TPPA-凝膠結(jié)合法用于梅毒特異性抗體檢測的實(shí)驗(yàn)研究

陳稼琳

（太原市第三人民醫(yī)院，山西 太原 030000）

應(yīng)用TPPA來進(jìn)行梅毒特異性抗體的檢測過程中，其主要是應(yīng)用了抗原包被的明膠顆粒，并具備有穩(wěn)定性良好的檢測優(yōu)勢，從而有效克服以往TPHA檢測法中的結(jié)果不穩(wěn)定這一因素，因此在梅毒特異性抗體的檢測過程中也得到了較為廣泛的應(yīng)用。而微型柱凝膠技術(shù)作為近年來發(fā)展的一種新技術(shù)，在免疫血液學(xué)中抗原抗體的凝聚反應(yīng)中也得到了較為廣泛的應(yīng)用。本文主要就TPPA-凝膠結(jié)合法對(duì)于梅毒特異性抗體的檢測效果進(jìn)行了探究分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年7月～2017年7月本院收治的梅毒患者100份的血液標(biāo)準(zhǔn)作為研究對(duì)象，分別應(yīng)用TPPA檢測法以及TPPA-凝膠結(jié)合法進(jìn)行檢測，就兩者的檢測結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。

1.2 方法

對(duì)照組應(yīng)用TPPA檢測方法進(jìn)行檢測，觀察組則應(yīng)用TPPA-凝膠結(jié)合法來進(jìn)行檢測，主要方式如下。在96孔U型板的第1孔中加入TPPA的A稀釋液100 μL，在第2.3.4行孔各加25 μL，待檢標(biāo)本25 μL加入到第1行孔混勻后取25 μL后加入到第2行，然后在混勻稀釋之后加入到第3行孔混勻，然后依次加入到第4行孔之中。在第4行孔中加入到融化完全的C陽性顆粒25 μL，進(jìn)行陽性對(duì)照血清的操作[1]。將檢測物置入微型振蕩器中進(jìn)行為期30s的震蕩，然后應(yīng)用微量加樣器分別在3.4行中各孔液加入到帶有編號(hào)的微型凝膠柱上腔之中，在37℃中進(jìn)行為期15 min的孵育，在卡式離心機(jī)中進(jìn)行10 min的離心處理，進(jìn)行結(jié)果的判讀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 18.0軟件來進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理，P＜0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

在本次研究中TPPA-凝膠結(jié)合法其反應(yīng)結(jié)果表明顆粒完全凝聚存在于凝膠表面為陽性，其不凝集沉于柱底沉于柱底為陰性。在本次研究中100份無償獻(xiàn)血者的標(biāo)準(zhǔn)其應(yīng)用TPPA法以及TPPA-凝膠結(jié)合法來進(jìn)行檢測，其結(jié)果完全保持一致，見表1。

3 討 論

應(yīng)用凝膠技術(shù)來進(jìn)行紅細(xì)胞抗原抗體的檢測工作，其本質(zhì)在于應(yīng)用凝集反應(yīng)以及凝膠過濾相結(jié)合的模式來進(jìn)行血液標(biāo)準(zhǔn)的檢測，能夠以一種更為立體直觀的模式來對(duì)U型板中的凝集結(jié)果進(jìn)行有效的觀察[2]。通過凝膠技術(shù)來進(jìn)行血型的檢測，其能夠取得良好的抗原抗體檢測效果，因此也在梅毒特異性抗體的檢測過程中也得到了非常廣泛的應(yīng)用。

TPPA作為一種血凝實(shí)驗(yàn)，該檢測方法能夠?qū)鹘y(tǒng)TPHA檢測方法起到一定的優(yōu)化效果，并能夠使得雞紅細(xì)胞作為指示細(xì)胞這一缺點(diǎn)進(jìn)行有效的克服，并使得反應(yīng)結(jié)果不穩(wěn)定這一缺點(diǎn)得到有效的改善，并能夠起到良好的梅毒檢測效果。此外在傳統(tǒng)的TPPA檢測模式還存在有明膠指示顆粒跟紅細(xì)胞空間位阻一致的問題。在本次實(shí)驗(yàn)中將100份梅毒獻(xiàn)血者標(biāo)本來作為研究對(duì)象，并應(yīng)用TPPA法以及TPPA-凝膠結(jié)合法來進(jìn)行所有標(biāo)準(zhǔn)的合理檢測，其檢測結(jié)果表明基本保持一致。可以說在本實(shí)驗(yàn)中對(duì)于所有兩種檢測方法的血清以及血漿標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果基本保持一致。

在應(yīng)用結(jié)合法來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的過程中，進(jìn)行C、D顆粒的處理是關(guān)鍵所在，在檢測之前要求C、D顆粒能夠得到充分的融合，并需要在30 min以上的融化之后才能夠進(jìn)行標(biāo)本的有效檢測[3]。在實(shí)驗(yàn)過程中如果融化時(shí)間比較短，也就會(huì)導(dǎo)致顆粒難以得到有效的浸泡與膨脹，并難以取得良好的檢測效果。因此在檢測過程中還需要先在37℃這一溫度下進(jìn)行15 minde 孵化，并可能導(dǎo)致原本強(qiáng)陽性標(biāo)準(zhǔn)出現(xiàn)一定出現(xiàn)的弱陽性結(jié)構(gòu)，并直接影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[4]。因此只有在經(jīng)過足夠時(shí)間的浸泡以及反應(yīng)之后，才能夠取得良好的檢測結(jié)果。

此外在本次研究之中TPPA-凝膠結(jié)合法以及TPPA方法來對(duì)100份梅毒血液標(biāo)本來進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)TPPA-凝膠結(jié)合法以及TPPA方法兩者的檢測符合率基本保持一致，此外TPPA-凝膠結(jié)合法的檢測時(shí)間相對(duì)比較短，并能夠迅速取得良好的檢測效果。綜上所述，應(yīng)用TPPA-凝膠結(jié)合法來進(jìn)行梅毒血液標(biāo)本的檢測，其檢測符合率良好，并能夠有效縮短檢測的時(shí)間，從而給予患者的后期治療奠定一個(gè)良好的基礎(chǔ)，因此值得臨床應(yīng)用以及推廣。

表1 兩種方法檢測結(jié)果對(duì)比（n）

[1] 高春梅.梅毒檢測方法的臨床應(yīng)用研究[J].醫(yī)藥與保健,2014,(11)∶2-6.