玉簪繁殖與組織培養技術的研究

隋昌海+王琳+徐麗萍+李國華

摘要：玉簪是重要的園林綠化植物，本文概述了玉簪的繁殖方式及影響玉簪植物組織培養的各種因素。主要評述了玉簪組織培養過程中的外在因素和內在因素兩方面影響。為大量獲得同步化玉簪苗木提供了新的思路。

關鍵詞：植物組織培養；愈傷組織；玉簪

中圖分類號：S682.19文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2016） 10（c）-0000-00

玉簪是重要的蔭生地被綠化植物，具有豐富的葉型、株型，且部分種（品種）的花擁有芳香氣味，是優秀的城市生態、園林建設植物。

野生玉簪屬植物資源主要存在于東亞的溫帶與亞熱帶地區，原產于我國的東部和南部及朝鮮、日本和俄羅斯遠東地區。目前分布情況是僅在北半球的亞溫帶和亞熱帶地區連續分布，主要包括中國、日本和朝鮮半島，俄羅斯遠東地區。

1.玉簪屬植物常規繁殖方式

1.1種子繁殖

玉簪屬植物種子結實率低，我國東北地區一般不結種子。種子萌發率在80%-85%之間，幼苗需在無陽光直射處生長。種子繁殖的植株3-4年才能開花，繁殖速度慢，因此實際生產中基本不以種子進行繁殖。

1.2分株繁殖

在玉簪的生產中最常用分株繁殖。一般玉簪每年可分蘗3-5個芽，分株時要將植株整體挖起，以一個芽或者2-3個芽為一株切分并栽培，栽培后要澆透水，并保持土壤濕而不澇。當年即可開花。但季節影響較大，只能于春秋兩季進行。目前還有羅斯法、割冠法等。分株法速度慢使其無法短時間提供大量種苗。

2.植物組織培養

植物組織培養是指在無菌的條件下，以植物的組織、器官或者原生質體為外植體，在人工培養基中進行培養，調整適當的培養條件，短時間內生長成完整植株的過程。利用植物組織組培技術進行植物快繁，具有的優勢明顯，①能高度保持遺傳性狀穩定，②繁殖系數高，③生產周期很短，④生產過程中占地面積小等，該技術在花卉植物生產中受到越來越多的重視。

3.玉簪組培的影響因素

玉簪離體培養時影響因素眾多。根據文獻報道，分為外在與內在兩種因素，外在因素主要有培養基成份、激素種類與用量等方面；內在因素主要有外植體取材部位、取材時間等。

3.1外在因素

3.1.1 培養基選擇 培養基種類的選擇直接決定了植物組織培養的成敗，不同種類的植物需要使用不同的培養基。目前常用的基本培養基包括B5、N6、SH、White及MS等。不同培養基的主要區別是無機鹽含量不同，選擇時主要關注其離子的種類以及濃度，特別是硝態氮氨態氮的比例。植物組織培養中最常用的是MS培養基，MS的特點是鉀、氮、硝酸鹽、銨鹽含量高。文獻報道玉簪的組織培養多以MS培養基為主。

3.1.2 激素的選擇 植物組培過程中，激素的種類、組合及使用濃度發揮著不同的效應，文獻報道，玉簪的組織培養的過程中，激素較常用的細胞分裂素有KT-30、BA、TDZ，ZT。常用的生長素有2，4-D、IBA、NAA、IAA。

玉簪的組培中最常用的是BA與NAA組合。如郝硯英等以花葉玉簪甜心、王冠以及法蘭西等的芽為外植體進行培養使用的BA與NAA組合。顧德峰等以白玉簪的莖芽為外植體，使用ZT、BA與NAA三種激素組合進行誘導增殖。馮慧等利用法蘭西和白玉簪的花作為外植體，用了BA與NAA。王春婷發現對芽、幼花及花葶的誘導誘導和增殖，最佳的激素也是BA與NAA的組合。張洪娣等以紫萼根莖為外植體進行愈傷組織的誘導及分化，發現BA、NAA及2，4-D是最適當的激素組合。

3.1.3 培養條件 培養條件主要包括外在的環境因素及內在的繼代周期和繼代次數，環境因素主要有光照強度、溫度、pH、濕度等。光的主要作用是在培養過程中的形態建成，其中光照強度、光照時間的不同會對外植體材料的培養產生不同的影響，文獻指出應根據培養材料的不同，選擇不同的光照時間和光強進行培養。大多數植物材料適宜的培養溫度約24±2℃。培養基中瓊脂用量，直接影響培養瓶中的濕度大小，并影響苗的生長，外植體材料的大小，光照強度與時間及溫度的高低等都是影響瓶內濕度的重要因素。培養瓶內濕度太大培養物容易出現玻璃化現象，或者抑制培養材料生長，故應該控制瓶內濕度。瓶內的空氣質量及組成直接影響材料的生長及分化，幼苗在瓶內長時間生長會出現生長緩慢甚至葉片發黃脫落，這是由于瓶內的乙烯累積過多造成的。還有的材料繼代后或者繼代培養時間長些會出現褐化死亡，這主要是培養基中累積的醌類物質對材料的毒害作用引起的。一般情況下，繼代周期的延長和繼代次數的增加會導致變異頻率的上升。

3.1.4 污染的影響 污染主要分為細菌性污染和真菌性污染。細菌性污染在培養的1-3d即可發現，真菌性污染一般3d-15d才有癥狀出現，主要由霉菌引起。操作不規范、接種室空氣不清潔、外植體消毒不徹底、培養基滅菌不完全、接種用具滅菌不徹底、外植體含有內源真菌等均可引發污染。這類污染可通過規范的操作及調整外直體滅菌時間來避免。

3.2內在因素

3.2.1 基因型的影響 在植物組織培養的過程中發現，不同基因型的培養材料在誘導及增殖過程中所需要的激素濃度不同。以3個玉簪品種的花蕾建立快繁體系的研究中，楊丹等發現不同品種在增殖過程中最佳激素配比不同，最佳生根配比也不同。魏進莉等以2個品種大花萱草的花梗、花蕾為外植體，研究其組織培養的最佳激素配比，發現品種不同在愈傷增殖及芽形成過程中對激素的配比需求也不同。因此，玉簪的組織培養中花葉嵌合體品種不宜使用葉片和花序為外植體，而應采用莖尖或腋芽作為外植體，對普通綠葉品種來說不存在這種問題。

3.2.2 外植體的選擇與取材時期 在組織培養過程中，最好選擇生長旺盛、木質化程度低、具有較強分化能力的幼嫩外植體。文獻報道玉簪最早使用的外植體是腋芽，后來發展到以花器官（花蕾、花葶、子房、花梗）、胚、葉片等為外植體進行組織培養，且都成功獲得培養體系。

4.展望

近年來隨著對植物組織培養技術的發展，特別是對玉簪屬植物組織培養的研究改善了玉簪繁殖的瓶頸，提高了玉簪繁殖的速度。目前高速發展的植物組織培養技術為玉簪大量獲得同步化苗木的繁殖提供了新的研究思路了和廣闊前景。

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