kg體重，結果表明馬波沙星分布廣泛。與哺乳期母豬［10］靜脈注射給藥馬波沙星(2．0 mg/kg體重)后Vd為1．27 L/kg體重比較，顯示出相似的分布特征。與馬波沙星靜脈注射健康豬給藥后Vd、Vd(ss)分別為3．61 L/kg體重、2．69 L/kg體重(李云峰等，2004)相比，有較大的差異。在其他動物亦可見相似的特征，但存在一定的種屬差異。藥動學參數詳見表2，藥－時曲線圖見圖1。

圖1 母豬單劑量靜脈注射、肌肉注射10%馬波沙星注射液的藥－時曲線圖

表2 母豬肌肉注射、靜脈注射馬波沙星注射液(2．0 mg/kg)后的藥物動力學參數

馬波沙星的消除半衰期(t1/2β)為17．7 h，顯著高于Petracca等［10］報道的哺乳期母豬(5．92 h)，與李云峰等［3］報道的健康豬(16．22 h)接近;與其他氟喹諾酮類藥物在健康豬的t1/2β比較，顯著長于恩諾沙星［7］、沙拉沙星［8］、達氟沙星［9］。也顯著長于馬波沙星在嶺南黃雞［5］、山羊［4］的消除半衰期。

3．3 母豬的給藥方案本試驗中母豬按2．0 mg/kg體重一次肌肉注射后(見表1)，10 min血漿中馬波沙星的濃度即可達到1．04 μg/mL，30、60 min分別達到1．65、1．79 μg/mL，至12、48 h血漿中藥物濃度仍可維持0．81、0．18 μg/mL。馬波沙星對大部分致病菌的MIC值低于1．0 μg/mL(介于0．02～0．94 μg/ mL)，只有對鏈球菌的MIC值達3．8 mg/L。由于氟喹諾酮類藥物屬于濃度依賴性藥物，其臨床用藥給藥間隔可用AUC/MIC或Cmax/MIC來計算;此外，馬波沙星還表現出抗菌藥后效應。根據本試驗靜脈注射或肌肉注射所得AUC或Cmax與臨床常見致病菌MIC值計算可得，按2．0 mg/kg體重靜脈注射或肌肉注射馬波沙星注射液的給藥間隔為24～48 h，可應用對多數敏感菌的治療。因此推薦馬波沙星臨床用于敏感菌治療按2．0 mg/kg體重，肌肉注射給藥，每日1次。

［1］EMEA．TheEuropean agency for the evaluation of medicinal products veterinary medicines evaluation．marbofloxacin．summary．report［DB/OL］．http://www．ema．europa．eu/pdfs/vet/mrls/ 007996en．pdf．1996．

［2］EMEA．TheEuropean agency for the evaluation of medicinal products veterinary medicines evaluation．marbofloxacin．summary．report［DB/OL］．http://www．ema．europa．eu/pdfs/vet/mrls/ 069399en．pdf．1999．

［3］李云峰，曾振靈，陳杖榴，等．麻保沙星(marbofloxacin)在豬體內的藥物動力學［J］．中國獸醫學報，2004，24(2):177-179．

［4］梅雪潔，李引乾，龐利娜，等．麻保沙星在山羊體內的藥物動力學［J］．西北農業學報，2009，18(3):38-41．

［5］黃顯會，陳杖榴，張淑婷，等．麻保沙星在雞體內的生物利用度及藥物動力學［J］．中國獸醫學報，2002，22(3):279-281．

［6］張玲玲，潘安，趙杰，等．兩種劑型麻保沙星在健康家犬體內藥物動力學比較［J］．華中農業大學學報，2010，29(1):75-78．

［7］Richez P，Mrner A P，Jong A D，et al．Plasma pharmacokinetics of parenterally administered danofloxacin and enrofloxacin in pigs［J］．J Vet Pharmacol Therap，1997，20(supp l1):41242．

［8］丁煥中，曾振靈，馮淇輝，等．沙拉沙星在豬體內的藥動學研究［J］．中國獸醫學報，2000，20(5):493-496．

［9］Mann D D，Frame G M．Pharmacokinetic study of danofloxacin in cattle and swine［J］．Am J Vet Res，1992，53(6):1022-1026．

［10］Petracca K，Riond J L，Geaser T，et al．Pharmacokinetics of the grase inhibitor marbofloxacin:influence of pregnancy and lactation in sows［J］．Zentralbl Veterinarmed，1993，40(1):73-79．

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0529-6005(2017)01-0103-03

2016-04-29

岳永波(1971-)，男，高級工程師，碩士，主要從事動物藥學研究，E-mail:yueyongbo909@sohu．com